химический каталог




Молекулярная биофизика

Автор М.В.Волькенштейн

ть» биологическую систему— вместо природной мРНК рибосомы взаимодействовали с синтетической цепью Поли-У. Этот полимер кодировал фени-лаланин. Если код триплетен, то остатку Фен отвечает кодоч УУУ. Воспользовавшись полицитидиловой кислотой Поли-Ц, Ниренберг и Маттеи нашли, что она стимулирует включение Про. Таким образом, для Про был установлен кодон ЦЦЦ.

Работа с полимерами, имеющими регулярные последовательности, например с ... АУАУАУАУ ..., оказалась невозможной, так как они образуют двуспиральные структуры, лишенные матричной активности [104]. Неактивен также Поли-Г. Полинуклео-тиды со случайной спиральной структурой не связываются с рибосомами. Далее (гы. [1, 5, 7]) изучалось действие сополимеров известного состава, но с неизвестной последовательностью

584

ГЛ. 9. БИОСИНТЕЗ ВЁЛКА

нуклеотидов. В таком полимере известна частота появления триплетов определенного состава. Сополимер А — У в пропорции 1 :5 стимулирует включение Фен, Лей, Иле и в меньших количествах Асн и Лиз. Если 100 — доля триплета ЗУ, то доля 1А2У — 20(ЗУ/1А2У = 5), 2А1У — 4(ЗУ/2А1У = 25) и ЗА — 0,8(ЗУ/ЗА = 125). Сравнивая эти значения со степенями включения (для Фен она принимается равной 100), можно установить состав кодонов для названных аминокислотных остатков, (табл. 9.2).

Таблица 9.2

Кодирующие триплеты, полученные на основании опытов

с Поли-АУ (1:5) [3]

Аминокислотный остаток Вычисленные доли триплетов Сумма Долей Включение аминокислоты

ЗА 2А 1У 1А2У ЗУ

Асн 4 4 6,6

Иле — 4 20 — 24 20

Лей — — 20 — 20 15

Лиз 0,8 4 — — 4,8 3,1

Тир — — 20 —> 20 25

Фен 100 100 100

Так были установлены триплеты ЗУ для Фен, 1А2У для Тир, 2А 1У и 1А2У для Иле, 1А2У для Лей, 2А 1У для Асн и ЗА и 2А 1У для Лиз. В дальнейшем последний триплет оказался не кодирующим Лиз, остальные подтвердились.

Однако эти опыты еще не дают полной расшифровки кода. Неизвестно, какой из трех кодонов АУУ, УАУ или УУА кодирует Тир и т. п. Подробная история исследования кода изложена в монографии Ичаса [5]. Полная расшифровка кода была получена в работах Ниренберга, применившего в последующих опытах уже не полинуклеотиды, а тринуклеотиды известного строения [105]. В системах образуются комплексы тринуклео-тид — тРНК — АК (аминокислота). Синтез полипеитида в этих условиях не идет, но, поскольку тринуклеотид имитирует кодон, образование комплекса позволяет прочесть его. Для этого нужно изучить все тРНК, которые последовательно связываются с меченными С14, аминокислотами. Так были исследованы все 64 триплета и установлено, с какими аминокислотами они связаны. Окончательную расшифровку, подтвердившую эти результаты, провел Корана (см. [106, 107]). Он синтезировал олиго-дезоксирибонуклеотиды, содержащие от 8 до 12 звеньев в цепи, с известной последовательностью. Они представляли собой по

вторяющиеся триплеты (например, (ТТЦ)4). Далее такой оли-гомер применялся в качестве матрицы in vitro для синтеза ДНК-подобного полимера в системе, содержавшей нуклеозид-трифосфаты Т, Ц, Г, А, нужное количество ионов и ДНК-поли-меразу (ср. стр. 537). При этом синтезировалась двойная спираль, подобная ДНК. Обе цепи спирали содержали комплементарные, повторяющиеся п раз триплеты. Каждая из цепей затем служила матрицей для синтеза полирибонуклеотида с помощью РНК-полимеразы.

Таким образом, Корана получил две цепи, имитирующие мРНК с известной последовательностью повторяющихся триплетов. Обе цепи вводились в бесклеточную систему, и определялось включение аминокислоты в полипептидную фракцию по методу Ниренберга. Эти элегантные опыты позволили проверить шесть кодонов в одном многостадийном синтезе в соответствии, со схемой

(ТТЦ)4

1

<ГАА)„

1

(УУЦ)*

1

| ДНК-полнмераза

I ~~

(ТТЦ)„

| РНк-полнмераза

(ГАА)„

| Весклеточная система

у

111 1-11

(Глу)„ (Лиз)я (Арг)„ (Фен)я (Сер)„ (Лей)*

Полимер (ГАА)п содержит кодоны ГАА, ААГ и АГА, а полимер (УУЦ)п — кодоны УУЦ, УЦУ и ЦУУ. Так как функциональность гомополимеров (ААА)П, (ЦЦЦ)Я, (ГГГ)„ и (УУУ)П уже определена, для проверки остальных 60 кодонов нужно провести 10 таких многостадийных синтезов.

Приведем установленный Ниренбергом с сотрудниками и Ко-раной ? с сотрудниками кодонно-аминокислотный словарь (табл. 9.3), а также обратный аминокислотно-кодонный словарь (та?л. 9.4).

Нуклеотиды расположены в последовательности букв А, Ц, Г, У, совпадающей с латинским алфавитом.

Кодоны ГУГ (Вал) и АУГ (Мет) кодируют указанные аминокислоты в середине цепи мРНК- Вместе с тем они служатг

586 ГЛ 9- БИОСИНТЕЗ БЕЛКА

Таблица 9.3

Кодоиио-амииокислотный словарь

1. AAA Лнз 17. ЦАА Глн 33. ГАА Глу 49. УАА

2. ААЦ Асн 18. ЦАЦ Гис 34. ГАЦ Асп 50. УАЦ Тир

3. ААГ Лиз 19. ЦАГ Глн 35. ГАГ Глу 51. УАГ —

4. ААУ Асн 20. ЦАУ Гис 36. ГАУ Асп 52. УАУ Тир

5. АЦА Тре 21. ЦЦА Про 37. ГЦА Ала 53. УЦА Сер

6. АЦЦ Тре 22. ЦЦЦ Про 38. ГЦЦ Ала 54. УЦЦ Сер

7. АЦГ Тре 23. ЦЦГ Про 39. ГЦГ Ала 55. УЦГ Сер

8. АЦУ Тре 24. ЦЦУ Про 40. ГЦУ Ала 56. УЦУ Сер

9. АГЦ Apr 25. ЦГА Apr 41. ГГА Гли 57. УГА —

страница 213
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228

Скачать книгу "Молекулярная биофизика" (4.80Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
плитка irta
крыша на качели садовые купить
прозрачная копилка
футбольная экипировка

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)