химический каталог




Молекулярная биофизика

Автор М.В.Волькенштейн

читанная по формуле (8,70), представлена сплошной кривой на рис. 8.26. Совпадение кривой (8.70) с опытной в области малых у получается при т = 5 и Х = 5-106 л/моль пар оснований. Та же оценка т сохраняется для ДНК из Т-четных фагов, в которых последовательность оснований близка к случайной, Мюллер и Крозерс[161] получили аналогичную оценку т из данных, относящихся к ДНК с неслучайной последовательностью. Это показывает, что среднее число пар Г — Ц, занимаемых одной молекулой актиномицина, по-видимому, близко к величине, найденной для полимера со случайной последовательностью. Значение т = 5 согласуется с ван-дер-ваальсовыми размерами молекулы актиномицина.

Изотерма адсорбции профлавина на ДНК согласуется с теоретическим расчетом, учитывающим взаимодействие адсорбированных молекул. При малых у имеем т = 3, К = 16-106 л/моль. В области значений 0,2 ^ у <с: 0,33 т в среднем убывает до 2, а К до 1,6-106 л/моль.

§ 8.7. РЕДУПЛИКАЦИЯ ДНК

В принципе возможны три механизма редупликации ДНК [162]: консервативный с сохранением исходной двойной спирали и созданием новой дочерней спирали, полуконсервативный (см. стр. 496) и дисперсный с равномерным распределением исходного материала между четырьмя цепями двух дочерних двойных спиралей (см. [6]). Месельсон и Сталь изучали редупликацию ДНК при делении клеток Е. coli с помощью меченых атомов и седиментации в градиенте плотности CsCl [76]. Была получена популяция клеток, меченных N15. В период интерфазы митоза эти клетки переносились в среду, содержавшую N14 (но не N15), и в ней делились. Из исходной популяции «детей» и «внуков» извлекалась ДНК и определялась ее плотность и радиоактивность. Исходная ДНК имела наибольшую плотность и была мечена N15. ДНК «детей» оказалась меченной наполовину и ее плотность равнялась среднему арифметическому плотностей 1\[15-ДНК и №4-ДНК- Наконец, ДНК «внуков» разделились при седиментации на две зоны — на зону с ДНК, меченную N14, и зону ДНК, содержащую оба типа ДНК. Эти результаты точно согласуются с полуконсервативным механизмом.

Отвлекаясь от вопроса о структуре хромосом высших организмов, укажем, что, пользуясь методом авторадиографии, Тейлор нашел, что их хромосомы в целом редуплицируются также полуконсервативно, и предложил модель, связывающую редупликацию хромосом с редупликацией ДНК [163] (см. также [6]).

Методом авторадиографии была изучена редупликация кольцеобразной двойной спирали ДНК — единственной хромосомы Е. coli. Включение тритиевой метки идет последовательно от ну-клеотида к нуклеотиду. Хромосома редуплицируется, начиная с некоторого локуса [164] (см. также [6]).

Корнберг провел редупликационный матричный синтез ДНК in vitro [165, 166]. Инкубационная смесь содержала трифосфаты всех четырех дезоксинуклеозидов (ТТФ, ЦТФ, ГТФ, АТФ), ионы Mg++ (6-10~3А1), полимеризующий фермент, выделенный из Е. coli, и нативную ДНК (из тимуса теленка) в качестве затравки; рН равнялось 7,5. В такой полной системе ДНК редуплицируется. Реакция не идет в отсутствие хотя бы одной из компонент или при предварительной обработке затравочной ДНК дезоксирибонуклеазой — ферментом, разрушающим ДНК-С помощью нуклеотидов, меченных Р32, показано, что синтез цепи ДНК поликонденсационный — при включении одного нуклеотида в цепь выделяется одна молекула пирофосфата Н4Р2О7. Согласно закону действия масс реакция тормозится при добавлении избытка пирофосфата. Если его количество в 100 раз превышает общее количество трифосфатов, скорость реакции уменьшается вдвое. Позднее, пользуясь улучшенной ферментной системой, Корнберг редуплицировал этим методом ДНК фага фЛ"174. Вновь полученная ДНК оказалась обладающей инфицирующим действием — при ее введении в бактериальную клетку синтезировались частицы фага [167]. С помощью ДНК-полимеразы удается синтезировать и двойные спирали из синтетических по-лидезоксирибонуклеотидовА-Т-А-Т—А—Т-А-Т-— Т-А — Т — А — Т — А-Т — АиГ-Г-Г-Г-Г-Г-Г-Г-ц-ц~ц-ц-ц-ц-ц-ц-.

В дальнейшем было установлено, что полимераза Корнберга является скорее репаразой — медленно действующим ферментом, заполняющим бреши в полинуклеотидных блоках. In vivo работает истинная полимераза. Мы еще мало знаем об этих ферментах.

Статистико-термодинамическое рассмотрение редупликации ДНК проведено в работах [168, 169] (см. также [6]). Изменение свободной энергии при образовании двух двойных спиралей из одной исходной двойной спирали и нуклеозидтрифосфатов можно представить в виде

AF = N {2EY + Ё2) - Т AS, (8,83)

где N— число нуклеотидов в цепи, Е]—_энергия, выделяемая при включении одного нуклеотида в цепь, Е2— среднее значение энергии, выделяемой в результате взаимодействий, стабилизующих уотсон-криковскую пару. Е2 зависит от относительного содержания а пар Г—Ц:

Ёг = сс?Гц + (1 - а) ?АТ. (8,84)

Изменение энтропии определяется заменой нуклеозидтрифос-фата (НТФ) на пирофосфат (ФФ) в растворе и утратой нуклео-тидом, включившимся в двойную спираль, вращательных и поступательных степеней свободы. Этот последний фактор запишем в виде к In q. В целом

AS =

страница 193
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228

Скачать книгу "Молекулярная биофизика" (4.80Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
absolut keramika avignon
замена катализаторов toyota
Электрические котлы Руснит РУСНИТ 230
гироскутер в городе недорого

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)