химический каталог




Биофизика

Автор М.В.Волькенштейн

ощью компьютера. Более простая процедура состоит в теоретическом расчете эффективных констант связывания Кэ$, числа связывающих цент5 6

I И I I и иИ I и I ^ (sax

и ы "" 7rTg

Рис 7.24. Графики зависимости г/Кт от г

Рис. 7.25. Значения параметра if (см. текст)

ров йэф и уровня насыщения для связывания гтат. Вычисленные значения сравниваются с экспериментальными с помощью графика Скатчарда (рис. 7.24). Имеем

Нш (г/т). (7.43)

771—» оо I г->о аг

где г — молярное отношение числа связанных лигандов к числу пар оснований ДНК, га — концентрация свободного лиганда в растворе. Статистическая механика приводит к следующим значениям:

где

„ = а?*г (1 - ^'ГЦ (7.45)

Здесь х — доля пар AT в полимере, К — истинная константа ассоциации. Параметр ij> учитывает уменьшение числа возможных положений на полимере, для второй молекулы лиганда вследствие присутствия первой молекулы. Связывание последовательных лигандов происходит не независимо. Значения параметра ур показаны на рис. 7.25 (a) fAT = 0, /гц = Q; ф— = 2(а-1); б) /Ат = 1, *гц = 0; ^=2(a~l)z; в) UT = 1, lm = 1; ф =~ = 2(а-2)ж{1-д;); г) /Ат = 2, /Гц = 0; ^ = 2х + 2(а - 2)х2; ...; д) гАТ == of, а—1

Таким образом, например, в случае гомополимера, когда связывание не-вависит от отношения AT/ГЦ, получаем

^аф = ^ (2ос— 1), „эф^rmax=J_. (7.46).

Различие между в3ф и гтах количественно объясняется на .основе принятой модели. Длина лиганда а может быть определена из экспериментальных: значении и Тщаь. Из изотерм связывания этидиумбромида, спермина, актиномицина и нетронсина двойной спиралью ДНК получены значения а, равные соответственно 2, 4, 5 и 5 парам оснований. Эти значения близки- к ожидаемым на основе молекулярных размеров лигандов.

Меньшие молекулы типа акридиновых красителей либо прослаиваются между парами оснований в двойной спирали ДНК (модель интеркаляции Лермана), либо располагаются в узкой бороздке на поверхности двойной спирали (модель Гурского). По-видимому, встречаются как одни, так и другие комплексы. Эти вопросы обсуждаются далее на с. 290—292.

§ 7.7. Редупликация ДНК

При делении клеток генетический материал удваивается, происходит редупликация двойной спирали ДНК. В принципе возможны три механизма редупликации: консервативный с сохранением исходной двойной спирали и построением дочерней двойной спирали, тождественной исходной; полуконсервативный, при котором две дочерних двойных спирали содержат каждая по одной новой и по одной старой цепи; и, наконец, дисперсный механизм с распределением исходного материала между четырьмя цепями двух дочерних двойных спиралей. Месельсон и Сталь (1958) изучали редупликацию ДНК при делении клеток Е. coli с помощью меченых атомов и седиментации в градиенте плотности CsCl. Была получена популяция клеток, меченных 15N. Эти клетки переносились в среду, содержавшую 14N, но не l5N, и в ней делились. Из исходной популяции, из популяций «детей» и: «внуков» извлекались молекулы ДНК и определялись их плот^ ность и радиоактивность. Исходная ДНК, меченная 15N, имела наибольшую плотность, ДНК «детей» оказалась меченной наполовину и ее плотность равнялась среднему арифметическому плотностей 15К-ДНК и 14Г\Т-ДНК. Наконец, ДНК «внуков» разделилась при седиментации на две зоны — зону с ДНК, тождествей-ной дочерней, меченной наполовину, и на зону с немеченной

ДНК. Схематически это можно представить так:

15N-15N -> 215N-14N -> 2,5N-14N + 214N-l4N.

Эти результаты согласуются с полуконсервативным механизмом. Он подтверждается и другими данными.

Редупликацию ДНК удалось наблюдать in vitro (Корнберг, 1960). Бралась инкубационная смесь, содержащая все четыре ну-ллеозидтрифосфата (АТФ, ГТФ, ТТФ, ЦТФ), ионы Mg2+(6X М). полимерйзующий фермент, выделенный из клеток Ё." c&li, и нативную ДНК (из тимуса теленка) в качестве матричной затравки; рН 7,5. В такой системе ДНК редуплицирует-ся — получаются молекулы, тождественные затравочным. Процесс пе идет в отсутствие одной из компонент или при предварительной обработке затравочной ДНК дезоксирибонуклеазой — ферментом, разрушающим ДНК. С помощью нуклеотидов, меченных ^2f\ показано, что синтез ДНК является поликонденсацией мономеров — при включении одного нуклеотида в цепь выделяется одна молекула пирофосфата Н4Р207. Согласно закону действия масс, реакция тормозится при добавлении избытка пирофосфата. Если его количество в 100 раз превышает общее количество трифос-ч})атов, скорость реакции уменьшается вдвое. Вновь полученная ДНК обладает биологическими свойствами исходной. Так, при синтезе с затравкой ДНК фага 9^X174 получается ДНК, имеющая инфицирующее действие — синтезируются частицы фага. С помощью полимеризующего фермента ДНК-полимеразы удает-•Ся-получать синтетические полидезоксирибонуклеотиды, образующие'двойные спирали при наличии комплементарности:

—А—Т—А—Т— А— Т-А—Т—

—Т-А—Т—А—Т—А—Т—А—

91

— Г—Г—Г—Г—Г—Г—Г—Г— -Ц-Ц-Ц-Ц-Ц-Ц-Ц-ЦИзменение свободной энергии при образовании двух двойных спиралей из одной исходной двойной спирали и нуклеозидтри-фосфат

страница 94
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228

Скачать книгу "Биофизика" (6.44Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
дачи по новой риге от собственника
односпальная кровать орматек
наколенники torres classic
стол обеденный пристенный опус купить в москве

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.05.2017)