химический каталог




Практические работы по органической химии. Выпуск первый и второй

Автор Ю.К.Юрьев

одвижный растворитель производит разделение компонентов смеси, стекая по бумаге вниз;

г) круговая (радиальная), в которой подвижный растворитель, поступающий к центру кружка бумаги, продвигает компоненты смеси радиальио по кругу.

Ниже приводятся примеры качественного анализа смесей органических соединений различных классов при помощи хроматографии иа бумаге.

1. ОДНОМЕРНАЯ ВОСХОДЯЩАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ НА БУМАГЕ

Прибором для выполнения одномерной восходящей хроматографии на бумаге (рис. 39) служит стеклянный цилиндр с притертой крышкой (или мерный цилиндр на 1 л с резиновой пробкой, или две нижние части двух эксикаторов, соединяемые но шлифам и т. п.), иа дно которого наливается подвижный растворитель или помещается сосуд с растворителем (например, кристаллизатор). Полоса фильтровальной бумаги подвешивается иа стеклянном стержне, закрепленном вверху цилиндра (на одной или двух пробках или на стеклянных стойках).

Для получения хроматограммы применяется специальная хроматографическая бумага; причем размер полосы зависит от поставленной задачи, высоты и объема цилиндра (камеры). В рассматриваемых ниже примерах достаточно вырезать полоску бумаги 40—60 см длины при ширине, несколько меньшей диаметра цилиндра. Можно пользоваться и более широкой полосой бумаги, нз которой делают цилиндр, сшивая края бумаги в двух-трех местах. Бумажный цилиндр удобен тем, что его можно прямо ставить на дно камеры в растворитель.

Отступя от нижнего края полосы бумаги, проводят карандашом линию, которая при хроматографнровании должна быть на 2—3 см выше уровня растворителя в камере. На этой линии иа расстоянии 2—2,5 см от краев бумаги отмечаются кружками диаметром 3 мм места, и а которые наносят затем капли исследуемого раствора. Расстояние между каплями анализируемых проб должно быть не менее 2 см.

Капля раствора анализируемой смеси веществ (0,5—1 мг в 1 мл) наносится из капиллярной пипетки при легком при-

150

косновении ее к отмеченным местам, чтобы раствор заполнял только отмеченную плошадь н во всяком случае образующееся пятно имело бы диаметр не более 5 мм. После высы-

Рис. 39. Приборы для восходящей одномерной

хроматографии на бумаге: ? — стеклянный цилиндр; 2 — пробка резиновая млн пришлифованная; 3—стеклянный стержень

(на рисунке справа укреплен на двух пробках) для подвешивания бумаги; 4 — полоса бумаги; 5 — зажимы для бумаги; 6—растворитель

хання пятна снова наносят каплю раствора и повторяют это несколько раз (после высыхания предыдущей капли) с тем, чтобы количество нанесенного раствора составляло не менее 0,01 мл.

В среднем капилляре диаметром 0,5 мл на конце, вытянутом из стеклянной трубки (см. рнс. 40), 0,01 мл раствора занимает ~ 10 см по длине.

Затем бумажную полоску высушивают и подвешивают в герметически закрываемой камере таким образом, чтобы она не касалась стенок и конец ее погружался в налитый на дно

151

растворитель на расстоянии 2—3 см от черты, на которой наносились капли раствора; бумажный цилиндр ставят на дно цилиндра в растворитель, соблюдая те же условия.

Рис, 40. Капилляр для нанесения капель

Рекомендуется помещать камеру в другой сосуд (нли кожух) большего размера нлн закрывать колпаком (из бумаги, плотной материи н т. п.) для защиты от воздушных потоков и обусловливаемой ими неравномерности нагревания, следствием чего может являться неравномерное проявление хроматограммы.

Закрытую камеру оставляют стоять до тех пор, пока фронт растворителя не поднимется почти до верха бумажной полоски (12—18 час.), а затем вы- • нимают хроматограмму н карандашом отмечают на ней верхнюю границу фронта растворителя. После высушивания (на воздухе или в сушильном шкафу) хроматограмму опускают на несколько секунд в ванночку с раствором реагента-индикатора или опрыскивают им из пульверизатора (хроматограмму, полученную на бумажном цилиндре, перед проявлением следует развернуть).

Для развития окраски пятен хроматограмму после опрыскивания помещают на 5 мин. в сушильный шкаф, нагретый до 90—100", илн оставляют иа несколько часов в темноте между листами фильтровальной бумаги, после чего обводят карандашом окрашенные пятна, чтобы точно отметить их положение (рис. 41). Идентификация каждого компонента смесн по окрашенному пятну производится на основании расчета величины коэф-

Рис. 41. Вид бумажной хроматограммы после обработки реагентом-индикатором: / — отмеченная линия нанесения капель «линия старта»; 2 — центр пятка одного из компонентов исследуемой смеси; 3—центр пятна второго компонента; 4 — линия фронта растворителя

152

фициента распределения (Rf). Для вычисления Rf измеряют: а) расстояние х (в мм), пройденное веществом, т. е. расстояние от линии нанесения вещества («линия старта») до центра пятна, и б) расстояние у (в мм), пройденное растворителем от той же «линии старта» до фронта растворителя. Значение Я/ вычисляется по формуле

Rf=~. У

По таблицам Rf индивидуальных веществ в соответственных системах растворителей, опубликованным в литературе, находят, какому веществу соответствует найденная величина.

Другим и притом весьма надежным способом идентификации компонентов смеси при помощи бумажной хроматографии является «способ свидетелей». По этому способу на расстоянии 3—4 см в ту н другую сторону от капли смеси на той же «линии старта» наносят капли «свидетелей». После хромато-графироваиия и выявления пятен сопоставляют положение пятен компонентов исследуемой смеси с положением пятен заведомо известных веществ — «свидетелей».

Хроматографическое определение аминокислот

раствора 1 мг аминокислоты (глн- ~i кокола, аланина, валина, фенилала- [ — по 0.01 мл (10 цлг нина) в I мл воды или этилового I один средний напил-

спирта........... ляр)

н-бутилового спирта ...... 40 мл

уксусной кислоты ледяной .... 10 мл

0,5%-ного раствора илнгидрина в метиловом спирте

Растворителем служит смесь 40 мл «-бутилового спирта. 10 мл ледяной уксусной кислоты и 50 мл воды; смесь встряхивают в делительной воронке и после отстаивания отделяют верхний слой, который н применяется в качестве растворителя.

Реагентом-индикатором на аминокислоты — наиболее общим н чувствительным — является нингидрин (трикетогидр-инден) *;

fVco.

2 /CO+2R-CH—COOH-

ч/-со/ I

_ ¦ NH,

* Аминокислоты, полипептиды и пептоны при кипячении с водным раствором нингидрина дают синее окрашивание; нингидринная проба очень чувстпительна.

153

ONHj

CO-

il—CO.

>

J ¦ |+2C08+2RCHO.

Для качественного определения 1—2 у аминокислоты применяют 0,5% -ный раствор нингидрина в метиловом спирте.

Капли водного нли спиртового раствора каждой аминокислоты— гликокола, аланина, валина и фенилаланина — наносят отдельно на полоску фильтровальной бумаги (или бумажный цилиндр), как описано выше, высушивают, закрепляют полоску на стеклянном стержне и погружают конец полоски в растворитель, налитый на дно плотно закрываемого цилиндра (бумажный цилиндр ставят на дно, в растворитель).

Через 12—18 час. полоску вынимают, отмечают фронт растворителя, высушивают в сушильной камере нли в токе холодного воздуха, а затем сухую хроматограмму опрыскивают слегка раствором реагента-нндикатора из хорошо действующего пульверизатора. После опрыскивания хроматограмму помещают между листами фильтровальной бумаги н оставляют на 1 час в темном месте нлн помещают на 5—10 мин. в сушильный шкаф при 100°. За это время происходит развитие окраски пятен (лиловые пятна в местах нахождения аминокислот). Затем для закрепления пятен хроматограмму опрыскивают 10%-ным водным раствором сернокислого никеля (розовые пятна).

Измерив расстояния х и у, вычисляют Rf для компонентов исследуемой смеси и сравнивают их со значениями Rf, установленными для различных аминокислот в системе «-бутиловый спирт—вода—уксусная кислота (4:5:1) на ленинградской хроматографнческой бумаге при 20°, приведенными в табл. 13.

Таблица 13

Значения Rf для аминокислот в системе м-бутило-вый спирт—вода—уксусная кислота (4:5:1) на ленинградской хроматографнческой бумаге при 20s

Аминокислота

страница 34
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88

Скачать книгу "Практические работы по органической химии. Выпуск первый и второй" (3.5Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы по экселю профессионально
гле обучают на свадебного флориста-декоратора
wnk 315/1 характеристики
Protherm Медведь TLO 50

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)