химический каталог




Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром»

Автор С.Н.Сычев, К.С.Сычев, В.А.Гаврилина

С, при минимальном объеме и количестве вещества в пробе. Несоблюдение этих правил может привести к уменьшению эффективности хроматографической колонки в 2-3 раза (!). Реальная эффективность хроматографической колонки сильно зависит от размывания пробы во внеколоночных элементах конструкции хроматографа: в узле ввода пробы (инжектор), в соединении между инжектором и хроматографической колонкой, в соединении между колонкой и кюветой детектора, в самой кювете детектора. Например, автоматизация узла ввода пробы в хроматографах "Милихром-2" и "Милихром-4" привела к потере в среднем около 15% эффективности колонки по сравнению с обычным "Милихромом". Конечно, изменить конструкцию прибора в большинстве случаев не удается, но уменьшить длину капилляров, соединяющих узел ввода пробы и колонку, а также колонку и детектор, - просто необходимо. Тем не менее, эффективность колонки лучше измерять на хроматографах серии "Милихром". В реальном анализе эффективность колонки может быть значительно ниже указанной в паспорте. Так происходит тогда, когда не удается устранить уширение хроматографического пика, обусловленное межмолекулярными взаимодействиями (обычный случай для обращенно-фазового варианта).

Таким образом, при тестировании хроматографических колонок, заполненных силикагелем, может быть использована смесь о-, м- и п-нитроанилинов в качестве адсорбатов и элюент «гексан-хлороформ-2-пропанол» в соотношении 70:22:8 или 70:20:6 по объему. Расчет эффективности производится по хроматографическому пику п-нитроанилина.

Тестирование колонок, заполненных обращенно-фазовыми адсорбентами (химически алкил-модифицированные силикагели типа С8, С16 и С18), лучше производить смесью "бензол-нафталин-антрацен" или "нафталин-антрацен-м-терфенил" при использовании элюента "ацетонитрил-вода" в соотношении от 60:40 до 75:25 по объему в зависимости от содержания углерода в адсорбенте. Для сорбентов, содержащих 12-14% углерода, предпочтительнее элюент "ацетонитрил-вода" в соотношении 55:45. При содержании углерода 16-18% и выше используются элюенты с содержанием ацетонитрила, большим 70% по объему. Расчет эффективности ведется по антрацену или м-терфенилу. При подготовке колонки к анализу бенз(а)пирена расчет эффективности целесообразнее проводить по бенз(а)пирену (рис. 2.6). В этом случае используется элюент "ацетонитрил-вода" в соотношении 75:25 или 80:20.

а

б

II N И S 1 И I

I I М I И М S II

Рис. 2.6. Определение эффективности колонок 80x2: а - заполнена силикагелем Силасорб-600,5 мкм. Элюент «гексан-хлороформ-изопропанол» 76:18:6, спектрофотометрический детектор, длина волны 290 им, расход 150 мкл/мин; 1 - о-нитроанилин, 2-м-ннтроанилнн, 3 - п-нитроанилин; N = 6100 т.т.; б - заполнена Диасорбом (16, 5.2 мкм. Элюент «ацетонитрил-вода» 80:20, длина волны 254 им, расход элюента 100 мкл/мин.; 1 - нафталин, 2 - антрацен, 3 - м-терфенил, 4 - бенз(а)пирен; N = 7200

Считается, что наименьшая высота и ВЭТТ составляет два диаметра частиц адсорбента (такое представление достаточно условно):

Hmin = 2 • dp,

(2.7)

где dp - диаметр частицы адсорбента.

Пусть хроматографическая колонка хроматографа "Милихром" (80x2) длиной 80 мм заполнена адсорбентом с диаметром частиц 5 мкм. В этом случае максимальная эффективность колонки равна L/ 2dp = 80 мм/10 мкм = 8000 т.т. На практике хорошо набитыми колонками считаются те, у которых и ВЭТТ составляет 2-3 dp.

При сравнении эффективности хроматографических колонок разной длины используется понятие удельной эффективности колонки.

Удельной эффективностью называется эффективность хроматографической колонки в пересчете на 1 м ее длины. Рассчитаем удельную эффективность колонки, заполненной адсорбентом с диаметром частиц адсорбента 5 мкм при качестве набивки в 3 dp: 1000мм/(3- 0,05мм) = 67000 тт. Большинство современных аналитических коммерческих колонок как раз имеют удельную эффективность порядка 60000-70000 тт,/м. Для стандартных колонок хроматографов серии "Милихром" (80x2) эффективность колонок, заполненных сорбентом с диаметром частиц 5мкм и высотой и - 3 dp, составляет: 80000мкм/15мкм = 5300 тт.

Величины эффективности и удельной эффективности в совокупности служат характеристиками разделительной способности колонок, а величина и В ЭТТ - характеристикой качества набивки колонки адсорбентом. Например, если и колонки составляет 2 dp, а диаметр частиц 10 мкм, то эффективность колонки длиной 80 мм составит всего 4000 тт., т.е. при отличном качестве набивки эффективности колонки недостаточно для решения ряда задач. Кроме величины Н, еще одной характеристикой качества набивки колонки является коэффициент асимметрии, который определяется по формуле:

As = В/А, (2.8)

где As - коэффициент асимметрии;

Рис. 2.7. Коэффициент асимметрии хроматографической колонки

А и В - отрезки, взятые на расстоянии 0.1 высоты пика от его основания (рис. 2.7).

Наименьшие значения и (высота эквивалентной теоретической тарелки), а следовательно, лучшие показатели качества заполнения колонок различн

страница 6
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33

Скачать книгу "Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром»" (1.66Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
компютерные курсы для начинаюших
Trenkle 412Q
cutipol
ножи кованые кухонные купить

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)