оферол-ацетата и 1 мл фармакопейного раствора ретинол-ацетата помещают в колбу для омыления. После омыления, экстракции и очистки на колонке с силикагелем элюат упаривают на роторном испарителе досуха. Остаток перерастворяют в 1 мл гексана. 1 мл градуировочного раствора соответствует 250 мкг или 10.000 ME витамина Дз, 1000 мкг витамина Е и 100.000 ME витамина А. Из исходного градуировочного раствора можно приготовить ряд растворов с меньшими концентрациями витаминов путём его разбавления гексаном. Градуировочные растворы можно хранить в холодильнике в течение месяца, внеся в них бутилокситолуол в расчёте 50 мг БОТ на 100 мл гексанового раствора.

8.4.3 Хроматографический анализ

Для хроматографического анализа применяются: колонка 100x2, заполненная адсорбентом Силасорб-600 (5 мкм), реактивы: гексан, изопропанол «осч». Условия хроматографического анализа: подвижная фаза «гексан-изопропанол» в объёмном соотношении 98.8:1.2, детектирование: 264, 290 нм, скорость подачи подвижной фазы 150 мкл/мин, объём вводимой пробы - 5 мкл.

8.5 Применение универсального элюента для анализа подсластителей и консервантов в напитках

Известна утвержденная методика [5] определения аспартама, сахарина, кофеина и бензойной кислоты, совершенно непригодная для применения на хроматографах серии "Милихром". Основным отличием предложенной хроматографической системы от использованной в методике [5] является добавление в элюент диэтиламина, которое позволяет эффективно использовать хроматографы серии «Милихром» для решения любой подобной задачи с хроматографическими колонками, заполненными обращенно-фазовым сорбентом любого типа (рис. 8.5, 8.6 и 8.7).

На рис. 8.5 хорошо видно уширение хроматографического пика аспартама, приводящее к резкому ухудшению воспроизводимости результатов по аспартаму. Использование сорбентов типа Диасорб C10CN в совокупности с градиентным элюированием не решает проблему уширения хроматографических пиков азотсодержащих подсластителей.

Наоборот, применение универсальных элюентов полностью снимает эту проблему.

Параметры Управ.>ПЛ1,Т Обработка Таблицы Печать

1.319

1.200

Опорная

0.000

~~i—

5.000

1

10,000

—I—

15.000

19.301

С:SSERGSUINCHR0M4DRIMKSzenbzB2.std 62.09.1999 19:48:18

F1 F2

Ь PGUP PGDN: + --»«-fl«-iBS

Рис. 8.6. Хроматограмма напитка «Земляника». Колонка 80x2 заполнена Диасорбом С16 (16% С). Элюент «буфер А - ацетонитрил» в соотношении

82:18. Буфер А готовится следующим образом: в 100 мл 0.0125М КН2РО4 добавляется 1 мл ДЭА; раствор доводится до рН - 3 о-фосфорной кислотой. 1 - сахарин, 2 - аспартам, 3 - бензойная кислота

4.0003.000

2.00013

WW

т

т

hi

Т

0.000 -.271

0.000 5.000 10.000 15.000

С: SSERGSUIHCHBQMSBH1 NKSkyB1.081 87.11.1999 2В:28:38

16

19.400

Рис. 8.7. Хроматограмма напитка «Байкал». Колонка 80x2 заполнена Диасорбом С16 (16% С). Элюент «буфер А - ацетонитрил» в соотношении 82:18. Буфер А готовится следующим образом: в 100 мл 0.0125М КН2РО4 добавляется 1 мл ДЭА; раствор доводится до рН = 3 о-фосфорной кислотой. 5 - сахарин, 7 - кофеин, 8 - аспартам, 12 - бензойная кислота

Литература

1. «Методические указания по обнаружению, идентификации и

определению содержания афлатоксинов в продовольственном сырье и

пищевых продуктах с помощью тонкослойной хроматографии и

высокоэффективной жидкостной хроматографии». МУ № 4082-86.

2. Методические указания по обнаружению, идентификации и

определению содержания дезоксиваленола (вомитоксина) и зеараленона в зерне и зернопродуктах. - М.: Минздрав СССР, 1990. - 13 с.

3. Скурихин В.Н., Шабаев СВ. Методы анализа витаминов А, Е, Д и каротина в кормах, биологических объектах и продуктах животноводства. - М: Химия, 1996. - 115 с.

4. Оценка качества кормов, органов, тканей, яиц и мяса птицы. Методическое руководство для зоотехнических лабораторий. -Сергиев Посад: ВНИИТИП, 1998. - 115 с

5. Методические указания по определению сахарина, аспартама, кофеина и бензоата натрия в безалкагольных напитках методом ВЭЖХ. - М.: Госстандарт РФ, 1996. - 14 с.

9. ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ БЕНЗ(а)ПИРЕНА

Проблема определения бенз(а)пирена является сложной аналитической задачей. Это вещество — один из самых сильных канцерогенов; обнаружение бенз(а)пирена в воде, воздухе или пище является признаком присутствия в тех же объектах целого ряда полиядерных соединений, обладающих не менее сильным канцерогенным действием. В связи с этим анализ бенз(а)пирена в очень небольших концентрациях является важнейшей задачей.

В этом разделе рассмотрены две задачи - определение бенз(а)пирена в воздухе [1] и копченостях.

9.1 Методика количественного анализа атмосферного воздуха и воздуха рабочей зоны на содержание бенз(а)пирена методом ВЭЖХ с использованием хроматографа «Милихром-5-7» с флуориметрическим детектором

9.1.1 Характеристика метода

Метод основан на использовании жидкостной хроматографии с флуориметрическим детектированием. Отбор проб производится с концентрированием на фильтр. Определению не