химический каталог




Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром»

Автор С.Н.Сычев, К.С.Сычев, В.А.Гаврилина

бочий режим не превышает 30 мин. Предел детектирования при использовании УФ-детектора на длине волны 224 нм составляет 0Л мг/кг (рис. 8,2).

0 2 4 6 8 Ю Рис. 8,2» Хроматограмма экстракта пшеницы: 1 - дезоксиинваленол

8.3 Определение зеараленона в зерне и зернопродуктах методом НФ ВЭЖХ

Минздравом РФ утверждена методика определения зеараленона

методом нормально-фазовой жидкостной хроматографии [2]. Ее

основным недостатком является использование элюента,

содержащего 50% диэтилового эфира. Учитывая, что температура

кипения эфира

34 °С, а температура кюветного отделения микроколоночного хроматографа серии «Милихром» 33 - 36 °С, становится очевидно, что стандартные детекторы этих приборов неработоспособны при использовании указанного элюента. В результате адаптации был предложен следующий состав элюента: «гексан-хлороформ-изопропиловый спирт-уксусная кислота» в соотношении 65:25:1.5:1 по объему.

Дяя хроматографического анализа применяются колонки 80x2 или 100x2, заполненные адсорбентом Силасорб-600 (6 мкм), реактивы: гексан, уксусная кислота марки «Extra Рше», бензол и изопропанол

«осч», хлороформ марки «фарм», стабилизированный этанолом («Химед», г. Москва), ацетонитрил, сорт 1 («Криохром», г. Санкт-Петербург).

В качестве градуировочного раствора применяются ГСО зеараленона в смеси «бензол-ацетонитрил» 98:2 или в чистом бензоле с концентрацией 10-20 мкг/мл или ГСО с концентрацией 100 мкг/мл, разбавленный в пять раз.

Условия хроматографического анализа: подвижная фаза «гексан -хлороформ-изопропиловый спирт-уксусная кислота» 65:25:1.5:1, детектирование на длине волны 282 нм, скорость подачи подвижной фазы - 150 мкл/мин, объём вводимой пробы - 5 мкл.

8.3.1 Требования к проведению хроматографического анализа

1. Обязательным условием воспроизводимости анализа является

использование одинаковых объёмов проб анализируемой смеси и

градуировочного раствора как при проведении анализа, так и при

кондиционировании хроматографической колонки.

2, Кондиционирование колонки достигается многократным (510 раз) элюированием градуировочного раствора зеараленона.

Критерием завершения кондиционирования является воспроизводимость времён удерживания исследуемого вещества. Оптимальный удерживаемый объём составляет порядка 1500 мкл (9-10 минут при скорости подачи 150 мкл/мин.).

8.3.2 Подготовка пробы

1. Подготовка пробы проводится по методике [2].

2. Сухой остаток перерастворяется в смеси «бензол-ацетонитрил»

98:2.

8.3.3 Примечания

1. При использовании для приготовления элюента хлороформа с содержанием этанола менее двух объёмных процентов (допустим, технического хлороформа) могут наблюдаться случаи, когда исследуемое соединение удерживается слишком сильно или не

элюируется вообще, «мягкое» усиление элюента путём увеличения объёмного содержания хлороформа (требование 3) не приводит к заметному результату. В таких случаях рекомендуется увеличить объёмное содержание метанола в элюенте.

2. При тщательном выполнении пробоподготовки [2] и своевременной замене входного фильтра хроматографической колонки ресурс используемой колонки достигает 400 - 450 анализов.

3. При использовании кондиционированной колонки время выхода хроматографа на рабочий режим не превышает 30 мин. Предел детектирования при использовании УФ-детектора на длине волны

282 нм составляет 0.1 мг/кг (рис. 8.3).

Рис. 8.3. Хроматограмма экстракта пшеницы: 1 - зеараленон

8.4 Определение витаминов А, Е и Д в кормах, премиксах и витаминных смесях методом НФ ВЭЖХ

Применение элюента «гексан-изопропанол» в соотношении 98:2 по объему при анализе витаминов А, Е и Д в премиксах и кормах [3] вполне достаточно при использовании колонок 64x2, заполненных Силасорбом-600 (5 мкм). Пробоподготовка, предложенная авторами работы [4], обеспечивает воспроизводимый анализ витаминов в кормах и премиксах.

8.4.1 Подготовка пробы

Навеску образца (5 г корма, 2 г премикса, 0.5 г витаминной смеси) помещают в колбу, приливают 50 мл спиртового раствора аскорбиновой кислоты, добавляют 5 мл 50% водного раствора гидроксида калия и проводят омыление в течение 20 минут при температуре 85-95 °С. После омыления в колбу добавляют 50 мл воды и охлаждают; содержимое колбы переносят в делительную воронку и трижды экстрагируют 30 мл гексана. Объединённые вытяжки промывают водой до бесцветной реакции по фенолфталеину. Отмытый экстракт просушивают, пропуская тонкой струйкой через фильтр с безводным сульфатом натрия, и упаривают на роторном испарителе до объёма 5-10 мл. Упаренный экстракт переносят в колонку диаметром 1-2 см, заполненную силикагелем или окисью алюминия на 5 см, и элюируют

30 мл хлороформа или хлористого метилена, Элюат упаривают на роторном испарителе досуха, остаток растворяют в 5 мл гексана.

8.4.2 Подготовка градуировочного раствора

25 мг чистого кристаллического витамина Д3 помещают в мерную колбу на 100 мл, растворяют в гексане, доводят объём до метки. 1 мл готового раствора витамина Д3, 112 мг а-ток

страница 21
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33

Скачать книгу "Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром»" (1.66Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
аренда звукового оборудования
билеты на big love show
кровать тахта голубого цвета 90*200
купить инвентарь для фитнеса

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(13.12.2017)