химический каталог




Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром»

Автор С.Н.Сычев, К.С.Сычев, В.А.Гаврилина

ьтр, эмиссионное излучение регистрируется фотоэлектронным умножителем (9). Уф излучение, прошедшее через кювету, поглощается заглушкой (10).

Предел детектирования по ряду флуоресцирующих веществ может достигать 10"1 г. Природной флуоресценцией обладают полиядерные ароматические соединения, токсины органического происхождения, стероидные гормоны и ряд других соединений. Флуориметрический детектор широко применяется при анализе дансил-производных аминокислот.

5.3 Изократическое и градиентное элюирование

ИЗОКРАТИЧЕСКИМ ЭЛЮИРОВАНИЕМ называется использование элюента постоянного состава в течение всего анализа. Почти все (кроме хроматограмм, в условиях которых есть термин "градиент") приведенные в монографии хроматограммы получены именно в этом режиме. Достоинством такого элюирования является техническая простота исполнения и высокая воспроизводимость времен удерживания, площадей и высот пиков. Для хроматографии на силикагельных колонках такой вид элюирования является единственно возможным из-за сложности регенерации колонки.

Одним из наиболее эффективных способов повышения качества разделения смесей является ГРАДИЕНТНОЕ ЭЛЮИРОВАНИЕ, Смысл приема заключается в увеличении по определенному закону элюирующей силы элюента в процессе одного анализа.

В связи со сравнительно простой регенерацией, для проведения градиентного элюирования используются колонки, заполненные обращенно-фазовым адсорбентом. В этом случае увеличение элюирующей силы происходит за счет увеличения концентрации метанола или ацетонитрила в элюенте в процессе одного анализа. Градиентное элюирование полезно в том случае, когда при использовании изократического элюирования невозможно добиться разделения всех компонентов, сильно различающихся по временам удерживания (рис. 5.9 и 5.10).

5.4 Регенерация хроматографических колонок, заполненных

силикагелем

Регенерация колонки зависит от ее "предыстории", т.е. от того, какую работу на этой колонке выполняли и к какой работе колонку необходимо подготовить. При анализе углеводородов, когда в качестве элюента использовался осушенный гексан, ухудшение разделения или воспроизводимости вызвано накоплением воды на адсорбенте. Регенерация достигается промывкой колонки осушенным гексаном в течение суток. Если свойства колонки не восстановились, ее необходимо заменить другой. Использованная колонка пригодна для проведения других анализов. При применении элюентов, содержащих органическую кислоту или амин, силикагель адсорбционно модифицируется, и использовать колонку для других анализов нежелательно; попытки регенерации колонки к первоначальному состоянию дороги, длительны и не гарантируют успеха.

При использовании элюентов, содержащих воду, хроматографическую колонку регенерировать в полной мере также не удается, зато ее можно использовать с элюентами, содержащими или органическую кислоту или амин. Так как силикагель обладает очень большой удельной поверхностью, переход от одного элюента к другому занимает около суток. Поэтому для силикагельной колонки существует правило: для каждого вида анализа должна быть своя колонка. Например, для анализа токсинов В1, дезоксиниваленола и зеараленона в пищевой продукции необходимы три силикагельные колонки. В этом случае колонкам обеспечивается длительная и устойчивая работа.

5.5 Регенерация колонок, заполненных обращенно-фазовым

адсорбентом

В отличие от колонок, заполненных силикагелем, колонки, заполненные обращенно-фазовым адсорбентом, регенерируются достаточно легко и просто. Если до регенерации использовался элюент, не содержащий растворов солей или буферных растворов,

колонка регенерируется прокачиванием через колонку ацетонигрила в количестве 4 -5 объемов колонки.

Если же до регенерации использовался элюент, содержащий раствор солей или буферный раствор, регенерация проводится следующим образом: через колонку при небольших расходах прокачивается 4-5 объемов колонки дистиллированной воды; через колонку прокачивается 2-3 объема колонки смеси «ацетонитрил - вода» в соотношении 50:50;

через колонку прокачивается 4-5 объемов колонки ацетонитрила.

После указанных процедур хроматографическая колонка прокачивается 2-3 объемами колонки рабочего элюента, и колонка готова к работе,

5.6 Подготовка элюентов к работе

Компоненты элюента должны иметь квалификацию не ниже указанной в выполняемой методике. После смешения элюент должен быть отфильтрован и не содержать механических примесей. После фильтрования элюенты для обращенно-фазовой хроматографии должны быть дегазированы от растворенного кислорода. Дегазацию можно производить барботажем через элюент гелия или созданием невысокого разряжения любым лабораторным вакуумным насосом (можно водоструйным насосом или даже пылесосом). Дегазация прекращается при резком охлаждении сосуда с элюентом или по времени.

Литература

1. Мальцев А.А. Молекулярная спектроскопия. - М.: Московский университет, 1980.-272 с.

6. КАЧЕСТВЕННЫЙ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ) И КОЛИЧЕСТВЕННЫЙ АНАЛИЗ

6.1 Качественный анализ

Для

страница 15
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33

Скачать книгу "Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром»" (1.66Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ремонт электронных плат холодильников
профильная система для табличек металлическая для офисов
www.argumet.ru/stellaj/usilen.html
запуск чиллеров clivet

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(25.07.2017)