химический каталог




Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром»

Автор С.Н.Сычев, К.С.Сычев, В.А.Гаврилина

азоне длин волн от 190 до 360 нм (1 нм = 10"9м) называется ультрафиолетовым спектром поглощения (рис. 5.2).

Считается, что УФ-спектры сугубо индивидуальны для каждого вещества, однако УФ-спектры растворов слишком сглажены и имеют широкие полосы поглощения, что делает эти спектры не слишком информативными. Тем не менее, получение УФ-спектров компонентов разделяемой смеси необходимо для определения оптимальной длины волны анализа, что позволяет значительно поднять порог обнаружения этого вещества. Для идентификации соединений чаще используют так называемые спектральные отношения (см. табл. 6.1).

Любое вещество, поглощающее в ультрафиолетовой части электромагнитного спектра, имеет длину волны, при которой вещество имеет максимальное поглощение. При использовании такой длины волны детектор имеет наименьший порог обнаружения (в граммах) вещества.

Спектрофотометрические детекторы имеют конструкцию, позволяющую изменять длину волны падающего света (рис. 5.3 и 5.4).

Рис. 5.3. Принципиальная схема спектрофотометрического детектора хроматографа "Милихром": 1 - лампа ДДС-30; 2 - оптическая система; 3 - управляемая дифракционная решетка; 4 - щель монохроматора, 5 -зеркало модулятора; б - вогнутое зеркало; 7 - рабочая кювета, 8 -сравнительная кювета; 9 - ФЭУ; 10 - хроматографическая колонка

Сплошное ультрафиолетовое излучение от лампы ДДС-30 через оптическую систему поступает на дифракционную решетку, где раскладывается на монохроматические лучи света. Поворачивая дифракционную решетку, мы направляем нужное нам излучение через щель монохроматора на зеркало модулятора. Зеркало модулятора непрерывно перебрасывает луч света то в рабочую кювету, формируя луч I, то в сравнительную кювету, формируя луч 10. Эти лучи попеременно поступают на фотоэлектрический умножитель, затем - на логарифмический усилитель, где рассчитывается величина оптической плотности lg 1оЯ.

Предел детектирования - количество вещества, введенного непосредственно в кювету детектора, при котором сигнал детектора в два раза превышает шум детектора (рис. 5.5).

Предел детектирования разный для разных веществ и зависит от величины ?, которая, в свою очередь, зависит от строения исследуемого вещества. Например, для раствора антрацена в этаноле на длине волны 252 нм величина е составляет 200000, а для раствора пиридина в гексане на длине волны 250 нм величина е составляет 2000.

Таким образом, предел детектирования спектрофотометрического детектора для антрацена будет в 100 раз больше, чем для пиридина.

С помощью спектрофотометрического детектора (СФД) детектируется большое количество веществ различных классов, поглощающих ультрафиолетовый свет. СФД устойчив к изменениям внешней среды; все это делает СФД самым распространенным детектором для ВЭЖХ.

5.2 Флуориметрический детектор

При облучении некоторых веществ ультрафиолетовым светом возбужденные молекулы этого вещества, возвращаясь в исходное состояние, излучают собственное (вторичное или эмиссионное) излучение, сдвинутое в длинноволновую область по сравнению с возбуждающим Уф излучением. Если молекулы этого вещества находятся в возбужденном состоянии (при облучении одноразовым импульсом УФ-излучения) в течение 10~8 - 10"9с, то такое эмиссионное излучение называется флуоресцентным, а описанное явление -флуоресценцией [ 1 ].

Пусть монохроматическое ультрафиолетовое возбуждающее излучение от источника света L интенсивностью 10 падает на кювету К длиной 1. Кювета заполнена раствором вещества с концентрацией С. Вещество способно поглощать монохроматическое излучение, характеристикой способности к поглощению служит величина г. Вещество испускает во все стороны от кюветы вторичное (флуоресцентное) излучение, сдвинутое по сравнению с возбуждающим излучением в длинноволновую область, интенсивностью F (рис. 5.6).

Интенсивность флуоресценции выражается формулой:

F = K* ql0- (7-/Г/с),

(5.3)

где К - коэффициент, определяемый геометрией кюветы; q - квантовый выход;

10- интенсивность возбуждающего УФ-излучения; е - коэффициент молярного поглощения; / - длина кюветы;

С - молярная концентрация определяемого вещества. Расчетная зависимость представлена на рис. 5.7 графиком а, экспериментальная - кривой б.

При достижении определенной оптической плотности (обычно около одной единицы оптической плотности для кюветы длиной 1 см), при повышении концентрации анализируемого соединения наблюдается самогашение флуоресценции.

На рис 5.8 представлена схема флуориметрического детектора хроматографа "Милихром-5-7". Ультрафиолетовое излучение от лампы ДЦС-3 0 (1) через оптическую систему (2) попадает на дифракционную решетку (3). Поворотом дифракционной решетки нужное нам монохроматическое излучение направляется через щель монохроматора (4) на кювету (5), к которой присоединена хроматографическая колонка (6). Анализируемое флуоресцирующее вещество, попав в кювету, дает эмиссионное излучение, которое сферическим зеркалом (7) направляется через светофильтр (8), отрезающий ненужное излучение. Пройдя светофил

страница 14
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33

Скачать книгу "Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром»" (1.66Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
что означает цвет цветов в букете
Компания Ренессанс лестница фаворит - качественно и быстро!
кресло руководителя manager
Интернет-магазин КНС Нева предлагает игровой компьютер купить - в кредит не выходя из дома в Санкт-Петербруге, Пскове, Мурманске и других городах северо-запада России!

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)