![]() |
|
|
Высокоэффективная жидкостная хроматография на микроколоночных хроматографах серии «Милихром»оцедуры заключается в эффекте «высаливания» органических соединений на границу раздела «адсорбент - элюент» и увеличении межфазного поверхностного натяжения «элюент - адсорбат», что, в свою очередь, приводит к увеличению энергии взаимодействия «адсорбат -адсорбент». В сочетании с регулировкой рН для смещения равновесия «диссоциированная форма - молекулярная форма» (молекулярная форма в обращенно-фазовом варианте удерживается всегда сильнее, чем диссоциированная) высаливание позволяет резко увеличить удерживаемые объемы полярных соединений; 3) замена самоассоциата "адсорбат - адсорбат" на поверхности адсорбента на ассоциат "адсорбат - компонент элюента" достигается путем использования смешанных модификаторов типа "ацетонитрил -алифатический спирт" или добавлением в элюент небольших количеств органических кислот или алифатических аминов. Например, при анализе терпенов на поверхности адсорбента лучше иметь ассоциат "терпен - метанол", который дает меньшее уширение пика, чем "терпен - терпен". При одновременном анализе смесей веществ слабокислого и слабоосновного характера одновременно добавляют в элюент уксусную кислоту и алифатический амин при общем рН< 7, чтобы избежать самоассоциации анализируемых веществ любого характера на поверхности адсорбента. Наиболее универсальным элюентом в ОФ ВЭЖХ является смесь "ацетонитрил0.03 М КН2Р04-диэтиламин-фосфорная кислота". Раствор диэтиламина в 0.03 М КН2Р04 подкисляется фосфорной кислотой до рН=2.6 - 3.0. Такой универсальный элюент особенно эффективен при анализе водных, водно-спиртовых или спиртовых растительных или животных экстрактов, содержащих ионогенные соединения как кислого, так и основного характера. Подкисление до рН=2.6-3.0 гарантирует, что все ионогенные соединения кислого характера находятся в молекулярной форме, а слабоосновные существуют в виде ионизированных соединений и сдвинуты в начало хроматограммы. Например, при разделении стандартов опиумных алкалоидов, барбитуратов и бенздиазепинов для получения симметричных пиков достаточно использовать 0,05М водный раствор КН2Р04 (рис. 4Л0). 1 = О 5 10 15 20 25 30 t, МИН. Рис. 4.10. Хроматограмма сильнодействующих лекарственных препаратов: 1 - морфин, 2 - кодеин, 3 - барбитал, 4 - фенобарбитал, 5 - промедол, 6,7 - примеси, 8 - этаминал, 9 - нозепам, 10 - радедорм, 11 - элениум. Колонка 80x2 заполнена Силасорбом SPH С18. Элюент «ацетонитрил-водный раствор 0,05М КН2РО4», расход 100 мкл/мин. Длина волны 218 нм Добавление однозамещенного фосфата калия преследовало две цели: 1) слабое подкисление элюента со стабилизацией рН; 2) увеличение удерживаемых объемов хорошо растворимых в воде веществ за счет увеличения межфазного поверхностного натяжения "адсорбат - водно-солевой элюент". ft Увеличение удерживаемых объемов анализируемых веществ путем уменьшения содержания ацетонитрила в элюенте при его низком содержании в элюенте может привести к большим отклонениям удерживаемых объемов при воспроизведении методики. Тонкую регулировку удерживания в данном случае выполняет однозамещенный фосфат калия. Чем больше концентрация соли, тем больше удерживаемые объемы ионогенных соединений. Однако при больших (порядка 0.1М) концентрациях соли крайне высока опасность кристаллизации солей в хроматографической колонке или узлах хроматографа; поэтому поднимать концентрацию солей более 0.05 М не рекомендуется, тем более, что при дальнейшем увеличении концентрации соли в элюенте удерживаемые объемы изменяются незначительно. При усложнении анализируемой смеси (например, при анализе опия) приходится использовать значительно более сложный элюент: ацетонитрил-фосфатный буфер, подкисленный фосфорной кислотой до рН=2.6 и содержащий 0,02М раствор диэтиламина (рис. 4.11). Ш ол. ] Правило 4. "ТОНКАЯ РЕГУЛИРОВКА рН" 0.990 0.8000.600 Подкисление элюентов при анализе сложных смесей веществ (как правило, растительных экстрактов) является действенным регулятором селективности. Растительные экстракты обычно содержат вещества как основного, так и кислотного характера. Подкисление приводит к увеличению удерживаемых объемов соединений, имеющих кислый характер, и уменьшению удерживаемых объемов соединений, имеющих основной характер. Регулируя рН в области 2.5 - 5, мы можем добиться хорошего разделения весьма сложных смесей без дополнительных затрат (рис. 4.12). Рис. 4.12. Хроматограмма водного экстракта травы зверобой. Колонка 120x2 заполнена Диасорбом С16. Элюент «ацетонитрил-0.03 М однозаметенныйфосфат калия-ДЭА» (18:71:1); раствор ДЭА в 0.03 М КН2Р04 подкислен фосфорной кислотой до рН=2.8. Расход 100 м к л/мин. Длины волн 230 и 254 нм Правило 5. "ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРОТИВОИОНОВ" При анализе полярных соединений в ОФ ВЭЖХ встает проблема увеличения времен удерживания для улучшения разделения компонентов смеси. В том случае, если резервы увеличения удерживаемых объемов за счет уменьшения содержания модификатора в элюенте исчерпаны, а удовлетворяющий Вас эффект не достигнут, увеличение времен удерживания дост |
[каталог] [статьи] [доска объявлений] [прайс-листы] [форум] [обратная связь] |
|
Введение в химию окружающей среды. Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей
среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги
заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в
разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности.
Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и
атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на
химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах.
Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии
университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга
читателей.
Химия и технология редких и рассеянных элементов. Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов
химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии
лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во
второй
части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана,
лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В
третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия,
тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание
уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В
технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика
рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов
производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие
составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по
1972 год включительно.
|
|