химический каталог




Биохимия. Том 1

Автор Л.Страйер

им образом пептиды в соответствии с их общим зарядом. Однако полного разделения

Смесь пептидов

J

Электрофорез в горизонтальном направлении

1 2 3 45 6 789

3

• 5 • 9#

2

• • •

1 4 • •7

Рис. 5.6.

Смесь пептидов разделяют путем электрофореза в горизонтальном направлении с последующей хроматографией в вертикальном направлении.

смеси при этом не происходило. Многие пептиды накладывались друг на друга. Поэтому продолжали процесс разделения, но уже методом хроматографии на бумаге, причем это разделение проводили в направлении, перпендикулярном направлению электрофореза.

Хроматография термин введен Михаилом Цветом в 1906 г. применительно к разделению смеси пигментов из листьев растения на колонке карбоната кальция. М. Цвет сравнил этот процесс с «разложением света на спектр».

Образовано от греческих слов chroma-цвет и graphein-рисовать, писать.

Процедура состояла в следующем: конец бумаги, ближайший к разделяемым пептидам, помещали в смесь органических растворителей и воды, налитую на дно герметично закрывающейся стеклянной банки. При этом растворитель поднимался вверх по бумаге. В такой ситуации каждый пептид мог либо мигрировать с растворителем (неполярная среда), либо оставаться на обводненной целлюлозе бумаги (высокополярная среда). Такой метод разделения называется распределительной хроматографией. Пептид с наиболее выраженными неполярными свойствами будет растворяться в растворителе и, следовательно, подниматься вместе с фронтом растворителя вверх по бумаге; в то же время самый полярный из пептидов останется на бумаге внизу. Рассматриваемые методы-хроматография на бумаге и электрофорез-дополняют друг друга, поскольку они разделяют пептиды на основе независимых свойств; первый-на основе различий в полярности, второй-на основе различий в общем заряде. Вся последовательность проведения анализа - избирательное расщепление белка на небольшие пептиды с их последующим разделением в двух направлениях-называется методом пептидных карт (отпечатков пальцев).

Получаемые в результате пептидные карты дают очень наглядный результат. После окрашивания нингидрином пятна пептидов становятся ясно видны. Сравнение карт гемоглобина А и гемоглобина S показало, что все их пептидные пятна идентичны, за исключением одного. Это пятно элюировали с каждой из пептидной карт и определили, что в обоих случаях оно соответствует пептиду из 8 аминокислот. При последующем аминокислотном анализе обнаружилось, что пептид гемоглобина S отличается от пептида гемоглобина А лишь по одной аминокислоте.

5.5. В Р-цепи произошла замена одиой-един-ственной аминокислоты

ос- и р-Цепи разделили методом ионообменной хроматографии. Далее получили их пептидные карты. Оказалось, что гемоглобин S отличается от гемоглобина А по Р-цепи, в частности по N-концевому триптическому

пептиду Р-цепи. Определив аминокислотную последовательность этого пептида, Ин-грем показал, что в $-цепи гемоглобина • S в 6-м положении вместо глутамата стоит валин:

гемоглобин A Val-His-Leu-Thr-Pro-Glu-Olu-Lys-Гемоглооин s Val-His-Lcu-Thr-Pro-Yal-Glu-Lys-(П 2 3 4 5 6 7 8

5.6. На поверхности гемоглобина серповидных клеток имеются «липкие» участки

Валин имеет неполярную боковую цепь, тогда как глутамат-высокополярную. Замена глутамата валином в 6-м положении р-цепи приводит к тому, что на поверхности гемоглобина S оказывается неполярный остаток (рис. 5.8). В результате растворимость дезоксигенированного гемоглобина S значительно снижается, тогда как растворимость оксигепированного гемоглобина S практически не изменяется. Этот факт лежит в основе всей клинической картины сер-повидноклеточной анемии, а также особенностей, характерных для признака серповидноклеточности.

Молекулярный механизм появления серповидных эритроцитов можно представить себе следующим образом.

1. Замена глутаминовой" кислоты на валин приводит к появлению «липкого» участка (sticky patch) на наружной стороне каждой Р-цепи гемоглобина S (рис. 5,9). Такой «липкий» участок имеется как в окси-, так и в дезоксигемоглобине S, но не в гемоглобине А.

2. В дезоксигемоглобине S имеется участок, комплементарный «липкому» участку (рис. 5.9). Локализация комплементарного участка пока не установлена. Комплементарный участок одной молекулы дезоксиге-моглобина S взаимодействует с «липким» участком другой молекулы дезоксигемо-глобина S, что приводит к образованию агрегатов большой длины, деформирующих эритроцит.

3. В оксигемоглобине S комплементарный участок замаскирован. «Липкий» участок в нем имеется. Однако недоступность комплементарного участка препятствует соединению молекул гемоглобина S друг с другом.

4. Таким образом, эритроциты серповидной формы появляются в условиях, когда дезоксигенированная форма гемоглобина S достигает высокой концентрации (рис. 5.10).

Исходя из этих фактов, можно объяснить ряд клинических симптомов серповиднокле-точной анемии. Так, при появлении серповидных эритроцитов в мельчайших сосудах возникает порочный круг. Серповидные

страница 43
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113

Скачать книгу "Биохимия. Том 1" (6.46Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
cersanit palmira глазурованный бежевый керамогранит 32,6х32,6
Рекомендуем фирму Ренесанс - лестница винтовая готовая купить- быстро, качественно, недорого!
гофры для глушителей honda
Кликните на ссылку, закажите еще выгодней по промокоду "Галактика" - F0BY0076RK - 18 лет надежной работы!

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)