химический каталог




Биохимия. Том 1

Автор Л.Страйер

сть замороженной мембраны. Далее высушивают лед на прилежащей поверхности мембраны-это метод глубокого травления. Сочетание двух методов, называемое электронной микроскопией с применением замораживания— травления, позволяет получить картину внутренней части мембраны и обеих ее поверхностей. Достоинство рассматриваемого подхода состоит в том, что он не требует фиксации и обезвоживания биологического материала.

В исследованиях методом замораживания-травления было непосредственно доказано присутствие интегральных белков во многих биологических мембранах. Например, в мембране эритроцита содержатся глобулярные частицы высокой плотности диаметром около 75 А (рис. 10.20). Большое число глобулярных частиц имеется также внутри мембраны саркоплазматического ретикулума. В отличие от этого искусственный бислой из фосфатидилхолина имеет совершенно гладкую поверхность скола. Оказались большей частью гладкими и поверхности скола миелиновой мембраны, что и следовало ожидать от этой относительно инертной мембраны, функционирующей главным образом в качестве изолирующей поверхности.

10.10. В мембране эритроцитов содержатся различные периферические и интегральные белки

В работах по изучению мембран эритроциты оказались наилучшим объектом исследований, поскольку они легко доступны и относительно просто устроены. Будучи лишены органелл, эритроциты имеют только одну мембрану-плазматическую. Путем осмотического лизиса можно получить тени эритроцитов, т.е. чистые плазматические мембраны, без цитоплазмы. На рис. 10.21 показаны результаты электрофо-ретического разделения белков такого мембранного препарата на полиакриламидном геле, содержащем ДСН. При окрашивании кумасси синим проявляется более десяти полос. Основные полосы пронумерованы и обозначаются как полосы 1, 2, 3, 4.1, 4.2, 5 и 6 (рис. 10.21). При окрашивании йодной кислотой-реактивом Шиффа (PAS-реак-ция)1 выявляется несколько белковых фракций, богатых углеводами. Эти полосы обозначаются соответственно PAS-1, PAS-2, PAS-3 и PAS-4.

Где локализуются рассматриваемые белки в мембране эритроцита? Белки, соответствующие полосам 1, 2,4.1,4.2, 5 и 6, экстрагируются из мембран при повышении ионной силы раствора или изменений рН; следовательно, они расположены на периферии мембраны. Кроме того, на них не оказывает влияния инкубация интактных клеток или запаянных теней с различными протеолитическими ферментами. В то же время эти белки полностью расщепляются при обработке протеазами разорванных теней. Отсюда можно заключить, что эти периферические белки находятся на цито-плазматической стороне мембраны эритроцитов. Полоса 6-это фермент гликолиза глицеральдегид-3-фосфат — дегидрогеназа (разд. 12.5), полоса 5-актин, необходимый

1 В отечественной литературе вместо сокращения ИКШ нередко употребляется более благозвучное ШИК, однако оно не соответствует сути, поскольку обработка йодной кислотой предшествует обработке реактивом Шиффа. Поэтому мы будем пользоваться распространенным сокращением латинскими буквами PAS (periodic acid-Schiff reagent).-Прим. перев.

Электронная микрофотография плазматической мембраны эритроцита, полученная с применением метода замораживания - травления. Внутренняя часть мембраны, обнажившаяся при сколе, богата глобулярными частицами диаметром около 75 А. Эти частицы - интегральные белки мембраны. (Печатается с любезного разрешения д-ра V. Marchesi.)

для мышечного сокращения и обеспечивающий клеточную подвижность (разд. 34.1). Полосы 1 и 2-спектрин, цепи которого, соединяясь, образуют разветвленную волокнистую сеть. Вместе с другими белками спектрин, по-видимому, стабилизирует и регулирует форму мембраны эритроцитов, изменяющуюся при прохождении клеток через мелкие кровеносные сосуды (рис. 10.22). Кроме того, эритроциты подвергаются сильному механическому сдавливанию при проталкивании крови сердцем.

Что касается полос 3 и 7 и всех четырех полос, окрашивающихся PAS-реактивом, то их можно отделить от мембраны эритроцита только с помощью детергентов или органических растворителей. Следовательно, эти полосы представлены интегральными белками мембраны. Такой вывод подтверждается результатами электронно-микроскопического исследования: методом замораживания-скалывания (рис 10.20) было показано, что часть белков эритроцита погружена в глубь углеводородной области мембраны.

Полоса

4,1 4,2

1 2

Актин

Глицеральдегидфосфат-дегидрогеназа

10.11. Мембрану эритроцита пронизывают канал для анионов и сложный белок глнкофорин

В мембране эритроцитов имеется анионный канал, делающий мембрану проницаемой для НСО7 и СГ. Быстрый обмен этих ионов через мембрану имеет большое значение для транспорта С02 эритроцитами. Как было показано относительно недавно, анионный канал - это димер белка, представленного при электрофорезе полосой 3; он составляет одну четверть общего количества белка в эритроцитарной мембране. Масса димера 95 кДа. Для определения локализации и ориентации белка полосы 3 использовали следующий прием: интактные эритроциты, разорванные тени и вывернут

страница 101
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113

Скачать книгу "Биохимия. Том 1" (6.46Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
металлический профиль гипсокартон для водоотвода
space-motion интерактивный космический аттракцион
Твердотопливные котлы Wirbel ECO CKB 30_new
производство детских скамеек

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(04.12.2016)