химический каталог




Молекулярная биология. Структура и биосинтез нуклеиновых кислот

Автор А.С.Спирин

ировать предполагаемые места прикрепления петель (доменов) к

247

остову в известных генах. Подобные эксперименты показали, что места прикрепления обрамляют транскрипционные единицы или группы (кластеры) генов (рис. 130).

7. МЕТАФАЗНЫЕ ХРОМОСОМЫ

В конденсированном состоянии каждый домен хроматина представляет собой, вероятно, компактную глобулу, которая занимает в метафазной хромосоме четко определенное положение для каждого участка ДНК. При локализации определенных генов в метафазной хромосоме они всегда обнаруживаются в одном и том же ее участке. Регулярная организация метафазных хромосом подтверждается также тем, что окрашивание их различными красителями дает стандартную картину в виде чередующихся полос более и менее интенсивной окраски. Полученная при окрашивании характерная исчерченность является надежным тестом для идентификации отдельных хромосом.

Благодаря последовательной конденсации хроматина метафаз-ная хромосома, имеющая длину около 5 мкм, содержит ДНК длиной до 5 см, т. е. линейные размеры ДНК уменьшаются примерно в 10 тыс. раз. На рис. 131 иллюстрируются последовательные стадии конденсации.

Механизм конденсации, непосредственно приводящей к образованию метафазных хромосом, пока не выяснен. Очевидно, что существенную роль в этом процессе играет фосфорилирование гистона HI по сериновым и треониновым остаткам, которое протекает на строго определенной стадии клеточного цикла и предшествует по времени образованию метафазных хромосом.

Как известно, в дрожжах не наблюдается типичная картина митоза и нет метафазных хромосом (возможно, потому что у них очень маленькие хромосомы). По-видимому, с этим связано отсутствие гистона HI в дрожжах, несмотря на типичную нуклеосомную структуру хроматина.

8. РЕГУЛЯТОРНЫЕ БЕЛКИ ХРОМАТИНА

Общие принципы регуляции транскрипции у прокариот хорошо известны (см. гл. 10). Однако многолетние поиски регуляторных белков эукариотической транскрипции пока привели к скромным Успехам. У эукариот (за исключением дрожжей) не обнаружено простых регуляторных генетических систем, доступных для биохимического исследования. Поэтому при поиске регуляторных ДНК-связывающих белков эукариот обычно используют различные варианты методов суррогатной генетики.

Некоторые регуляторные «мотивы» (см. гл. X, раздел 1) встре248

249

чаются в количестве десятков тысяч и более на гаплоидный геном, и число молекул белков, узнающих эти «мотивы», соответственно велико. Для выделения этих белков используют различные методы обнаружения их специфических комплексов с небольшими мечеными фрагментами ДНК, содержащими «мотивы». Второй подход — аффинная хроматография экстрактов ядер, содержащих негистоновые белки, на колонках с пришитыми короткими синтетическими или природными фрагментами ДНК- Эти фрагменты содержат последовательность узнавания. Третий подход —различные методы ковалентной сшивки белков с ДНК in vivo и in. vitro в месте их связывания с последующей индентифнкацией белкового компонента. Одновременно, как правило, исследуют влияние изучаемых белков на транскрипцию в системе in vitro. Таким образом удалось очистить так называемый белок Spl, который стимулирует транскрипцию с одного из сильных промоторов животных клеток — раннего промотора вируса ОВ-40, а также, по-видимЬму, с ряда других клеточных промоторов. Он узнает в них мотив GGGGGG.

В то же время многие регуляторные белки эукариот, как и у прокариот, составляют ничтожную долю всех белков. Регуляторные последовательности эукариотических генов иногда удалены от промотора на значительное расстояние (энхансеры, см. гл. X, раздел 2) и расположены впереди или позади него. Это затрудняет поиск белков, узнающих определенные последовательности ДНК. ДНК в хроматине свернута в спираль с шагом около 80 п. о., и сайт узнавания может быть составлен из фрагментов разных участков, разнесенных в первичной структуре на эту величину. Поэтому изучение и моделирование механизма узнавания ДНК в хроматине требуют разработки совершенно новых подходов.

Пожалуй, наиболее изученный регуляторный белок эукариот — фактор транскрипции генов 5S РНК шпорцевой лягушки. Его структура и механизм действия рассмотрены в гл. X.

Еще одна регуляторная система, механизм которой проясняется,— это гены, стимулируемые стероидными гормонами. Белок-регулятор, связываясь с гормоном, приобретает способность садиться на регуляторные участки и активировать соответствующие гены. Описан также белок, который связывается с регуляторной областью генов теплового шока дрозофилы и включает эти гены (см. с. 199). Тепловой шок вызывает переход этого белка из цитоплазмы в ядро и его связывание с последовательностью ДНК, обеспечивающей включение генов теплового шока. Предполагается, что, связываясь с ДНК вблизи промотора, он активирует РНК-полимеразу П.

В дрожжах обнаружены генетические регуляторные элементы типа прокариотических репрессоров. Некоторые из них интенсивно изучаются, в частности репрессор гена GAL. Этот белок состоит по крайней мере из двух функциональных домен

страница 92
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135

Скачать книгу "Молекулярная биология. Структура и биосинтез нуклеиновых кислот" (5.58Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить в москве пленку оракул
продажа дач новорижское шоссе
0279B002
http://www.kinash.ru/etrade/detail/4426/70187.html

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(17.12.2017)