химический каталог




Молекулярная биология. Структура рибосомы и биосинтез белка

Автор А.С.Спирин

есного центрифугирования в градиенте концентрации CsCl. На рис. 77 показало появление серии белок-дефицитных производных из рибосомных 50S и 30S субчастиц Е. coli под действием 5 М CsCl (в присутствии 2 мМ Ы%С\г). Схема отщепления белков 30S субчастицы под действием увеличивающейся концентрации LiCl при 5 мМ MgCb дана на рис. 78. Сначала, в результате инкубации в 1 М соли, могут быть удалены такие относительно слабо удерживаемые белки, как SI, S2, S3, S14, S21; остаются 28S частицы, имеющие содержание белка 30% и, соответственно, плавучую плотность в CsCl 1,67 г/см3. Инкубация в 2 М ЫС1 приводит к отщеплению следующей порции белков: S5, S9, S10, S12, S13, S20; получающиеся 25S частицы содержат почти половину исходного содержания бегка (20%) и имеют плавучую плотность в CsCl 1,74 г/см3. В интервале от 3 М до 3,5 М LiCl отщепляются сначала белки S6, S18, S11 и S19, а затем белки S16 и S17, так что в конце концов получаются 23S частицы, содержащие только 4 рибосомных РНК-связывающих белка, а именно S4, S7, S8 и S15. Отщепление этих последних белков требует уже применения более жестких воздействий, таких как комбинация высокой соли с мочевиной.

Отщепление большей части белков, по-видимому, не сопровождается нарушением общей третичной структуры и компактности рибосомной РНК Электронно-микроскопическое прослеживание за процессом раздевания 30S субчастицы Е. coli показало, что удаление половины белков не приводит к сколько-нибудь значительным морфологическим изменениям частиц: они сохраняют те же размеры, то же соотношение осей (2:1) и то же характерное подразделение на головку, тело и боковую лопасть. Более того, внешне такие же частицы видны и после удаления 15 из 21 белков. Проверка компактности рибосомной РНК в частицах с различным содержанием белков с помощью рентгеновского и нейтронного рассеяния подтверждает электронно-микроскопические наблюдения: РНК, удерживающая всего 6 белков, таких как S4, S7, S8, S15, S16 и S17, сохраняет компактность и форму, свойственную ей в составе 30S субчастицы.

Рис. 77. Плотностное распределение рибосомных частиц по мере их разборки (потерн белка) в результате инкубации в CsCI (по A. S. Spirin et al. J. Mol.. Biol., 1965, v. 14 p. 611-615):

1 d и

Z х

О to со

a — рибосомы .фиксированы формальдегидом и центрифугированы в CsCI до равновесия; единственный компонент р =1,64 г/см3 соответствует исходным рибосомам; 6 — рибосомы инкубированы в S М CsCI в течение 1S мин, затем фиксированы формальдегидом и центрифугированы в CsCI до равновесия; видно появление белок-дефицитных частиц с р = 1,68—1,69 г/см3; в—рибосомы инкубированы в 5 М CsCI в течение 1 ч, затем фиксир<>--ваны формальдегидом и центрифугированы в CsCI до равновесия; видно накопление белок-дефицитных частиц и появление частиц, еще более дефицитных по белку, р = 1,72—1,74 г/смз; г —рибосомы центрифугированы в CsCI без фиксации в течение 36 ч; основным компонентом становятся частицы, сильно дефицитные по белку, р - 1,72-1,74 г/смз.

3 а.

о о I I-о с; с

к о

х: о

О)

т

н с О

Отщепление «сердцевинных» РНК-связывающих белков, однако уже более существенно сказывается на дестабилизации РНК, так что ее компактность, согласно измерениям радиуса инерции, несколько умень шается (линейные размеры возраст; ют приблизительно на одну че верть). Тем не менее, и изолирован ная 16S РНК при достаточной концентрации Mg2+ и ионной силеуи 16S РНК в комплексе с «самым сердцевинным» белком S4, и комплекс РНК с четырьмя белками, такими как S4, S7, S8 и S15, достаточно компактны и сохраняют специфическую общую укладку, проявляющуюся в характерной Y-образной форме, вписывающейся в контуры 30S субчастицы (см. Б.II, 4). Это значит, что общий тип сворачивания 16S РНК управляется и поддерживается ее собственными внутримолекулярными взаимодействиями, хотя стабилизация окончательной и полной свернутости требует набора «сердцевинных» РНК-связывающих белков.

Разумеется, другие рибосомные белки также могут вносить вклад в поддержание и стабилизацию рибосомной РНК, но, по-видимому, главным образом ее более локальных структур.

Аналогичные закономерности можно отметить и при раздевании 50S субчастицы Е. coli. Ее 23S РНК сохраняет исходную компактность

28S РНП

30 1,67

25S РНП

S5,S9,S10,S12,S13,S20

20

1,74

S6,S18,S11,S19

25S РНП 23S РНП 22S РНП

S16.S17

S7.S8.S15

15 1,76

12 1,78

ч ъ 1,8

22S РНК

0 «1,9

Рис. 78. Схема разборки рибосомной 30S субчастицы под действием высоких концентраций соли (например, повышающейся концентрации LiCl в присутствии 5 мМ MgCh) вплоть до стадии, когда в частице удерживается всего 9 белков из 32 (L2, L3, L4, L13, L17, L20, L21, L22 и L23). При дальнейшем отщеплении белков компактность несколько уменьшается, но еще остается довольно высокой, а общая форма молекулы заметно не изменяется.

Таким образом, ступенчатое раздевание (разборка) рибосомных частиц ясно демонстрирует каркасную роль высокополимерной РНК для размещения рибосомных белков. Из явления

страница 51
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136

Скачать книгу "Молекулярная биология. Структура рибосомы и биосинтез белка" (3.76Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
аренда звукового оборудования
Фирма Ренессанс: лестница в дом из дерева- быстро, качественно, недорого!
столик изо
хранение вещей в москве дмитровское шоссе

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)