химический каталог




Молекулярная биология. Структура рибосомы и биосинтез белка

Автор А.С.Спирин

ли трехмерного расположения рибосомных белков в 30S субчастице Е. coli (рис. 64). Эти данные показывают, что действительно белки S7, S9 и S10 образуют одну тесную группу, а белки S4, S5, S8 и S12 сгруппированы в другой кластер близких белков; белок S3 находится между ними (ср. с рис. 63). Полученные результаты явились одним из наиболее точных и фундаментальных вкладов в наши знания о расположении белков на рибосомной частице.

Иммунная электронная микроскопия

Подходы, описанные выше, дают сведения о взаимном расположении белков друг относительно друга, но без какой-либо привязки к морфологии рибосомной частицы. Применение электронной микроскопии для визуализации белков на рибосоме позволяет определить местоположение белка на морфологически видимом контуре рибосомной частицы, а в комбинации с вышеописанными данными наложить всю сеть белковой топографии (рис. 63 и 64) на видимые проекции

гРис. 66. Электронные микрофотографии рибосомных 50S субчастиц, прореагировавших с антителами: а —антитела против белка L7 / L12 (по W. A. Strycharz et al. J. Mol. Biol., 1978, v. 126, p. 123-140); оригинал предоставлен д-ром Дж. Лейком, Калифорнийский университет, Лос-Анджелес); б — антитела против белка L1 (предоставлено д-ром Г. Штоффлером, Институт молекулярной генетики им. М. Планка, Зап. Берлин); в — антитела против 5S РНК-белкового комплекса; 50S частицы видны .в их выпуклой («задней») стороны (предоставлено В. Д. Васильевым, Институт белка АН СССР, Пущино)

частицы. Для такой электронно-микроскопической визуализации белков на

рибосоме было предложено использовать специфические антитела к индиL7/L12J видуальным рибосомным белкам.

Двувалентное антитело, связываясь с

данным белком, может взаимодействовать одновременно с двумя частицами,

давая образование их димера через

мостик антитела. Наблюдая димеры в

электронный микроскоп, можно опреРис. 67. Контуры рибосомной 50S суб- делить, какими местами поверхности

частицы с указанием приблизителъ- соединены частицы; это, очевидно, и

белков местоположения некот°Рых есть место локализации данного белка

елков' на поверхности (рис. 65 и 66). В ряде

случаев можно прямо видеть прикрепление Y-образной молекулы антитела к определенному месту поверхности индивидуальной частицы. Именно с помощью иммунной электронной микроскопии было установлено, что белок L7/L12 образует боковой палочкообразный стержень 50S субчастицы, белок L1 входит в состав другого бокового протуберанца (бокового выступа) 50S субчастицы, a 5S РНК-белковый комплекс локализуется в центральном протуберанце (головке) 50S субчастицы (рис. 67).

Главное внимание исследователей было сосредоточено на попытках локализовать методом иммунной электронной микроскопии белки 30S субчастицы Е. coli. Однако, несмотря на возможность получения специфических антител ко всем 21 индивидуальным белкам, эта задача оказалась не простой, и метод дал много ложных локализаций. Дело в том, что этот метод, кажущийся столь прямым и демонстративным, таит опасности различных артефактов, обусловленных недостаточной очисткой антител, неспецифическим присоединением антител к некоторым участкам поверхности частиц, искажением специфического положения антитела на частице вследствие ее ориентации на подложке и т. д. Тем не менее, в настоящее время можно выделить наиболее надежные результаты в отношении 30S субчастицы. Первой такой надежной локализацией было, по-видимому, определение положения белка S14 на головке частицы (рис. 65); антигенный детерминант белка был найден на поверхности головки со стороны, противоположной боковому выступу («платформе») 30S субчастицы (рис. 68). Недалеко от него были локализованы также антигенные детерминанты белков S10 и S19. Ниже этой группы белков, в районе борозды, разделяющей головку и тело, был локализован белок S3, а еще ниже, близко к борозде, но уже на теле субчастицы, белок S5 (рис. 68). Белки S6 и S11 были локализованы по другую сторону 30S субчастицы, а именно на ее боковом выступе («платформе»). Белок S8, согласно иммунной электронной микроскопии, располагается также у бокового выступа, где-то между ним и телом, на внешней (обращенной от 50S субчастицы) стороне 30S субчастицы.

Особый интерес вызывает локализация белка S4. Дело в том, что

Рис. 68. Контуры рибосомной 30S субчастицы с указанием приблизительного местоположения ее белков: белок S4 обозначен сплошным кружком; слева — сторона 30S субчастицы, обращенная от SOS субчасгицы; справа — сторона 30S субчастицы, обращенная к SOS субчастице

именно в отношении этого белка было получено много артефактов, включая ложные множественные антигенные детерминанты по всей частице. В конце концов оказалось, что ряд антигенных детерминант белка S4 не доступен для антител с поверхности частицы, а становится доступным после удаления белков S5 и S12. Действительно, место положения белка S4 было найдено очень близко к месту белка S5, и, очевидно, белок S5, а также белок S12 частично прикрывают Фобой белок S4 с поверхности. В

страница 44
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136

Скачать книгу "Молекулярная биология. Структура рибосомы и биосинтез белка" (3.76Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ремонт холодильного оборудования кондиционеров колледжи
ремонт хололодильников на дому г климовск
фисслер магазины
Сумка Tasche 52х16х46 см фиолетовая

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(05.12.2016)