химический каталог




Принципы структурной организации белков

Автор Г.Шульц, Р.Ширмер

азы (рис. 4.3); в опытах по денатурации —ренатурации он самопроизвольно повторно свертывается [443]. Протеолитическое расщепление проинсулина in vivo приводит к инсулину, стабильность которого обеспечивается энтропийным вкладом его нативной системы связей "S—S (разд. 8.3). Лабильность структуры инсулина имеет, по-видимому, физиологическое значение [444J, поскольку скорость инактивации является фактором, контролирующим степень и продолжительность действия гормона.

Повторное свертывание модифицированных белков дает информацию о процессе свертывания. Исследования повторного свертывания нативных белков были дополнены опытами по повторному ?свертыванию модифицированных белков. В ранних исследованиях 1445] было показано, что рибонуклеаза поджелудочной железы, нодинированная по расположенному на поверхности нативной структуры Туг-115, после денатурации теряет способность к повторному свертыванию. Это показывает, что состояние остатка Туг-115 имеет важное значение для процесса свертывания. Для того чтобы установить, можно ли модифицировать белок (путем расщепления цепи и делеций в последовательности или путем присоединения объемных групп к боковым цепям) без потери им способности к свертыванию, «был проведен ряд систематических исследований нуклеазы стафилококка и панкреатической рибонуклеазы.

Кроме того, об участии фрагментов полипептидов в процессе

свертывания можно судить, используя методы комплементации белка. «Комплементацией» называют восстановление биологической активности с помощью невалентных взаимодействий различных (по-ли)пептидных цепей [446]. Классический пример комплементации in vitro представляет панкреатическая рибонуклеаза. После того как так называемый S-пептид (включающий 20 N-концевых аминокислотных остатков) отщепляется от белка, последний теряет свою* ферментативную активность и способность к повторному свертыванию восстановленной цепи. В результате комплементации белка S-пептидом способность к ферментативному действию и свертыванию? восстанавливается, хотя ковалентные связи между двумя пептидными цепями и не образуются [94]. Таким образом, эксперименты по ренатурации (см. обзоры [94, 177]) модифицированных и комплемен-тированных форм белка дают существенную информацию о механизме его свертывания.

8.3 Структурные элементы в несвернутых цепях

До сих пор по отношению к несвернутой цепи употреблялся термин «термодинамическое состояние». Однако в отличие от натив-ной структуры несвернутому состоянию соответствует множество-конформаций цепи. Тем не менее можно предположить, что некоторый порядок все-таки существует и у несвернутой цепи. Выделение-у нее структурированных элементов и тем самым сужение конфор-мационного пространства полезно для рассмотрения процесса свертывания; в этом случае можно выделить зародышевые формы —-нуклеации, с которыми взаимодействуют остальные участки цепи.

Эксперименты по повторному свертыванию выявляют быстро и медленно свертывающиеся цепи. Подразделение несвернутых цепей на два класса, быстро и медленно свертывающихся, было-установлено при исследовании рибонуклеазы [440, 447, 448]. В опытах по повторному свертыванию рибонуклеазы, денатурированной без нарушения системы дисульфидных связей, было обнаружено, что 20% цепей повторно свертываются в пределах 0,1 с (быстро свертывающиеся цепи.) Процентное содержание таких цепей не зависит от способа денатурации (гуанидин гидрохлорид [449], нагревание-[450] и т. д.). Остальные 80% цепей (медленно свертывающихся)* превращаются за время от 10 до 100 с в быстро свертывающиеся,, которые затем укладываются моментально. Имеется сообщение об' аналогичном, хотя и менее количественном наблюдении в отношении ингибитора трипсина поджелудочной железы быка (BPTI), в котором 15% цепей свертывались значительно медленнее, чем остальные [451]. Это явление пока еще не объяснено. Согласно одной из гипотез [449, 452], в быстро свертывающихся цепях все пептидные-связи представлены правильными цис-транс-нзомерами, тогда как. медленно свертывающиеся цепи содержат неправильные изомеры;.

время расходуется на конверсию неправильных изомеров. Цис-тп/шяс-превращение происходит наиболее легко с N-концевой стороны остатка Pro, поскольку в этом случае барьер энергии активации составляет всего около 13 ккал/моль по сравнению с 20 ккал/моль для других пептидных связей (разд. 2.5). И BPTI, и рибонуклеаза -содержат четыре остатка Pro, в нативной рибонуклеазе два из них существуют в виде цш>изомеров.

Антитела можно использовать для идентификации зародышей свертывания. Другой путь поиска следов структуры в несвернутых поли пептидных цепях состоит в расщеплении нативных поли-тшптидных цепей и в проверке с помощью специфичных антител, который из фрагментов принимает свою нативную конформацию. Большинство из этих экспериментов было выполнено на нуклеазе стафилококка [418; 453]; они показали, что фрагменты величиной от 17 до 120 остатков свертываются в нативную конформацию с константой равновесия К = [N]/[R]^10-3 . Согласно уравнению (3.2), это отвеч

страница 67
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151

Скачать книгу "Принципы структурной организации белков" (3.40Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
parkmaster 4xj51
изготовление детских наклеек
группировка ленинград 3 декабря
кухонные столы шарди

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.05.2017)