химический каталог




Высокоэффективная жидкостная хроматография

Автор В.Д.Шатц, О.В.Сахартова

ны ни для одного детектора и анализируемого вещества, поэтому, как правило, первым этапом количественного анализа служит калибровка, т. е. установление вида и параметров уравнения (6.1), отвечающих данному сорбату, условиям анализа, детектору и способу количественной обработки хроматограммы. Обычно конструкции детекторов и условия анализа подбираются таким образом, чтобы в максимально возможном диапазоне соблюдалась простейшая линейная зависимость

S = km,

Наблюдаемый спектр отвечает циклопентеноновой системе ДР>'Г0М слУчае (Рис. 6.3,6) обнаружено, что высоты пиков изменяются в различной степени, поэтому логично предположить разный характер ауксохромов и хромофоров. Действигде k — калибровочный коэффициент.

Зависимость (6.2) выполняется в ВЭЖХ очень часто, особенно если в колонку введено не слишком большое количество вещества, т. е. отсутствует перегрузка сорбента и детектора.

ГЛАВА 6

S.ycji.ec

10 3 I02

Рис. 6.4. Калибровочный график.

5 Сорбат — форидон; условия анализа

О т, нг см. на рис. 6.1.

Перегрузка УФ-детектора может стать заметной при оптической плотности элюата в максимуме пика более 0,5. Последовательное увеличение концентрации образца в этом случае не будет вызывать пропорционального увеличения сигнала, и калибровочный график, изображающий зависимость (6.2), приобретает заметную кривизну (рис. 6.4). Предельный размер пробы с этой точки зрения определяется коэффициентом экс-тинкции сорбата.

Перегрузка сорбента связана с переходом процесса на первых теоретических тарелках в область нелинейности изотермы сорбции. Ее можно наблюдать (для колонок с внутренним диаметром около 4 мм) при массе образца 20—100 мкг и выше, в зависимости от типа сорбента и состава, подвижной фазы. Обнаруживается такое явление легко: при перегрузке сорбента ширина пика увеличивается и (или) форма его ухудшается по сравнению с той, которая характерна для малых доз образца. Если обстоятельства все же вынуждают работать в области перегрузки сорбента, для количественной оценки допустимо применять площадь пика, но ни в коем случае не его высоту.

При отсутствии указанных осложнений выбор способа измерения пиков (т. е. в виде площадей или высот) диктуется требованиями конкретной методики анализа и наличием средств автоматизации. Все интеграторы позволяют измерять площади пиков, а некоторые модели по желанию оператора могут использоваться и для измерения высот. При работе с интегратором необходимо строго следить, правильно ли выбраны условия интегрирования, параметры, по которым это устройство отфильтровывает шумы и малые пики, обнаруживает начало и конец пика, устанавливает положение базовой линии. Выбор параметров интегрирования требует от оператора определенных навыков и времени. Вероятно, по этой причине интеграторы так и не

255

ВЭЖХ В КОНТРОЛЕ ПРОИЗВОДСТВА и ФАРМАКОПЕЙНОМ АНАЛИЗЕ

вытеснили полностью самописцы и ручную обработку хроматограмм.

Устойчивость работы современных хроматографов, высокое качество колонок позволяют утверждать, что во многих случаях измерение высот пиков приводит к более точным результатам, чем измерение площадей. Это связано с тем, что исключается погрешность определения ширины пиков прн ручной обработке и погрешность определения начала и конца пика — при автоматизированной.

В инструментальной хроматографии используют три основных метода количественной обработки хроматограмм. Хотя они достаточно подробно описаны в хроматографической литературе, тем не менее считаем целесообразным остановиться на некоторых аспектах, определяющих применимость и выбор того или иного варианта для высокоэффективной жидкостной хроматографии.

Метод нормализации площадей — самый простой и наглядный, первый способ ориентировочной оценки хроматограмм. Он основан на допущении, что все компоненты пробы в данном режиме хроматографирования выходят из колонки и регистрируются детектором. Основное уравнение метода, следовательно, может быть записано так:

ВДАг=Ю0%. (6.3)

Содержание i-ro компонента в процентах можно рассчитать по формуле

Часто калибровочные коэффициенты ki неизвестны, тогда пользуются еще более простой формулой

(6.5)

В аналитической практике условия, при которых метод нормализации применим, почти никогда не соблюдаются, и поэтому к получаемым таким образом результатам следует относиться с большой осторожностью. В то же время нередко складывается ситуация, в которой именно этот метод единственно приемлем. Воспроизводимость результатов, полученных методом нормализации, как правило, неплохая, поэтому он может быть использован тогда, когда необходимо в первую очередь сравнение ряда образцов, а правильность численных результатов не играет первостепенной роли. Подобного рода задачи иногда возникают при оптимизации тех или иных процессов, когда нецеГЛАВА (

2S6

257

ВЭЖХ В КОНТРОЛЕ ПРОИЗВОДСТВА И ФАРМАКОПЕЙНОМ АНАЛИЗЕ

лесообразно проводить идентификацию всех примесей в изучаемых смесях и нарабатывать эталонные вещества для калибровки. В таких случаях применение метода но

страница 79
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136

Скачать книгу "Высокоэффективная жидкостная хроматография" (2.39Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
Выгодное предложение в КНС Нева на Avision AD230 - от товаров до интеграции в Санкт-Петербурге!
airned-m7
Изготовление корпуса сабвуфера «Stells» (в крыло)
магниты на номера от камер гибдд купить

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(27.02.2017)