химический каталог




Высокоэффективная жидкостная хроматография

Автор В.Д.Шатц, О.В.Сахартова

NH,

Амины, имидазолы R—NH—R'

ыо2

Со

С1

7-хлор-6-нитро-бензил-2-оксо--1,3-диаэол

сно

но^^Ж^сн он

пиридонсаль

4-диметиламикоазобензол-4'-сульфохлорид С Дабсилхлорид)

N0,

5-R R-CH-C00H

СН

но^Aj-ch2oh

h3c^n

S0,N" i УФ (425 нм) 2 R

Меркаптаны R—SH

То же

S02-S~R To же

Спирты, фенолы R—ОН

HH3C%Y Vn-nS0-0R

Фенолы Лг—ОН

Ar0-S0.

Ф (365/520 нм)

Амины, аминокислоты, пептиды

so,rJ:

Ф (340/520 нм)

Альдегиды, кетоны RCOR'

CHr-0-NH-HCL

// \ М УФ (265 нм)

°2N \ УСНГ°~Н-С^

п-нитробенэилонсиамин гидрохлорид

То же

?NO,

02NNHNH2 2,Л-динитрофенилгидраэин

г I 1 ,R УФ (254 нм)

nhn=c4r1

» УФ — спектрофотометр; Ф — флуориметр.

ГЛАВА 5

218

219

МЕТОДИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ВЭЖХ

раствором карбоната натрия. Осадок растворяют в подходящем растворителе и хроматографируют.

6. 2,4-Динитрофенильные производные аминов К 0,2 мл 3%-ного раствора 1-фтор-2,4-динитробензола в диоксане добавляют раствор образца в 1,5 мл 1%-ного водного тетрабората натрия. В течение 25 мин нагревают раствор при 60°С, затем добавляют 0,2 мл 2 М раствора гидроокиси натрия, выдерживают 15 мин. Охлаждают раствор и встряхивают с 1 мл циклогексана. Экстрагируют слой циклогексана 0,1 М раствором карбоната натрия (3x2 мл). Органическую фазу можно непосредственно хроматографировать в нормально-фазовом режиме.

5.5. ВЫБОР УСЛОВИЙ ЭКСПЕРИМЕНТА 5.5.1. ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ЛИТЕРАТУРНЫХ ДАННЫХ

Желательно еще до начала работы обобщить литературные сведения о решении стоящей задачи с помощью ВЭЖХ и другими методами. Они, несомненно, окажут большую помощь, позволят справиться с проблемой за более короткое время. В то же время значение этой информации не следует переоценивать, и не всегда следует также пытаться слепо воспроизвести опубликованный режим. (Сказанное, разумеется, не относится к информации, имеющей силу стандартов, фармакопейных статей и т. п.; их необходимо воспроизводить буквально п досконально.) Трудности при воспроизведении методик, опубликованных в литературе, обусловлены:

— неидентичностью технических данных оборудования, имеющегося в разных лабораториях;

— неидентичностью сорбционных свойств однотипных неподвижных фаз и даже разных партий одной и той же неподвижной фазы;

— недостаточной полнотой описания методик;

— недоступностью тех или иных реактивов, растворителей, материалов и приспособлений.

Кроме того, при анализе литературных данных почти всегда оказывается, что проблема, стоявшая перед авторами публикации-прототипа, несколько (или даже сильно) отличается от той проблемы, которую предстоит решить нам, хотя основные определяемые соединения могут быть одни и те же. Это отчасти обесценивает опубликованную методику, так как в нашем случае может потребоваться другая подготовка пробы, может оказаться иным состав примесей, фоновые вещества в биообъекте и т. п.

Все эти затруднения часто приводят к тому, что опубликованные методики не используются для прямого воспроизведения, а служат лишь отправной точкой для дальнейшей модификации применительно к конкретным условиям и задачам. К счастью, возможности такой модификации за счет варьирования тех или иных параметров в ВЭЖХ необычайно широки.

5.5.2. УСЛОВИЯ РАЗДЕЛЕНИЯ

В настоящее время в методиках разделения обычно указывают такие простые и физически наглядные параметры, как геометрические размеры колонок, объемный расход подвижной фазы, время удерживания. Однако основной результат хрома-тографического процесса — разделение — напрямую связан не с этими параметрами, а со специфическими характеристиками термодинамической и кинетической природы, в первом приближении не зависящими от геометрических характеристик хроматографической системы — коэффициентами емкости соединений, эффективностью колонки и т. п. Поэтому при описании результатов хроматографических экспериментов коэффициенты емкости, эффективность, линейная скорость подвижной фазы должны указываться наряду с приведенными выше характеристиками.

Длина колонки и эффективность. В большинстве случаев хроматографисты пользуются стандартным рядом длин колонок: 25, 15 или 10 см. В последнее время многие фирмы освоили выпуск более коротких колонок (вплоть до 3 см), заполненных особо мелкозернистыми сорбентами. Однако из теоретических основ метода ясно, что сама по себе длина колонки влияния на качество разделения не оказывает, а ее увеличение способствует увеличению продолжительности разделения. Действительно определяющим фактором является эффективность колонки, и именно ее необходимо указывать, описывая разделение. Это позволяет осознанно подходить к воспроизведению методик разделения и одновременно использовать возможности сокращения продолжительности анализа. Допустим, что, согласно опубликованной методике, разделение выполнялось на колонке длиной 25 см и эффективностью 5000 теоретических тарелок. По современным воззрениям такая колонка не может считаться высококачественной, однако примеров подобного рода в литературе, и даже новейшей, более чем достаточн

страница 66
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136

Скачать книгу "Высокоэффективная жидкостная хроматография" (2.39Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
прокат мультимедийного оборудования москва
Фирма Ренессанс graz - продажа, доставка, монтаж.
кресло ch v
москва оставить вещи

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(11.12.2016)