химический каталог




Высокоэффективная жидкостная хроматография

Автор В.Д.Шатц, О.В.Сахартова

неустойчивы при рН>8, поэтому растворы, имеющие хотя бы слабощелочную реакцию, необходимо подкислить перед введением в колонку.

При работе с образцами особо сложного состава (например, биологическими жидкостями) подготовка к анализу, как правило, многостадийная. Она может включать операции по осаждению, центрифугированию, фильтрованию, экстракции. При этом успех анализа в большей степени зависит от качества подготовки проб, чем от выбора условий хроматографирования. В последние годы ряд фирм освоили выпуск пластмассовых хроматографических патронов для очистки и концентрирования образцов. Эти патроны (объем I—20 мл) заполняются крупнозернистыми сорбентами, по химии поверхности совершенно аналогичными тем сорбентам, которые используются в ВЭЖХ. Принцип их использования следующий. Изучаемый объект растворяют в растворителе, обладающем незначительной элюирующей силой по отношению к анализируемым веществам. Полученный раствор пропускают через патрон, при этом более подвижные компоненты пробы в нем не задерживаются, а определяемые соединения накапливаются в верхней части слоя сорбента. Таким образом через патрон можно пропустить довольно большой объем образца, во много раз превышающий объем сорбента в нем. По окончании этой операции колонку промывают небольшим объемом растворителя, обладающего значительной элюирующей силой по отношению к определяемым соединениям (fc'aslCH). В результате такой процедуры из образца удаляются механические примеси, слабо и необратимо сорбирующиеся вещества. Получают фракцию небольшого объема, содержащую помимо определяемых соединений лишь фоновые компоненты с близкой хроматографической подвижностью.

В некоторых случаях при подготовке проб прибегают к получению производных, обладающих улучшенными по сравнению с исходными веществами хроматографическимн характеристиками. Так, например, для разделения оптических изомеров их переводят в диастереомерные производные с подходящими хиральными реагентами. С этой целью используют такие реагенты, как Ы-трифторацетил-Ь-пролилхлорид для получения производных аминов и ( —)-метилхлорформиат для оптически активных спиртов. Значительно чаще производные используются для улучшения чувствительности и селективности детектирования [72, 268, 273, 274]. В табл. 5.4 приведены функциональные группы органических соединений и соответствующие производные, содержащие хромофорные или флуорофорные группы. Некоторые методики получения производных приводятся ниже.

1. УФ-поглощающие эфиры карбоновых кислот

Растворяют 10 мкмоль карбоновой кислоты, 20 мкмоль реагента (фенацил- или бензоилбромида) и 40 мкмоль Ы,К-диизопропилэтиламина в 1 мл диметилформамида. Нагревают раствор в течение 1 ч при 60°С. Образец непосредственно можно

вводить в хроматографическую колонку с обращенно-фазовым

сорбентом.

2. n-Нитробензиловые эфиры карбоновых кислот

Растворяют 3 мкмоль карбоновой кислоты и 9 мкмоль нитробензил-Ы,Й'-диизопропилмочевины в 250 мкл метиленхлорида в реакционном сосуде. Нагревают до 80°С и выдерживают 2 ч. Реакционную смесь можно непосредственно анализировать в режиме нормально-фазовой хроматографии, или после продувки в токе азота и замены растворителя образец можно анализировать в обращенно-фазовом режиме.

3. 2,4-Динитрофенилгидразоны карбонильных соединений

Растворяют 10 мкмоль образца в 0,5 мл метанола, подкисляют одной каплей концентрированной соляной кислоты. Растворяют 15 мкмоль 2,4-дннитрофенилгидразина в 0,5 мл метанола. Смешивают два раствора и нагревают в течение нескольких минут при 50°С до завершения реакции.

4. я-Нитробензилоксимы карбонильных соединений

Растворяют 1 мкмоль образца и 5 мкмоль л-нитробензилоксиамина и 50 мкл пиридина. Нагревают реакционную смесь при 60°С в течение 30 мин. Упаривают пиридин током азота и растворяют осадок в метиленхлориде, промывают разбавленным раствором соляной кислоты перед введением образца в хроматографическую колонку.

5. УФ-поглощающие эфиры спиртов

Растворяют 10 мкмоль спирта, 50 мкмоль подходящего фенацил- или бензоилбромида и 10 мкмоль пиридина в метиленхлориде. Реакционную смесь выдерживают в течение 1 ч при 55°С. Упаривают пиридин и метилеихлорид в токе азота и гид-ролнзуют избыток реагента одной или двумя каплями 2 н. соляной кислоты. Удаляют избыток кислоты промыванием 1%-ным

Карбоновце кислоты R—СООН

6Г-^"У~ССН2ВГ п-бромфенацил бромид

// ч\ 0 0

Br-? V-C-CH2OCR

УФ (260 нм)

СН2Вг

4-бромметил-7-метоксику марин

о

н3со

о

CH20CR

Ф (360/420 нм)

02N

CHjC-0-N

0,N-f >-CH2-0CR

УФ (265 нм)

о

Спирты, фенолы R—ОН

N - супцинимидил- п-нитрофенилацетат

о

II

СС1

УФ (254 нм)

3,5-динитробензоиля л орид

о2н

Амины R—NH—R'

02N

0-Ц

УФ (254 нм)

3,5-динитробенэо ил-хлорид

0 кСС1

л-метонсибенэоилхлорид N0,

0,N

2,4-динитро--1-фторбеизол

v ^ П

нсо-7 V-N02

°2N \__У %'

УФ (254 им)

УФ (360 нм)

NO,

Cl

7-хлор Д-нитро-бензнп-2-онсо-1,3 -диазол

R R

Ф (475/545 им)

Меркаптаны R—SH

Аминокислоты R—СН—СООН

страница 65
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136

Скачать книгу "Высокоэффективная жидкостная хроматография" (2.39Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы по ексель программе
участки в снт на новой риге в 100 км от москвы
подкрылки на лифан х 60 купить
type kbt 250dv

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(03.12.2016)