химический каталог




Высокоэффективная жидкостная хроматография

Автор В.Д.Шатц, О.В.Сахартова

0,5—1 мм слоя может помочь решить проблему.

14 — 1з;

ГЛАВА 5

210

211

МЕТОДИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ВЭЖХ

Рис. 5.17. Варианты расположения защитных форколонок ПКь ПК2: и — насос; Д — дозатор; К — колонка; ДТ — детектор.

Предколонки (форколонки) — одно из средств профилактики описанных нарушений работы колонок. Они могут располагаться в двух точках хроматографической системы (рис. 5.17). Предколонки (ПК1) между насосом и инжектором заполняются обычно пелликулярными сорбентами, родственными по химическому типу тем материалам, которыми заполняется основная колонка (К). Если подвижная фаза обладает способностью растворять сорбент, этот процесс происходит в предколонке (ПК0- В результате подвижная фаза насыщается продуктами деструкции сорбента и, подходя к основной колонке (К), почти полностью теряет свою растворяющую способность. Все отрицательные явления, подобные изображенным на рис. 5.16, в этом случае отмечаются в предколонке, однако это несущественно, так как на ней разделение не происходит.

Предколонки (ПК2), расположенные между дозатором и основной колонкой (защитные колонки), участвуют в разделении, поэтому часто их конструкция и технология заполнения в общем повторяют таковые высокоэффективных колонок. Вместе с тем в них можно использовать и более крупнозернистые и пел-ликулярные материалы. Если предколонки упакованы тщательно, они не вызывают сколько-нибудь серьезного снижения эффективности системы, но зато позволяют защитить основную колонку от разрушающего и засоряющего воздействия подвижной фазы и разделяемых смесей.

Промывка и регенерация колонок. В типичных условиях проявительной ВЭЖХ колонка постоянно промывается потоком подвижной фазы, поэтому необходимость ее специальной очистки и регенерации возникает редко, лишь в особенно неблагоприятных случаях. Для промывки и регенерации используют последовательность растворителей возрастающей элюирующей силы.

Объем каждого из них равен примерно десятикратному геометрическому объему колонки. Для колонок с силикагелем, работающих в нормально-фазовом режиме, можно рекомендовать последовательность: хлороформ—этилацетат—ацетон—этанол— вода—этанол—ацетон—этилацетат—хлороформ. При работе с алкилсиликагелями в обращенно-фазовом режиме последовательность такова: вода—метанол—хлороформ—метанол—вода— 0,1 М серная кислота—вода—0,1 М гидроксид аммония—вода. Для повышения эффективности промывки ее можно проводить при температуре колонки 40—60°С. Приведенные методики промывки универсальны; безрезультатность их применения, по-видимому, можно считать признаком необратимого выхода колонки из строя. В то же время далеко не всегда необходима всесторонняя, исчерпывающая промывка. Во многих случаях положительный результат может быть достигнут быстрее и проще — вводом через дозатор серии 10—20 импульсов растворителя большой элюирующей силы, объемом 100—200 мкл.

В ранний период становления ВЭЖХ фирмы-производители в своих инструкциях запрещали изменять направление потока в колонке, подключая ее выход к насосу. С течением времени тон этих рекомендаций становился все менее категоричным, и сейчас уже наряду с прежней точкой зрения существует прямо противоположная. Согласно ей, изменение направления потока не только допустимо, но и является самым простым способом удаления загрязнений.

5.4. ПОДГОТОВКА ПРОБ

Подготовка проб для анализа преследует цели:

— перевод образца в растворитель, совместимый с используемой хроматографической системой;

— удаление компонентов и механических примесей, отрицательно влияющих на работу хроматографа и колонки;

— предварительное отделение таких компонентов, которые не представляют интереса либо затрудняют анализ;

— обогащение пробы определяемыми компонентами;

— перевод компонентов пробы в форму, способствующую селективному разделению;

— перевод компонентов пробы в форму, способствующую чувствительному и селективному детектированию.

Избираемый способ подготовки проб должен соответствовать характеру аналитической задачи. При исследовании реакционных смесей, готовых продуктов или лекарственных форм подготовка проб обычно сравнительно проста. Как правило, навеску исследуемого образца растворяют в определенном количестве растворителя и отфильтровывают от механических при14'

ГЛАВА 5

212

213

МЕТОДИЧЕСКИЕ ОСНОВЫ ВЭЖХ

месей. В качестве растворителя лучше всего использовать подвижную фазу. Это обеспечивает наилучшую воспроизводимость результатов и форму хроматографических пиков. В отдельных случаях возникает необходимость растворения образца в подвижной фазе меньшей элюирующей силы, что допустимо, хотя воспроизводимость анализа может оказаться несколько ухудшенной. Запрещается использовать для растворения проб смеси, обладающие большей элюирующей силой, чем подвижная фаза. В результате смешения такого растворителя с элюентом в колонке форма хроматографического пика окажется искаженной, возможно также выпадение компонентов пробы в осадок и засорение фильтра на входе в колонку. Силикагель и химически модифицированные силикагели

страница 64
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136

Скачать книгу "Высокоэффективная жидкостная хроматография" (2.39Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
профнастил пермь купить дешево г хасана
Стулья TT
курсы маникюра дорогие
мастер курс москва

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(07.12.2016)