химический каталог




Высокоэффективная жидкостная хроматография

Автор В.Д.Шатц, О.В.Сахартова

тся подобрать изократический (т. е. при постоянном составе подвижной фазы) режим разделения. В противоположность этому режиму под градиентным элюиро-ванием понимают такой способ проведения хроматографического

! [ 1

И

Рис. 4.19. Хроматограммы сложной смеси, а — изократическое элюирование, подвижная фаза сильная, из колонки выходят все компоненты пробы, однако рано выходящие делятся плохо; 6 — изократическое элюирование, сила подвижной фазы недостаточна, компоненты 8—11 из колонки не выходят; в — градиентное элюирование. Пунктир изображает содержание компонента Б в подвижной фазе в ходе элюирования.

118

119

ОСНОВНЫЕ ВАРИАНТЫ ВЭЖХ

процесса, когда в ходе анализа концентрация сильного компонента подвижной фазы повышается по заданному закону.

Вопросы теории и методики применения градиентного элюи-рования детально рассмотрены в монографии Яндеры и Хура-чека [226]. Помимо этой монографии заинтересованному читателю можно рекомендовать оригинальные работы [77, 78, 117, 219—225, 227, 228, 231, 232, 238, 339—341, 371]. Здесь же мы воспроизводим только простейшие соотношения из работы [226]. Расчет удерживаемых объемов при градиентном элюировании базируется на следующей основной идее. Предположим, что бесконечно малому количеству подвижной фазы dV, прошедшему через колонку, отвечает смещение максимума хроматографической зоны, пропорциональное величине объема подвижной фазы в колонке dVm. В течение этой бесконечно малой ступени элюирования коэффициент емкости можно считать постоянной величиной, потому

(4.65)

dV=k'dVm.

(4.66)

Это уравнение может быть записано в другой форме:

J dVm=Vm= I ^rdV,

dt,

(4.67)

где V'g — удельный удерживаемый объем в режиме градиентного элюирования. Это же соотношение может быть представлено в единицах времени: В

J dtt=h= J линейная функция, и концентрация может быть выражена следующим образом:

c=где А — исходная концентрация сильного растворителя; В — крутизна градиента.

С другой стороны, зависимость k' от с может быть выражена уравнением (4.46). Объединив уравнения (4.46), (4.69) и (4.68), получим

r't

(4.70)

где I'R — время удерживания в режиме градиентного элюирования.

dV

(4.68)

с

J dV„=Vm= j

Для решения этих уравнений необходимо выразить зависимость коэффициентов емкости от объема элюента (или времени с начала градиента) в виде двух функций. Одна из них описывает связь между удерживанием и концентрацией более сильного растворителя, вторая — связь между этой концентрацией и объемом элюента (временем). Уравнение (4.66) тогда можно записать в виде

ДФ(У)] '

где 4»(V) — функция градиента. В простейшем случае Ф(У) и после интегрирования найдем удельный удерживаемый объем:

V'g=—i-lg {2,3lmBk'wVm- 10-*"А+ 1). (4.71)

тпВ

Приведенный подход позволяет с достаточной точностью предсказать поведение соединений в градиентном режиме, если известны параметры уравнения (4.46).

Сказанное иллюстрирует табл. 4.23, где величины V'g, рассчитанные по уравнению (4.71), сопоставлены с экспериментально найденными значениями для ряда лекарственных веществ.

Относительные удерживаемые объемы в градиентном режиме as могут быть рассчитаны по аналогии с изократическими

ГЛАВА 4

120

121

ОСНОВНЫЕ ВАРИАНТЫ ВЭЖХ

параметрами из формально вычисляемых, «кажущихся» коэффициентов емкости:

(4.72)

Наконец, величина критерия разделения Re определяется для линейного градиента выражением

_ VJV at-\ lg(2,31m2BVmfeV-10-m=A+l)-l

ftg=—~ —— : '

*8 T-Vm[l+A'«.,(2,31m2/3VmA'TO!!-f-10^)-1]

A (4.73)

где значение символов то же, что в уравнениях (4.65) — (4.71), а индексы «2» отвечают параметрам второго пика разделяемой пары.

/ Vnz \

При общей оценке применимости метода для разделения многокомпонентных смесей может быть использован параметр' Р — емкость хроматограммы:1 ,

(4.74)

(4.75)

где VRZ, VRA — удерживаемые объемы, отвечающие начальной и конечной точкам рассматриваемого участка хроматограммы в изократическом режиме; Vez, VgA — аналогичные величины для режима градиентного элюирования. На рис. 4.20 сравниваются величины Рс и Pg для различной продолжительности хро-матограмм в предположении, что VSA=Vm и f0 = 1 мин. В изократическом режиме емкость хроматограммы возрастает незначительно с увеличением продолжительности разделения свыше 15 мин, в то время как градиентное элюирование обеспечивает линейное увеличение числа пиков со временем.

Как ясно из предыдущего изложения, чисто расчетный выбор оптимальных условий градиентного элюирования требует знания параметров k'w и m уравнения (4.46). Разумеется, эти величины можно определить, проведя необходимые предварительные измерения в изократическом режиме. Однако не всегда компоненты смеси доступны в индивидуальном виде, в связи с чем чаще условия градиентного элюирования, близкие к оптимальным, выбирают опытным путем на основании следующих правил.

25 tc

Выбрав подходящую колонку, проводят градиентное элюирование в таком режиме, чтобы концентрация сильного раст

страница 34
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136

Скачать книгу "Высокоэффективная жидкостная хроматография" (2.39Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
камера заднего вида форд
Барные столики и Стойки B-trade
набор посуды из нержавейки
кастрюльки.ру интернет

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(18.01.2017)