химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

ая кислота, 1%-ный раствор.

В четыре пробирки наливают по 1—2 мл раствора белка. В каждую пробирку добавляют по 3 капли 1%-но-го раствора уксусной-'кислоты, после чего в первую пробирку приливают 4—5 капель раствора пикриновой кислоты, во вторую —2—3 капли раствора танина, в третью — 2—3 капли реактива Бушарда, в четвертую — столько же реактива Драгендорфа.

Наблюдают выпадение осадков.

Образование хелатов. Ионы тяжелых металлов (Сиг+, Мп8+) образуют с аминокислотами внутрикомилек-сные соединения, так называемые хелаты.

При образовании хелатов ионы металла вступают в связи с молекулой аминокислоты, в состав которой входят две группы, способные соединяться с металлами (карбоксильная и аминогруппа). Эти связи являются частично ионными и частично ковалентнымн, так как одна из реакционносиособных групп аминокислоты образует с металлом ионную связь, а другая вступает в комплексную, ковалентную связь, при которой свободная пара

электронов дополняет незавершенную структуру внешней

электронной оболочки металла. В растворах хелатов металлы не образуют положительно заряженных

ионов. -i

Строение внутрикомплекспого соединения аминокислоты глицина (гликоколла) с ионами меди может быть представлено следующей формулой:

цс-*% нр-снг

Реактивы: а) глицин (гликоколл), 2%-ный раствор; б) углекислая основная медь (СиСОз-Си(ОН)г), в порошке.

К 2—3 мл раствора глицина добавляют (на кончике шпателя) немного основной углекислой меди, нагревают до кипения и кипятят 1 мни. Горячий ярко-синий раствор фильтруют. В фильтрате через некоторое время заметны тонкие игольчатые кристаллы глицин-медного внутрикомплекспого (хелатного) соединения.

Распределительная хроматография аминокислот на бумаге

Общие сведения. Хроматографический метод анализа открыт русским ученым М. С. Цветом в 1903 г. В настоящее время многочисленные виды хроматографического анализа широко используются в различных областях химии и биологии.

В зависимости от физико-химических факторов, определяющих основной механизм процесса, методы хроматографического анализа делят на четыре основных вида: адсорбционные, распределительные, ионообменные и осадочные.

Для разделения смеси аминокислот чаще всего применяют метод распределительной хроматографии на бумаге. Он основав на различной степени распределения компонентов смеси между двумя несмешивающимисн жидкими фазами (неподвижной водной фазой и подвижной фазой органического растворителя).

26

27

Органический растворитель (например, фенол, насыщенный водой, или смесь н-бутилового спирта, ледяной уксусной кислоты и воды), проходя через полоску фильтровальной бумаги, увлекает за собой аминокислоты, раствор которых был нанесен на бумагу. Различные аминокислоты передвигаются по бумаге с неодинаковой скоростью. Скорость перемещения аминокислот зависит от многих факторов: строения молекулы аминокислот, их способности легче растворяться в органическом растворителе или воде, избирательной адсорбции на бумаге, типа бумаги, условий проведения анализа и т. д. Чем лучше растворяется аминокислота в органическом растворителе, тем больший путь она пройдет с ним по бумаге.

Приняты два способа хроматографического разделения аминокислот на бумаге — восходящий и нисходящий. При восходящем способе растворитель поднимается по бумаге снизу вверх, при нисходящем — сверху вниз. Положение отдельных аминокислот обнаруживают путем проявления—обработки высушенной бумаги раствором нингидринй и последующего нагревания ее при 100° С. На полоске бумаги (хроматограмме) отчетливо видны пятна фиолетового, синего, голубого, желтого, оранжевого, коричневого цвета.

Положение аминокислот на бумаге можно установить и без проявления, рассматривая хроматограмму в ультрафиолетовых лучах. Пятна отчетливо флуоресцируют в ультрафиолете.

Для каждой аминокислоты характерна скорость перемещения, которую выражают с помощью коэффициента Rf. Коэффициентом Rf называют отношение пути, пройденного аминокислотой (от места ее нанесения па бумагу до середины пятна на хроматограмме), к расстоянию от места нанесения смеси аминокислот до фронта растворителя:

где а — расстояние от места нанесения раствора смеси аминокислот до середины пятна данной аминокислоты, мм; Ь — путь, пройденный растворителем, мм.

Каждая аминокислота имеет определенное значение коэффициента R,, которое может меняться в зависимости от вида применяемой бумаги, растворителя, температуры, рН среды и некоторых других факторов (табл. 2).

Табл. 2. Значения К( отдельных аминокислот (бумага ватман Ш 1),

Аминокислоты Раетмрители

фенол, иаеыщешмЯ штт я-буталовый спирт — ледяная уксусная кислота—вед*(4 : 1 :J)

Фенилаланик 0,87 0,66

Ливии 0,82 0,16

Аргшшн 0.» 0,18

Гистиди 0,69 0,17

Серии 0,36 0,32

Треонин 0,47 0,36

Глицин 0,4! 0,34

Аспарягииовая кислота 0,15 0,33

Глотаминовая кислота 0,25 0,37

Тирозин 0,63 0,53

0,56 0,39

Метиошш 0,83 0,58

Триптофан 0,75 0,62

Пролил 0.89 0,50

Лейцин 0,8? 0,72

Валил 0,76 0,56

Цйсгйн 0,03 0,13

Для разделения ами

страница 9
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
какой формат dpi приемлем для глаза
купить видеорегистраторы carcam
курсы декорирования интерьера
подготовительные курсы секретарь руководителя

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(07.12.2016)