химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

1,1239); в) едкий натр, 10°!0-ный раствор; г) реактивы, необходимые для количественного определения редуцирующих Сахаров в растительном материале (см. с. 220—227).

В зависимости от предполагаемого содержания крахмала в исследуемом материале навеска должна составлять 2—10 г.

Продукт (например, клубни картофеля, зерна злаков) предварительно измельчают и тщательно перемешивают, после чего берут навеску.

Навеску переносят в стакан, добавляют 100 мл дистиллированной воды комнатной температуры и, часто помешивая, оставляют на 45—60 мин., при этом редуцирующие сахара переходят в раствор. Содержимое стакана фильтруют через бумажный фильтр, остаток на фильтре промывают 8—10 раз холодной водой, которую берут каждый раз по 20—30 мл.

Воронку с фильтром, на котором находится отмытый остаток, ставят в коническую колбу на 500 мл. Тонкой стеклянной палочкой делают отверстие в бумаге и отмытый остаток смывают водой в колбу. Водой смывают также с кончика палочки приставшие кусочки навески. В колбу наливают 25 мл 25%-ной соляной кислоты, закрывают ее пробкой с обратным холодильником и ставят в кипящую водяную баню на 2,5—3 ч, периодически встряхивая. После окончания гидролиза колбу охлаждают, содержимое ее нейтрализуют 10°/о-ным раствором едкого натра (по лакмусу), стараясь не давать избытка щелочи. К нейтрализованному содержимому колбы добавляют 1—2 капли 25°/о-ной соляной кислоты до слабокислой реакции и количественно переводят в мерную колбу на 500 мл, доливая водой до метки, затем пере235

Мсшивают и фильтруют. В 20—50 ил фильтрата определяют содержание глюкозы.

Содержание крахмала (в процентах) х рассчитывают по формуле

х-/'-ОД

где Г— количество глюкозы, образовавшееся в результате гидролиза крахмала (в процентах); 0,9 — коэффициент пересчета глюкозы на крахмал.

ИССЛЕДОВАНИЕ АНАЭРОБНОГО РАСПАДА ГЛИКОГЕНА ИЛИ КРАХМАЛА

Анаэробный распад гликогена (гликогенолиз) или глюкозы (гликолиз) начинается с этапа образования глюкозофосфорных эфиров. При гликогенолизе вначале образуется глюкозо-1-фосфат, который затем вод влиянием фермента фосфоглюкомутазы превращается в глю-козо-6-фосфат. При фосфорилировании глюкозы процесс начинается с образования глюкозо-6-фосфата.

Наряду с фосфорилитическим распадом гликогена в мышцах имеет место (правда, в значительно меньшей степени) и гидролитическое расщепление его под влиянием амилазы и мальтазы.

Схематически процесс анаэробного расщепления углеводов в мышцах можно представить следующим образом. Гликогенолиз

" Гликоген + Н3РОа

Фосфорилаэа J, f Гликолиз

Глюкозо-1-фосфат Глюкоза -[- АТФ

Гдюкомутаза | f 1 I

Глюкозо-6-фосфат * ' АДФ

Фосфоизамераза \ f

Фруетгао-б-фосфат АТФ Фосфофруктокиназа | f

Фруктозо-1,0-дифосфат -| АДФ

Альдвжза f 1

Фосфоглицериновый альдегид -f- фосфодноксиацетон

2 молекулы фосфоглицерипового альдегида + -I- 2Н3РОй + 2НАД Дегидрогетза фосфоглицерипового альдегида | f

236

2 молекулы 1,3-дифосфоглицериновой кислоты +

+ 2НАД-Н, + 2АДФ Фосфоглицератшназа | |

2 молекулы 3-фосфоглицсриновой кислоты -{- 2АТФ Фосфоглщеромутаза | t

2 молекулы 2-фосфоглицсриновой кислоты Фосфопируватгидратаза 1 ?

2 молекулы фосфоенолпировиноградной кислоты +

+ 2АДФ Киназа пировиноградтй кислоты (пируваткиназа) I Т

2 молекулы енолпировиноградной кислоты -|- 2АТФ

1 молекула иировиноградиой кислоты -|- 2НАД — Н» Лактатдегидрогеназа \ f

2 молекулы молочной кислоты + 2НАД

Таким образом, если к кашице мышечной ткани добавить раствор гликогена или крахмала и эту смесь поместить в анаэробные условия при температуре 36,5— 37° С, то через 1—2 ч можно наблюдать образование молочной кислоты, которую открывают реакцией с серной кислотой и гваяколом или с серной кислотой и спиртовым раствором тиофена в присутствии сернокислой меди.

Реактивы и материал ы: я) кашица мышечной ткани. Мышцы только что убитого кролика, крысы или лягушки нарезают ножницами на маленькие кусочки (на холоду). Кашицу готовят непосредственно перед употреблением, растирая нарезанные мышцы с небольшим количеством дистиллированной воды; б) фосфатный буфер рН 8,04- Готовят два раствора: I — Vis М раствор Na2HP04.2H20 (11,876 г соли в 1 л); II —Vis М раствор КН2Р04 (9,078 г соли в 1 л). Для получения буферной системы (рН 8,04) смешивают 95 мл первого раствора с 5 мл второго; в) метафосфорная кислота, 5%-ный раствор; г) гликоген или крахмал, 0,5%-ный раствор; д) вазелиновое масло; е) гидрат окиси кальция (Са(ОН)г • Н20), в порошке; ж) сернокислая медь, 15%-ный раствор; з) серная кислота, концентрированная; и) гваякол (монометиловый эфир пирокатехина), 0,'2<'/0-ный спиртовой раствор; к) тиофен, /0—20 капель препарата растворяют в 100 мл этилового спирта.

237

В две пробирки вносят по 0,5 г свежеприготовленной мышечной кашицы и 3 мл фосфатного буфера (рН 8,04). Первая пробирка служит контрольной, вторая — опытной. В контрольную пробирку для инактивации ферментов добавляют 2 мл 5%-ного раствора метафосфорной кислоты и 1 мл дистилл

страница 76
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
стойка барная sht-ds5
обучение по обслуживанию кондиционеров
Garant
forward в барнауле

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)