химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

они окисляются до соответствующих кислот, а пикриновая кислота восстанавливается в пикраминовую, обладающую красной или буровато-красной окраской:

Гинг

У У

№2 N(k

неон носн нот неон сигон

ЛшриюВая ПшрамитВая ГлюконоЙая

Шкот тоюта кислота кислота

Реактивы и приборы: а) пикриновая кислота, насыщенный раствор; б) углекислый натрий (карбонат натрия), 20%-ный.раствор; в) спектрофотометр, фото-электроколориметр ФЖ-60, ФЭК-Н-57, ФЖ-56 или спектроколориметр «Спскол» (ГДР).

К 1 мл испытуемого раствора (в котором должно содержаться ее более 3 мг редуцирующих Сахаров) прибавляют 2 мл насыщенного водного раствора пикриновой кислоты и 1 мл раствора углекислого натрия, после чего пробирку переносят на 30 мин. в кипящую водяную баню. Охлаждают до комнатной температуры и доводят дистиллированной водой до объема 10 мл.

Оптическую плотность раствора определяют при 455 нм (синий светофильтр).

Содержание редуцирующих Сахаров рассчитывают по калибровочной кривой, составленной по стандартным растворам глюкозы (см. и работе «Количественное определение Сахаров по антроновому методу»).

226

Метод пригоден для количественного определения глюкозы, галактозы, арабинозы, фруктозы, рамнозы, ксилозы, мальтозы, лактозы и крахмала.

Определение редуцирующих Сахаров по реакции с 3,5-дииитросалицнловой кислотой. При взаимодействии Сахаров с 3,5-динитросалицнловой кислотой последняя восстанавливается в З-амино-5-нитросалицнловую. В остальном реакция протекает так же, как и с пикриновой кислотой.

Реактивы и прибор ы: а) динитросалициловый реактив: в мерной колбе на 1 л растворяют в дистиллированной воде 10 г 3,5-динитросалициловой кислоты, 300 г сегнетовой соли, 16 г едкого натра и доводят водой до метки. Раствор выдерживают два дня в темном месте, затем фильтруют в склянку оранжевого стекла и хранят в темноте; б) спектрофотометр, фотоэлектроколо-риметр ФЖ-60, ФЭК-Н-57, ФЭК-56 или спектроколориметр «Спекал» (ГДР).

К 1 мл испытуемого раствора (с содержанием не более 2 мг редуцирующих Сахаров) прибавляют 2 мл ди-нитросалицилового реактива, нагревают 5 мин. в кипящей водяной бане, охлаждают до комнатной температуры, после чего доводят до объема 25 мл.

Оптическую плотность раствора определяют при 530 нм (зеленый светофильтр).

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ САХАРОВ В РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ С ПОМОЩЬЮ ХРОМАТОГРАФИИ НА БУМАГЕ* (по О. А. Павлииотшй)

Количественное определение сахаров с применением хроматографии на бумаге включает в себя следующие основные операции: а) фиксацию растительного материала; б) экстракцию Сахаров и очистку вытяжки от белков и других примесей; в) распределительную хроматографию сахаров на бумаге; г) элюцию сахаров с бумаги; д) определение их содержания в элюатах.

* Для студенческого научпо-нсследовательского кружка.

Реактивы и материалы: а) хроматографиче-ская бумага Ленинградская «быстрая» № 1; *Filtrak* FN-4; ватман М 1 и 2; б) этанол, 96%-ный и 80%-ный; в) уксуснокислый свинец (средний) (СНаСОО)2РЬХ

227

X ЗН20, 10%-ный раствор; г) сернокислый натрий, насыщенный раствор; д) см есь-н-Оута нал а, пиридина и воды в соотношении 6:4:3 (по объему), или е) смесь н-бутанола, уксусной кислоты и воды в соотношении 4:1:5 (по объему). Если смеси растворителей разделяются на два слоя, то берут верхний; ж) проявители на кетозы: 1 — резорцинфосфят. 0,2 г резорцина растворяют в 100 мл 96%-ноге этанола. Перед проявлением хроматограммы смешивают 10 объемзв спиртового раствора резорцина с одним объемом ортофосфорной кислоты Н;.РО< (плотность 1,75—1,82); II —мочевина. 5 г мочевины растворяют в 100 мл 96%-ного спирта и добавляют 20 мл

2 н раствора соляной кислоты; з) проявители на ильдо-зы: I — анилинфталат (см. с. 212); II — анилиноксалат: 0,93 г перегнанного анилина растворяют в 50 мл 96%-ного этанола, после чего смешивают с равным объемом 0,2 М раствора щавелевой кислоты в этаноле (можно также брать водный 0,2 М раствор щавелевой кислоты); и) глюкоза, фруктоза, сахароза и другие сахара, 2%'~ные растворы; к) реактивы для количественного определения Сахаров по антроновому методу (см. с. 225).

Навеску свежего растительного материала (10—-30 г) заливают (для фиксации) десятикратным объемом кипящего 96%-ного этанола, нагревают 2—3 мин., добавляя небольшое количество углекислого кальция или натрия в порошке для нейтрализации кислот (под контролем лакмуса или универсального индикатора). Зафиксированная навеска (в' колбе или склянке с притертой пробкой) может храниться в течение нескольких месяцев (в темном и прохладном месте). Фиксация спиртом является и началом экстракции сахаров, которые частично переходят в раствор.

Сахара экстрагируют горячим (70—80") 80%<-ным этанолом 3 раза по 30 мин. Перед началом экстракции рекомендуется дополнительно растереть материал в ступке. Спирт, который служил для фиксации навески, объединяют со спиртовыми вытяжками.

После каждой экстракции охлажденную спиртовую вытяжку центрифугируют. Объединенные спиртовые вытяжки сгущают в вакууме до небольшого объема

страница 73
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить раковину esy 70 с тумбой
участки новая рига 50 км от мкад
Кликни на ссылку получи бонус на заказ с промокодом "Галактика" в KNS - Asus gl с доставкой по Москве и городам России.
Пожарные шкафы

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(03.12.2016)