химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

рбонаты кишечного и панкреатического соков, белковые вещества и в сравнительно небольшой степени мыла, содержащиеся в полоста кишечника.

Реактивы: а) желчь; б) мыло, 2%-ный раствор; в) яичный белок, 2%-ный раствор; г) двууглекислый натрий, 2%-ный раствор; д) растительное масло.

В штатив ставят 5 пробирок. В первую из них наливают 20 капель желчи, во вторую — 20 капель раствора мыла, в третью, четвертую и пятую соответственно по 20 капель раствора яичного белка, двууглекислого натрия и дистиллированной воды. Затем во все пробирки вносят по 3 капли растительного масла, содержимое взбалтывают. Через 5 мин. учитывают результаты опыта.

Исследование кинетики гидролитического действия липазы поджелудочной железы. Общие сведения. Скорость химической реакции определяется количеством субстрата, подвергшегося превращению в единицу времени. Единицей действия фермента называют то количество его, которое катализирует превращение одного микромоля субстрата в минуту при оптимальных условиях— соответствующей температуре, рН, концентрациях реагирующих веществ и фермента и т. д.

Скорость ферментативной реакции зависит также от химической природы субстрата, присутствия активаторов или ингибиторов и некоторых других факторов.

Одним из важнейших факторов, определяющих скорость ферментативной реакции, является концентрация субстратов.

Фермент Е образует с субстратом S промежуточный комплекс ES, который затем распадается. При этом образуется продукт реакции Р, а фермент регенерирует

E + S.— ESZ1E + P,

187

где K+i — константа скорости прямой реакции; K-i — константа скорости обратной реакции; Л+2— константа скорости реакции расщепления фермент-субстратного комплекса; K-s—константа скорости обратной реакции. Принимая, что фермент-субстратный комплекс способен к диссоциации, можем написать

т, е. константа диссоциации фермент-субстратного комплекса равна отношению констант скоростей обратной и прямой реакций.

Если велико значение константы скорости обратной реакции К i и мало значение Л'+ь то константа диссоциации фермент-субстратного комплекса является высокой и комплекс легко подвергается распаду на исходные вещества. В этом случае реакция протекает с малой скоростью. Если же, наоборот, значение K+i велико, a K-i мало, то реакция идет с большой скоростью.

В соответствии с законом действия масс можно написать

[S]([Ј0]-I-S1)-/C.9[ЈS], (I)

где [?о! — общая концентрация фермента в начале реакции; (ES) — концентрация фермент-субстратного комплексного соединения; ([Ео\—[ES\) — концентрация свободного фермента за вычетом той части, которая связана с субстратом.

Преобразуя данное уравнение, получим

(Н)

или

\ES] _ IS]

. "Ле +[SP

Чем больше значение [ES], тем выше скорость ферментативной реакции. Наибольшая скорость реакции будет достигнута при [Б5]=[?0], т. е. когда весь фермент соединится с субстратом.

Таким образом,

0 1§3-, (III)

где о — скорость данной реакции; vMmc — максимальная скорость реакции.

188

Но

mi _ is]

Тогда уравнение (III) примет следующий вид:

е IS]

откуда

(IV)

Уравнение (IV) называют уравнением Михазлиса—Мен-тен.

При более точных расчетах кинетики ферментативных реакций вместо константы диссоциации KS применяют так называемую константу Михаэлиса К»:

Ам = V—

В этом случае уравнение (IV)можно написать

V=V —'"'..т.-. (V)

IS]

Уравнение (V) известно как уравнение Холдейна — Бриггса. Константа Михаэлиса соответствует той концентрации субстрата (в молях на литр), при которой скорость реакции равна половине максимальной.

Кинетика реакции гидролитического расщепления жира. Исследуют скорость реакции расщепления молочного жира, катализируемой липазой поджелудочной железы.

Реактивы: а) вытяжка из поджелудочной железы. Свежую поджелудочную железу (крупного рогатого скота, свиньи) тщательно очищают от жира, измельчают на мясорубке и растирают в ступке с водой до получения гомогенной массы (соотношение железы и воды 1:3), которую процеживают через марлю, сложенную в 2—3 слоя; б) молоко. Свежее молоко нагревают до кипения и охлаждают до 37—38° С; в) фенолфталеин, 0,1%-ный спиртовой раствор; г) едкий натр, 0,1 н раствор; д) желчь.

В две конические колбы на 100 мл отмеривают по 50 мл кипяченого молока, после чего добавляют по 2 мл

189

вытяжки из поджелудочной железы, содержащей липазу. В первую колбу прибавляют еще 5 капель желчи, которая является активатором липазы.

Содержимое обеих колб быстро перемешивают и тотчас же из каждой отбирают (пипетками) по 10 мл жидкости (для титрования), а колбы с реакционной смесью переносят в термостат, нагретый до 37° С.

К отобранным 10 мл

жидкости добавляют

л* '0 мл дистиллированпой воды 2-3 капли

Рис. 13. Кривые процесса гидролити- Р^твора фенолфталеичсского расщеплении жир," на И титруют 0,1 И расг/-лнпазв, активированная ЖЕЛЧЬЮ; 2- ВОрОМ ЕДКОГО НвТра ДО

лишоо еез жми. слабо-розового окрашивания. Отдельно титруют пробы, взятые из первой и второй колб. Результаты титрования зап

страница 61
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
гироскутер цена 4000
купить наклейку незабудку символ геноцида армян
каркасы кровати 120*190 в икеа
права пациентов на бумаге и в жизни

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.07.2017)