химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

сн2-$н

СООН

Шапеин

Реакция на аминокислоты, содержащие серу (цисте-ин, цистин). Известны три серусодержащис аминокислоты: цисте!ш, цистин и мстионин.

ch2-s -cnj

сою

ссон

Цистин

CHZ

соон

ттшшм

В молекулах цистеина и цистина сера связана относительно слабо и легко отщепляется при щелочном гидролизе в виде сероводорода, который реагирует со щелочью, образуя сульфиды натрия или калия. Сульфиды взаимодействуют с уксуснокислым свинцом (вернее, с плюмбитом) с образованием осадка сернистого свинца черного или буро-черного цвета. Реакции протекают по следующим уравнениям:

К

сн2-он

СН—Щ + + ц2и

CODH

Серия

? РЬ(ОН)г+2ШОП - - ногРЬОг + гн,о Пяаийт

3. Наг3 + Na2PbOz + z НцО —-J АВД + ШОН

Реактивы: а) раствор яичного или растительного белка (ем. с. 6); б) желатин, 1%-ный раствор; в) едкий натр, 15—20%-ный раствор; г) уксуснокислый свинец, 1%-ный раствор.

В одну пробирку наливают 2 мл раствора яичного или растительного белка, в другую — столько же раствора желатина. В обе пробирки добавляют по 1—1,5 мл раствора щелочи и осторожно нагревают до кипения, кипятят 1—2 мин., после чего в каждую пробирку прибавляют по 2—3 капли раствора уксуснокислого свинца,

В пробирке с яичным (или растительным) белком появляется буровато-черное или черное окрашивание, интенсивность которою зависит от концентрации раствора белка и содержания в нем цис теина и цистииа. Раствор желатина окрашивании не дает. Это свидетельствует о том, что в состав желатина не входят ссрусодержащие аминокислоты.

Исследование физико-химических свойств белковых веществ

Диализ. С помощью диализа очищают высокомолекулярные растворы белковых веществ от примеси низкомолекулярных соединении (солей, Сахаров и др.).

Реактивы: а) раствор яичного белка с хлористым натрием (приготовление—см, с. С); б) азотнокислое серебро, 0,5%-ный раствор (в склянке темного стекла); в) азотная кислота, 10%-ный раствор; г) едкий натр, 10%-ный раствор; д) сернокислая медь, 1%-ный раствор.

В мешочек из целлофана или коллодия (или в высушенный пузырь теленка, поросенка) наливают до половины раствор яичного белка (с хлористым натрием). Мешочек подвешивают на стеклянной палочке и погружают в стакан с дистиллированной водой (рис. 1). Диализ проводят при комнатной температуре. Через 40—60 мин. из стакана берут в две пробирки по 2 мл воды. В одной пробирке проводят реакцию на ионы хлора, для чего воду подкисляют несколькими каплями 10%-ного раствора азотной кислоты и добавляют 2—3 капли раствора азотнокислого серебра, выпадает белый осадок хлористого серебра. С пробой во второй пробирке производят биуретовую реакцию. Если диализ проводится правильно, биурстовая реакция будет отрицательной.

Диализ можно ускорить, периодически меняя воду в стакане (через каждые 15—20 мин.) или же используя проточный диализатор.

Диализ проводят до получения отрицательной реакции на ионы хлора.

Примечания; 1. Для приготовления мешочков рекомендуется разрезать целлофан на куски размером 12,5X12,5 см.

2, Для приготоьления мембраны из коллодия в чисто вымытую и высушенную круглодонную колбу емкостью 50 мл или большую пробирку наливают коллодий (4%-ный раствор нитроклетчатки в смеси эфира со спиртом) и почти сразу же выливают обратно в склянку.

Медленно вращай колбу или пробирку, равномерно распределяют остатки коллодия по ее стенкам. Сосуд оставляют на несколько минут до исчезновения запаха эфира, после чего 2-4} раза ополаскивают небольшими порциями дистиллированной воды (по 5—8 мл) для удаления следов спирта.

Во время ополаскивания пленка начинает отслаиваться от стенок сосуда, тогда ее осторожно отделяют пинцетом. Чтобы ускорить отделение, осторожно наливают воду между отслоившейся пленкой и стенкой сосуда.

Определение изоэлектрической точки белка. В изоэлектрической точке растворы белков неустойчивы, Молекулы белка с одинаковым количеством положительных

и отрицательных зарядов легко выпадают в осадок. Зпа16

17

чсние рН, соответствующее изоэлектрической точке, является характерным для каждого белка. Например, для казенна рН равно 4,7, для яичного альбумина — 4,8, желатина — 4,9, зеина (кукурузного белка) — 6,2; у прота-минов и га стонов изоэлектрическая точка лежит в слабощелочной среде.

Выпадение белка в осадок в изоэлектрической точке можно ускорить добавлением водоотнимающих веществ (спирта, ацетона, эфира) или танина. Одни из них (органические растворители) уменьшают степень гидратации белковых макромолекул, разрушают их водные оболочки, другие, как, например, танин, образуют нерастворимые в воде соединения с азотистыми гетероциклическими группировками.

Реактивы: а) желатин, 0,.9'10-ный раствор; б) уксусная кислота, 0,1 н раствор; в) уксуснокислый натрий, 0,1 н раствор; г) этиловый спирт, 96%-ный; д) танин, 0,1%-ный раствор.

В пять пробирок наливают растворы уксусной кислоты и уксуснокислого натрия в количествах, указанных в табл. 1, после чего в каждую пробирку добавляют но 1 мл раствора желатина и хорошо перемешивают, затем прибавляю

страница 5
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ручки для дверей скобы
http://www.prokatmedia.ru/plazma.html
купить матрас аскона 80х200 milena
молли билеты

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(21.08.2017)