химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

(25 мл)

1,94 . 0,28 • 25

*« ^ id•

Содержание азота аминокислот х2 (мг) в исходном растворе (22 мл)

1,94 • 0,28 - 25 - 22

Л-2 = __

Д 1:3 А МИНИРОВАНИЕ АМИНОКИСЛОТ

Общие сведения. Дезаминирование — один из путей дальнейшего превращения аминокислот в организме. В результате этого процесса аминокислоты отщепляют аммиак и превращаются в безазотистые соединения. Возможны несколько типов дезаминирования.

а) окислительное

и-си -соон + i% f)-c-coai + NH3;

Щ с

б) восстановительное

NH2

в) гидролитическое

ft—сн—cow -l-ffeg Я—сн—соон + т.

Окислительное дезаминирование превалирует у животных, растений и многих видов микроорганизмов, другие типы дезаминирования встречаются главным образом у некоторых анаэробных микробов. Окислительное дезаминирование протекает в два этапа.

151

Первый этап

f ф I

mm аюн

Шштиаот

Промежуточными акцепторами водорода являются НАД или ФМН, которые восстанавливаются до НАД ? Н2 или ФМН • Н.2. В дальнейшем водород восстановленных форм кофермеитов переносится на кислород с образованием воды.

Второй этап. Иминокислота присоединяет воду и распадается на кетокислоту и аммиак:

с=т с-0 + щ.

тон cm

ишжшю ктшшшю

Второй этап проходит спонтанно, без участия ферментов.

Окислительное дезаминировамие D-, I-аланина. D-, Lаланин под действием фермента оксидазы-Д-аминокис-лот окисляется в пировиноградную кислоту. При этом отщепляется аммиак, который можно определить с помощью реактива Несслера.

Е=0 +

ром. Эфир испаряют на воздухе (в вытяжном шкафу), выключив в лаборатории нагревательные приборы. Порошок ферментного препарата хранят в холодильнике. Он сохраняет свою активность в течение 5—7 дней. Перед употреблением порошок экстрагируют 20 мин. фосфатной буферной смесью (рН 7,6) в отношении 1:20, после чего центрифугируют 10 мин. при 3000 об/мин.; б) D-, L-аланин, 2,5%-пый раствор на фосфатной буферной смеси (рН 7,6); в) фосфатная буферная смесь рН 7,6 (приготовление см. прил. 12); г) серная кислота, 10%-ный раствор; д) реактив Несслера (см, работу «Колориметрическое определение общего количества азота»).

Опыт проводят в трех пробирках. В первую вносят 1 мл ферментного препарата (центрифугата) и 1 мл фосфатного буфера, во вторую — 1 мл раствора аланина и 1 мл буферной смеси, в третью — 1 мл ферментного препарата и 1 мл раствора аланина. Все пробы тщательно перемешивают, плотно закрывают заранее подобранными пробками и помещают в водяную баню 37—38" С на I ч (лучше пользоваться ультратермостатом). Во время инкубации тщательно следят за температурой воды в бане, не допуская ее повышения. По истечении указанного срока во все пробирки приливают по 1 мл 10%-ного раствора серной кислоты и 3—4 мл реактива Несслера и наблюдают за окраской жидкости. В опытной пробе (третья пробирка) появляется интенсивное желто-оранжевое окрашивание (до желто-бурого), вызванное продуктом взаимодействия аммиака с реактивом Несслера (иодидом меркураммоеия). Жидкость в первой и второй пробирках, которые служили контролем, примет бледно-желтую окраску.

cm

Вктдаза-Д-ажитиаот ^т

ПироЫнноградная кислот

Реактивы; а) ферментный препарат оксидазы Д-аминокшлш. Освобожденные от капсулы почки крысы на холоду тщательно разрезают ножницами на мелкие кусочки, которые затем растирают в ступке в кашицу. Кашицу дважды экстрагируют 10-кратным объемом охлажденного ацетона. Ацетон отсасывают на воронке Бюхнера, а осадок два раза промывают диэтиловым афиши

ПЕРЕАМИНИРОВАИИЕ (ТРЛНСЛМИНИРОВАН ИЕ)

АМИНОКИСЛОТ

Общие сведения. Траисамииирование играет важную роль в процессах биологического распада и синтеза аминокислот. Реакция персаминирования, открытая советскими учеными А. Е, Браунштейном и М. Г, Крицман, заключается в переносе аминогруппы с аминокислоты на кетокислоту, которая таким образом преобразуется в аминокислоту. Аминокислота — донатор аминогруппы, кетокислота — ее акцептор. Реакция катализируется

153

ферментами трансаминазами, простетической группой которых служит фосфоииридоксаль, являющийся промежуточным переносчиком аминогруппы. Присоединив аминогруппу, фосфопиридоксаль превращается в фосфо-пиридоксамин, с которого уже аминогруппу принимает кетокислота.

Принцип работы. Алании и а-кетоглютаровая кислота подвергаются нереаминированию с образованием пи-ровиноградной и глютаминовой кислот:

СООН

тон

/Шил

ПироЬиштдная

кислота

? )=0

ГмтттшноЙая кажта

соон

вгКетагявяарЛ» кискта

Образование пировиноградной кислоты можно доказать реакцией с салициловым альдегидом (оранжевая окраска) . Для того чтобы задержать процесс на стадии образования пировиноградной кислоты и предотвратить ее восстановление в молочную, к реакционной смеси добавляют монобромуксусную кислоту.

Реактивы: а) L-аланин, 0,1 М раствор, приготовленный на 0,1 М растворе двууглекислого натрия; б) а-кетоглютаровая кислота, 0,1 М раствор, приготовленный на 0,1 М растворе двууглекислого натрия. Раствор предварительно нейтрализуют 2% ним раствором двууглекислого натрия или 0,2 М раст

страница 49
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
бухгалтерские курсы для начинающитх в бишкеке
где назначают фолликулометрию
курсы декора одежды в москве
купить билет на представление

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(04.12.2016)