химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

ствоТабл. 6. Количество аминокислот (мг), необходимое для приготовления 1 мл 0,01 М раствора

Алании 0,89 Лизни 0,82

Аспярягиновяи кис- Мстионкн 0,50

лота 1,33

Аргинин 2,10 Серии 1,05

Вали п 1,17 Тирозин (0,005 М) 0,90

Гистидин 2,20 Треонин 1,20

Глиции 0,75 Триптофан 2,04

Глюмминовая кис- 1,47 Цистин 2,40

лота

Фенила ла инн 1.65

Лейцин 1,31 Прелин 1,15

145 ров заведомо известных аминокислот («свидетелей» или «метчиков»). С этой целью готовят 0,01 М растворы аминокислот (раствор тирозина — 0,005 М). В табл. 6 указаны навески аминокислот (в миллиграммах на 1 мл воды), необходимые для приготовления растворов.

На пластинку наносят каплю раствора одной из аминокислот и хроматографируют так же, как и испытуемый раствор. После проявления хроыатограммы находят R/ аминокислоты. Так поступают и с растворами других аминокислот, получая 13—14 пластинок, на каждой из которых имеется пятно одной определенной аминокислоты.

На листе кальки вычерчивают квадрат со стороной 6 см. Квадрат накладывают на пластинки с пятнами аминокислот и на кальке отмечают расположение их пятен. Таким образом получают эталон, который накладывают на хроматограмму испытуемого раствора, определяя его аминокислотный состав.

Существует и другой вариант: на пластинку с сили-кагелем наносят смесь растворов перечисленных аминокислот. Расположение пятен аминокислот на хроматограмме переносят на кальку, которая служит эталоном для расшифровки хроматограммы вытяжки из мышечной ткани (рис. 10).

ГИДРОЛИТИЧЕСКОЕ РАСЩЕПЛЕНИЕ БЕЛКА ФЕРМЕНТАМИ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Пептоны, образовавшиеся при переваривании белков в желудке, а также белки, поступившие в двенадцатиперстную кишку в непереваренном виде, подвергаются воздействию протеолнтических ферментов, выделяющихся главным образом поджелудочной железой и частично клетками слизистой оболочки тонкого кишечника.

146

В соке поджелудочной железы содержатся трипсин, химотрипсин и карбокенпептидаза.

Трипсин — один из важнейших протеолнтических ферментов. Он выделяется в виде неактивного профермента трипсиногена. Под влиянием фермента энтерокиназы, содержащегося в кишечном соке, трипсиноген превращается в активную форму — трипсин. Трипсин катализирует гидролитическое расщепление не только полипептидов, образовавшихся при распаде белков в желудке, но и тех белков, которые поступили в кишечник в непереваренном виде. Оптимум действия трипсина лежит при рН 7,8. Под влиянием трипсина происходит гидролитический распад пептидных связей с образованием низкомолекулярных полипептидов со значительно меньшей величиной молекулы, чем у исходных веществ, а также небольшого количества свободных аминокислот.

Химотрипсиноген тоже выделяется в неактивном виде и активируется трипсином. Химотрипсин, как и трипсин, катализирует процесс гидролиза пептидных связей полипептидов и белков. Трипсин с наибольшей скоростью расщепляет пептидные связи, образованные карбоксильными группами лизина и аргинина, тогда как химотрипсин действует главным образом на пептидные связи, в образовании которых участвуют карбоксильные группы метионина, фенилаланина, тирозина и триптофана.

Дальнейшее расщепление полипептидов происходит под действием пептидаз — карбоксипептидазы, амино-пептидаэы и дипептидаз. Карбокенпептидаза катализирует процесс гидролиза полипептида со стороны свободной карбоксильной группы. Лминопеитидаза и дипепти-дазы содержатся в соке тонких кишок. Лминопентидаза катализирует гидролитическое расщепление полипептида со стороны свободной аминогруппы. Дипептиды, образовавшиеся в результате действия перечисленных ферментов, расщепляются (при участии дипептидаз) на свободные аминокислоты. Таким образом, конечными продуктами гидролитического расщепления белков в желудочно-кишечном тракте являются аминокислоты, которые и усваиваются организмом.

Определив содержание азота а-аминокислот в белке до его контакта с ферментом и затем через некоторое время, в процессе расщепления, можно установить интенсивность процесса гидролиза.

Н7

Содержание азота аминокислот (аминного азота) определяют с помощью метода, основанного на том, что а-аминокислоты и пептиды образуют внутрнкомилексные

соединения с ионами двухвалентной меди. Указанные соединения реагируют с йодистым калием в кислой среде, при этом выделяется иод, который оттитровывяют серноватистокислым натрием (гипосульфитом, тиосульфатом).

Реакции протекают по следующим уравнениям:

— .. -rHli—Oh , „{f

2 У Си I -*Ш*>2Си1* * +

4+2sc,s,o}=mai + nais,os

1 мл 0,01 н раствора гипосульфита соответствует 0,28 мг

азота аминокислот.

Реактивы: а) желатин, 1%-ный раствор; б) панкреатин (препарат поджелудочной железы): 2 г препарата растворяют в 20 мл 1%-ного раствора двууглекислого натрия (гидрокарбоната натрия). Раствор фильтруют; в) хлорная медь: 27,3 г соли растворяют в мерной колбе на 1 л и доводят водой до метки; г) натрий фосфорнокислый трехзамещенный (Ка3Р04- 12П20) : 08,5 г соли растворяют в мерной колбе на 1 л и доводят водой до метки. Раствор мож

страница 47
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить 51 ромашку
Рекомендуем фирму Ренесанс - деревянная лестница заказать - качественно и быстро!
кресло ch 661
хранение вещей вна шереметьевской

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(11.12.2016)