химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

труют в пробирки.

Оптическую плотность фильтрата каждой пробы исследуют на фотоэлектроколориметре ФЭК-М, ФЭК-56 или ФЭК-Н-57. В качестве стандартного раствора употребляют лимоннокислый раствор красителя оранж Ж, разведенный дистиллированной водой в сочетании 25 : 20.

Пользуются правой шкалой прибора. Светофильтр синий с областью максимального пропускания 453 нм. Рабочая длина кювет 1,070 или 1,065 мм. Процентное содержание белка в молоке у рассчитывают по формуле

«/=2,4542 +3,6049 х,

где х—показатель" шкалы оптической плотности прибора.

Заранее составляют калибровочную кривую, градуируя шкалу оптической плотности фотоэлектроколориметра в процентах белка, для чего проводят не менее 50—60 параллельных анализов проб молока по колориметрическому методу (или методу Къельдаля) и по адсорбции красителя. Калибровочную кривую составляет обычно лаборант для каждого прибора (в начале учебного года).

ОПРЕДЕЛЕНИЕ АЗОТА АМИНОКИСЛОТ

Основные понятия. При количественном определении азота аминокислот применяют различные методы (газометрические, например по Ван-Слайку или Д. А. Цувер140 калошу, титриметрические, колориметрические, фотометрические). Благодаря своей простоте и вполне удовлетворительной точности наибольшее распространение получили метод формального титрования и различные варианты медного способа — по Попе и Стивенсу, Вой-вуду и др.

Определение азота аминокислот методом формольного титрования. Амипные группы аминокислот вступают в реакцию с формальдегидом с образованием метилено-вых соединений (метиленамшгокислот)

r-c-cooh+h-с^ - ->- к-с-соан-м

Метилснаминокислоты обладают более сильными кислотными свойствами, чем аминокислоты, и легко от-титровываются щелочью

R-C-CGQIi+haOH - —ft — C-CDDNa +Щ0

I I

§=?14г И=СНг

По количеству раствора щелочи (мл), израсходованному на титрование, можно рассчитать содержание азота аминогрупп. При этом принимают, что количество карбоксильных групп, оттитрованных щелочью, эквивалентно количеству аминогрупп, прореагировавших с формальдегидом. Это справедливо лишь для моноамино-монокарбоновых аминокислот. Диаминомонокарбоновая кислота аргинин не реагирует с формальдегидом, поэтому не участвует в реакции. При титровании тирозина взаимодействуют со щелочью не только карбоксильная, но и фенольпая группа.

Достоинствами метода формольного титрования являются быстрота и удобство определения. Это -- основная причина его широкого распространения в практике, несмотря на относительно невысокую точность.

Реактивы: а) глицин, 0,02 М раствор; б) формалин, 40%-ный; в) этиловый спирт, 95 -96%-ный; г) ти-молфталеин: 0,05 г индикатора растворяют в 100 мл

141

96%-него этилового спирта; д) метиловый красный; 0,2 г индикатора растворяют в 100 мл 60%-ного этилового

спирта; е) фенолфталеин: 0,5 г фенолфталеина растворяют в 100 мл 90%-ного этилового спирта; ж) едкий натр, растворы 0,2 н и 0,05 н концентрации.

В стаканчик или коническую колбу наливают 20 мл раствора глицина. В другой такой же сосуд вливают 20 мл воды, заранее прокипяченной (для освобождения от С02) и охлажденной, которая служит контролем.

В оба сосуда добавляют по 3 капли индикатора метилового красного и титруют 0,05 н раствором едкого натра до появления отчетливого желтого окрашивания. После этого в сосуды доливают по 10 мл формальной смеси.

Для приготовления формальной смеси к 50 мл 40% ного формалина добавляют 2 мл 0,5%-ного раствора фенолфталеина и оттитровывают 0,2 н раствором едкого натра до слаборозового окрашивания (обычно расходуют не больше 5 капель раствора щелочи).

После добавления формолыюй смеси опытную и контрольную пробы титруют 0,2 н раствором едкого натра до появления интенсивной красной окраски (рН 9,1). Сначала титруют одну из проб, затем вторую дотитровы-вают до той же окраски.

При расчетах содержания аминного азота х (мг) в 20 мл испытуемого раствора принимают по внимание, что 1 мл 0,2 н раствора NaOH соответствует 2,8 мг азота:

х (Л-И) ?2,8,

где Л — количество 0,2 и раствора едкого натра, израсходованное на титрование опытного образца, мл; В — количество 0,2 н раствора едкого натра, израсходованное на титрование контрольного образца, мл; k —? поправочный коэффициент 0,2 н раствора едкого натра.

Полученный результат пересчитывают затем на 100 г исследуемого вещества.

При формальном титровании вместо индикатора фенолфталеина часто рекомендуют пользоваться раствором тимолфталеина, у которого синее окрашивание проявляется, если рН равно 9,5—9,7, Доказано, что при применении фенолфталеина титрование идет не совсем до конца, при добавлении же тимолфталеина карбоксильные группы аминокислот оттитровываются более полно.

142

С тимолфталеином анализ проводят так же, как и при добавлении фенолфталеина, но фор мольную смесь готовят несколько иначе: к 50 мл 40%-ного формалина приливают 25 мл 95—96%-ного этилового спирта, 5 мл раствора тимолфталеина и добавляют (по каплям) 0,2 н раствор едкого натра до появления зеленоватого или зеленовато-голубого окрашивания. Опытный и к

страница 45
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
посев из уретры с а/б и фагочувствительностью
флр 7600х350мм веза цена
новая рига поселки
http://taxiru.ru/catalog/

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(13.12.2017)