химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

выпадает в осадок. Значение изоэлектрической точки характерно для каждого белка и зависит от аминокислотного состава. Таким образом, меняя концентрацию водородных ионов, можно изменить заряд белковых частиц.

Белки отличаются различной растворимостью.

При растворении белков в воде происходит гидратация их молекул. Вокруг каждой из них образуется водная оболочка (гидросфера). Наличие оболочек, состоящих из ориентированных в пространстве молекул воды, является наряду с зарядом белковых частиц фактором устойчивости белковых растворов. Под действием факторов, уменьшающих гидратацию белковых частиц (например, водоотнимающих средств) и нейтрализующих их заряд, растворимость белков понижается и они могут выпасть в осадок.

Качественные реакции на аминокислоты, пептиды и белки можно разделить на две группы: а) цветные реакции, обусловленные аминокислотами и пептидами; б) реакции осаждения, в основе которых лежат изменения физико-химических свойств белковых молекул.

Приготовление растворов белка

Раствор яичного белка для цветных реакций и реакций осаждения. Белок одного куриного яйца отделяют от желтка, растворяют в 15—20-кратном объеме дистиллированной воды. Раствор фильтруют через марлю, сложенную в 3—4 слоя. Хранят в холодильнике.

Раствор яичного белка для реакций высаливания и диализа. Белки трех куриных яиц отделяют от желтков и растворяют в 700 мл дистиллированной воды, к которой прибавляют 300 мл насыщенного раствора хлористого натрия. Раствор фильтруют через марлю, сложенную в 3—4 слоя. Хранят в холодильнике.

Раствор молочных альбуминов. К 200 мл снятого молока добавляют равный объем насыщенного раствора сернокислого аммония, перемешивают и оставляют на 10— 15 мин., после чего фильтруют через складчатый бумажный фильтр. В растворе — альбумины, в осадке — глобулины и казеин.

Раствор растительных белков. К 40 г пшеничной муки прибавляют 160 мл дистиллированной воды, перемешивают и колбу переносят в холодильник (1—2° С) на сутки, затем снова перемешивают и фильтруют вначале через гигроскопическую вату, а потом через складчатый бумажный фильтр. Раствор содержит главным образом альбумины. Хранят в холодильнике.

Цветные реакции

Биуретовая реакция (реакция Пиотровского). В щелочной среде белки, а также продукты их гидролиза — полипептиды дают фиолетовое или красно-фиолетовое окрашивание с солями меди. Реакция обусловлена наличием пептидных связей. Положительная биуретовая реакция проявляется у соединений, содержащих не менее двух пептидных групп. Интенсивность окраски зависит от длины пептида и варьирует от сине-фиолетовой до красно-фиолетовой и красной.

Биуретовую реакцию дают также аспарапш (амид аспарагиновой кислоты) н аминокислоты гистидин, треонин и серии.

fk Щ

Свое название реакция получила от биурста — соединения, которое образуется при нагревании мочевины. Эта реакция сопровождается отщеплением молекулы аммиака

fff/ц I

с-о

? Щ+ NH

Щ Биурет

Комплексной медно-натриевой соли пептидов и белков приписывают следующее строение:

% о 1 II

..~Ntf~CH-C=N~CH~C4t~CH-C2На+

к 'г- \/ А!" f « A f !

ОН

~С=А~СИ Еимшая форт петиШ Фм

. -НН-СН-C~H-Oi-C-N~Ctt-С-...

/?-/. R,. Я,, —остатки ашттт

Реактивы: а) раствор яичного белка (без добавления хлористого натрия); б) раствор растительного белка (приготовление — см. с. 6); в) едкий натр, 10%-ный раствор; г) сернокислая медь, 1%-ный раствор.

В одну пробирку наливают 2 мл раствора яичного белка, в другую — столько же растительного, затем в каждую из них прибавляют равный объем раствора едкого иатра и по 1—2 капли раствора сернокислой меди. Появляется красно-фиолетовое или синс-фнапстовос окрашивание.

Нингмдрииовая реакция. Нингидриновая реакция обу словлена наличием аминокислот, имеющих аминогруппы в а-положении. Белки, полипептиды и аминокислоты образуют с иингидрином соединение синего или сине-фиолетового цвета (при нагревании). Нингидриновая реакция является одной из наиболее чувствительных для обнаружения а-аминогрупп.

,0И -он

С*

\

II

О

Сущность реакции заключается в том, что а-амиио-кислоты и пептиды, реагируя с иингидрином, подвергаются окислительному дезаминированию и декарбоксили-рованию:саг+щ+с +

я

н с «н2\

cm си-анинвкиаюта

II

о

Восстановленный нингндрин взаимодействует с аммиаком и второй молекулой иингидрнна, в результате чего образуется окрашенное соединение (пурпурный Руэ-манна)

5 I

О О

Реактивы: а) раствор белка (без хлористого натрия). Приготовление — см. с. 6; б) глицин. 0,1%-ный

водный раствор; в) нингидрин, 0,1%,-ный спиртовой раствор, i

В одну пробирку наливают 1—2 мл раствора глицина, в другую — столько же раствора белка. В обе пробирки добавляют раствор нингндрика (в первую 5- -6 капель, во вторую — 10 - 12), нагревают около минуты. В пробирке с глицином быстро появляется фиолетово-синее или фиолетовое окрашивание, в пробирке с белком окрашивание развивается медленно и имеет красновато-фиолетовый оттенок (или даже желтовато-фиолетовый в случае наличия иминок

страница 2
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
пионовидная роза букет купить
Рекомендуем фирму Ренесанс - лестницы модульные на второй этаж - оперативно, надежно и доступно!
кресло 9950
склады для индивидуального хранения

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(10.12.2016)