химический каталог




Практикум по биологической химии

Автор Д.К.Шапиро

нокислот применяют специальную хроматографическую фильтровальную бумагу высокого качества (она должна быть строго равномерной по толщине и одинаковой по плотности, характеризоваться незначительным содержанием примесей), например ленинградскую № 1 или 2 и импортную ватман Ш 1,2, 3, а также FN-И (ГДР),

Рsактивы: а) раствор смеси аминокислот: в 10 мл воды растворяют 60 мг аснарагииовой (или глютамино-вой) кислоты, 40 мг глицина (или аланина) и 50 мг лей28

29

цина; б) фенол, насыщенный водой: к 100 г перегнанного фенола добавляют 35 мл воды и перемешивают, для ускорения растворения фенола смесь можно слегка подогреть; в) смесь н-бутанола, ледяной уксусной кислоты и воды (4:1:1 по объему): реактивы смешивают в указанном соотношении. Для того чтобы смесь не расслаивалась, рекомендуется дополнительно прибавить несколько капель уксусной кислоты; г) нингидрин, 0,2%-ный рас-твор в этиловом или бутиловом спирте.

Оборудование: а) термостат, отрегулированный на температуру 37—38° С; б) сушильный шкаф, отрегулированный на 100—105° С; в) пробирки стеклянные большого размера (длина 18—20 см, диаметр 2—2,5 см) с подобранными пробками; г) линейка с делениями на миллиметры; д) микропипетки; е) пульверизатор; Правка Нитка Пропет Фронт растВеритеяя (Феном) полоска gynaeu

ж) ножницы; з) игла с ниткой; и) штатив для пробирок.

Материалы: Бумага фильтровальная хорошего качества (лучше пользоваться специальной хрома гографнче-ской бумагой).

Фенол

Рис, 2. Упрощенный прь бор для распределительной хроматографии аминокислот.

Вырезают полоску фильтровальной бумаги шириной 1,2 см, длиной 12—15 см (рис. 2). Один из концов полоски прокалывают иглой, протя-ивгтонатсеная гивая НИТКУ- которую завязы-' тстВара, вчерчен- вяют петлей. На противогю-иое карандашом ложном конце полоски, отступив на 1—1,5 см от ее края, графитовым карандашом очерчивают небольшой кружок (диаметром 3—5 мм), в который с помощью мнкропипетки вносят каплю .раствора смеси аминокислот. Место нанесения раствора подсушивают на воздухе.

В сухую пробирку наливают около 1 мл насыщенного водой фенола или смеси к-бутанола, уксусной кислоты и воды, следя, чтобы при этом не смочить стенки. В пробирку осторожно (за нитку) опускают полоску бумаги, погружая ее нижний конец в растворитель на 2—3 мм (не более!), и закрепляют в висячем положении с ио30

прокол

лейцин

мамин

мощью нитки и пробки. Полоска не должна касаться стенок пробирки. Пробирку ставят в термостат (при температуре 37- 38°) на 1,5 ч, затем вынимают полоску и переносят ее на 10—12 мнн. в сушильный шкаф, нагретый до 100—105°. В сушильном шкафу полоску подвешивают за нитяную петлю на стеклянную палочку. После испарения растворителя полоску вынимают из шкафа, опрыскивают раствором нингидрина (с помощью пульверизатора) и снова вносят в тот же сушильный шкаф на несколько минут. На хроматограмме появляются окрашенные пятна аминокислот (рис. 3). Линейкой измеряют расстояния:

Глютшшаеая

А и с/гота !— место нанесения раствора .

а) от места нанесения капли

раствора смеси аминокислот до

середины данной кислоты;

б) от места нанесения капли

раствора аминокислот до фронта растворителя. Рассчитывают К/ каждой аминокислоты.

Рис 3. Хрсматограмма аминокислот.

Распределительная круговая хроматография аминокислот. При круговой хроматографии вместо пятен аминокислот на бумаге получают концентрически расположенные кольца. В принципе метод остаегся таким же, как и в предыдущей работе. Хрома-тографирование проводят в эксикаторах небольшого размера.

Реактивы: см. «Распределительная хроматография аминокислот на бумаге».

Оборудование: а) эксикатор малого размера с хорошо притертой крышкой; б) термостат (37—Ж С);

в) сушильный шкаф (100—105" С).

Из хорошей фильтровальной бумаги (лучше — специальной хроматографической) вырезают круг соответствующего диаметра (на 2—3 см больше диаметра узкой части эксикатора). Для того чтобы поступал растворитель, из круга вырезают «фитиль» — полоску, шириной 2- -3 мм (рис. 4),

31

На расстоянии 0,5—0,6 см от центра круга наносят каплю раствора смеси аминокислот и высушивают на воздухе.

Растворитель наливают в стеклянный стаканчик или

фарфоровую чашечку или же прямо на дно эксикатора.

Бумажный круг кладут на выступ над узкой частью эксикатора. «Фитиль» отгибают и опускают в раствориРнс. 4. Распределительная круговая хроматограмма

аминокислот: / — бумажный фильтр; 2 ~- фитиль; 3 — растворитель.

тель. Эксикатор плотно закрывают и ставят в термостат (37—38° С) на 1,5—2 ч, после чего с хроматограммой проделывают все те же операции, что и при хроматогра-фированип на полосках бумаги.

Разделение белка и низкомолекулярных примесей методом гельфильтрацин на сефадексе G 25 (по* С. Р. Мардашеяу, А. А. Покровскому, Н. А. Павловой, с дополнениями)

Общие сведения. Метод гельфильтрацин (гельхрома-тографии) широко используется в биохимии и биохимической технологии для фракционирования и очистки высокомолекулярных веществ, концентрир

страница 10
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86

Скачать книгу "Практикум по биологической химии" (2.2Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
где можно снять помещение для хранение вещей
Круглый обеденный стол малый Kitai ST9152SN
daikin ftxg50j / rxg50k
zwilling кастрюли цены

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(26.02.2017)