химический каталог




Практикум по биохимии

Автор С.Е.Северин, Г.А.Соловьева

ить оптическую плотность проб стандартного ряда, построить калибровочный график; 4) определить оптическую плотность исследуемых проб, произвести расчет концентрации анализируемого вещества.

Цветную реакцию обычно исследуют в максимуме поглощения. Если спектральные характеристики окрашенного вещества неизвестны и указания в методике отсутствуют, светофильтр для работы можно выбрать самостоятельно. В видимой части спектра воспринимаемый цвет есть результат избирательного поглощения определенного участка спектра белого света. Цвет раствора является дополнительным к цвету поглощенного излучения. Поэтому измерение поглощения следует проводить в дополнительной для цветной реакции области спектра. Так, если раствор окрашен в сине-зеленый цвет, то нужно измерять поглощение этим раствором красного цвета (табл. 1).

Таблица 1*

Наблюдаемые ивета и соответствующие им поглощенные участки спектра

Интервал длин волн поглощенного излучения, нм Цвет поглощенного излучения Наблюдаемый цвет

400—450 450—480 400—550 500—560 400—610 450—650 625—750 фиолетовый синий

сине-зеленый зеленый

сине-зелено-желтый

зелено-желто-красный

красный желто-зеленый

желтый

оранжевый

красно-пурпурный

красный

пурпурный

сине-зеленый

Для более точного выбора светофильтра окрашенный раствор наливают в кювету и определяют величину его оптической плотности на ФЭКе со всеми имеющимися светофильтрами. По полученным данным строят график, откладывая по оси абсцисс длины волн максимумов пропускания светофильтров, а по оси ординат — соответствующие

значения А раствора. Отмечают участок графика, приблизительно параллельный горизонтальной оси и характеризующийся значительной

величиной оптической плотности. Максимум пропускания выбранного

для работы светофильтра должен соответствовать отмеченному участку на графике. *

Приступая к работе, необходимо из набора, который прилагается к каждому ФЭКу, выбрать кюветы оптимального размера. Так как согласно уравнению Л=е С/, оптическая плотность зависит от толщины поглощающего слоя, выбор кювет должен быть сделан с таким расчетом, чтобы значения оптических плотностей для проб стандартного ряда укладывались в интервале 0,1—1,0. Для получения точных результатов лучше работать в более узком интервале: от 0,1 до 0,6 единиц оптической плотности. Выбор кювет проводят следующим образом: определяют оптическую плотность одной пробы стандартного ряда со средним содержанием анализируемого вещества, пользуясь кюветами с расстоянием между рабочими гранями, равным 1 см. Если значение оптической плотности составляет приблизительно 0,3—0,35, то данную кювету используют для работы, если больше или меньше этого интервала, берут кювету меньшего или большего размера. Остальные требования к кюветам такие же, как при спектрофотомет-рическом анализе.

Результаты колориметрирования проб стандартного ряда оформляют в виде графика зависимости интенсивности окраски от количества анализируемого вещества. По оси ординат откладывают значения оптической плотности по показанию ФЭКа, а по оси абсцисс — содержание вещества в соответствующей пробе. Калибровочный график должен иметь вид прямой, выходящей из начала координат. Экстраполировать полученную прямую к значениям оптических плотностей, лежащим выше последней экспериментально полученной точки, не следует. Обычно для получения калибровочного графика достаточно пяти проб стандартного ряда, чтобы получить пять равномерно расположенных точек в интервале чувствительности конкретного метода. При воспроизведении графика можно воспользоваться несколькими пробами с количествами вещества, близкими к среднему.

Следует заметить, что калибровочные графики, построенные с реактивами разных партий, как правило, не совпадают. Поэтому при смене реактивов график необходимо построить заново. График, полученный при работе на одном ФЭКе, недопустимо использовать для расчета результатов колориметрирования, проведенного на другом приборе. Особенности приборов, главным образом различия в моно-хроматизации света, влияют на чувствительность фотометрических определений. При монохроматическом излучении тангенс угла наклона зависимости A=f{C) имеет большую величину, чем тогда, когда поток света состоит из нескольких излучений различных длин волн, из которых только часть поглощается исследуемым раствором.

После измерения оптической плотности в опытных пробах проводят расчеты, пользуясь калибровочным графиком. Если оптическая плотность пробы выходит за его пределы, необходимо заново приготовить раствор с таким количеством вещества, чтобы попасть на калибровочную прямую. Разбавлять реакционную смесь перед колориметри-рованием не следует: это может привести к неверным результатам. По графику определяют содержание анализируемого вещества и, учитывая объем исследуемого раствора, рассчитывают его количество в 1 мл сначала для каждой пробы, а затем находят среднее значение.

2. МАНОМШРИЧЬСКИИ МЫОД ЬАРЬУР!А

Манометрический метод, разработанный О. Варбургом в 20-х годах для определения дыхания п

страница 4
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258

Скачать книгу "Практикум по биохимии" (5.12Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
матрас 60/160 детский воткинск
светильник профиль для светодиодной ленты
Фирма Ренессанс деревянная лестница на второй этаж цена - всегда надежно, оперативно и качественно!
сетка тканая купить в розницу

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(25.04.2017)