химический каталог




Практикум по биохимии

Автор С.Е.Северин, Г.А.Соловьева

мл 0,1 н. НС1, добавляют 10%-ный раствор Na2S04, проверяют полноту осаждения и осадок сернокислого бария удаляют центрифугированием. Предварительно рассчитывают примерное количество Na2S04, которое необходимо для удаления Ва2+ во взятой навеске. Центрифугат сливают в мерную пробирку. Осадок 3 раза промывают небольшим количеством воды (1,0—1,5 мл) с добавлением 1 капли 10%-ного раствора Na2S04. Объединенный центрифугат нейтрализуют и доводят водой до нужного объема.

14. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФРУКТОЗО-6-ФОСФАТА

Определение фруктозо-6-фосфата может быть проведено по фосфату после гидролиза при 100°С в течение 70 мин в 1 н. растворе НС1 или после гидролиза в течение 10 мин в 0,2 н. растворе NaOH (с. 496). Определение фруктозо-6-фосфата может быть проведено также по фруктозе.

Определение фруктозо-6-фосфата по фруктозе проводят совершенно так же, как И определение фруктозодифосфата (с. 41), но для расчета его количества величину фруктозы, найденную по калибровочному графику, умножают на коэффициент 1,65, если в качестве стандарта была использована фруктоза (1,65=100:60,5). Если в качестве стандарта используют раствор фруктозо-6-фосфата, то при расчете коэффициент не вводят.

15. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЩЕГО ФОСФОРА

Общим фосфором (Фобщ) называют весь фосфор, содержащийся в данной пробе, т. е. сумму неорганического фосфата (Фн) И фосфора, входящего в состав органических соединений (Ф0Рг). Для определения Фобщ исследуемый раствор или ткань сжигают (минерализуют), нагревая с концентрированной H2S04 в присутствии различных окислителей (Н202, КМп04). Наиболее широко используют пергидроль (30%-ный раствор перекиси водорода). Н202 при нагревании легко разлагается и не мешает колориметрическому определению фосфата.

Реактивы:

1. H2S04 — концентрированная.

2. NaOH — 0,5 н. и 5 н. растворы.

3. Реактивы для определения фосфора (с. 34).

4. Пергидроль.

5. Фенолфталеин — 0,5%-ный спиртовой раствор.

Минерализация. Количество взятого на минерализацию раствора зависит от содержания в анализируемом фосфорсодержащем органическом соединении фосфата и от чувствительности используемого для определения фосфата метода. При определении неорганического фосфата методом Фиске—Суббароу на минерализацию берут такое количество исследуемого раствора, чтобы в 1 мл полученного после минерализации И нейтрализации раствора содержалось от 0,2 до 1,0 мкмоль фосфата. 1—2 мл взятого на анализ раствора помещают в небольшую колбу для сжигания (колбу Кьельдаля) или жаростойкую пробирку, добавляют 0,3 мл концентрированной серной кислоты и, укрепив колбу (пробирку) слегка наклонно, осторожно нагревают раствор на горелке, песчаной бане или на специальной электрической плитке до тех пор, пока почти полностью выпарится вода и раствор в колбе приобретет бурую окраску (если органического вещества в пробе мало, то по-бурения можно И не заметить). После этого колбу (пробирку) охлажРыдают, добавляют 2—3 капли пергидроля и раствор снова нагревают в течение 5—10 мин. Если раствор при этом побуреет, добавляют новую

s порцию пергидроля. При добавлении пергидроля следят за тем, чтобы он попал в раствор, а не на стенки колбы или пробирки. Нагрев при минерализации не должен быть слишком сильным, нельзя допускать, чтобы тяжелые белые пары H2SO4 и окиси серы выходили из колбы, так как вместе с ними может частично увлекаться фосфат. Рекомендуется проводить минерализацию в колбах, прикрытых стеклянными втулками или маленькими воронками, которые вставляют, когда вода почти испарится. Одновременно с анализируемыми пробами минерализацию проводят в контрольной «слепой» пробе, содержащей вместо исследуемого раствора воду. Необходимость контроля обусловлена тем, что используемые при минерализации реактивы могут содержать следы фосфорной, а также кремневой кислоты, присутствие которых может завысить результаты при определении общего фосфора. При расчете содержания фосфата в исследуемом образце учитывают величину оптической плотности «слепой» пробы. Если значение оптической плотности велико, реактивы следует сменить.

Определение фосфора. По окончании минерализации содержимое колбы количественно переносят в мерную колбу на 25 мл или в мер' ную пробирку на 10 мл, добавляя небольшими порциями воду и тщательно ополаскивая колбу Кьельдаля. Первую порцию воды в колбу Кьельдаля следует добавить очень осторожно, так как при этом происходит сильное разогревание раствора и создаются условия для гидролиза пирофосфата, который может образоваться в процессе минерализации при длительном нагревании фосфата с концентрированной серной кислотой. В мерную колбу или пробирку, заполненную приблизительно наполовину разбавленным минерализатом, добавляют tl—2 капли фенолфталеина и нейтрализуют кислоту сначала 5 н., а затем 0,5 н. раствором щелочи до слаборозовой окраски, доводят водой до метки и перемешивают. Из каждой колбы (пробирки) отбирают по две параллельные пробы и проводят определение неорганического фосфата (с. 33). При содержании в образце небольших количеств фосфата (до 0,1 мкмоль на про

страница 22
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258

Скачать книгу "Практикум по биохимии" (5.12Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
электросамокат city 500
наклейки ведется видеонаблюдение купить в самаре
гормональная спираль мирена цена
письмо о помощи на лечение

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(24.07.2017)