химический каталог




Практикум по биохимии

Автор С.Е.Северин, Г.А.Соловьева

ение коэффициента кооперативности (q) методом Силоновой—Курганова (см. п. 2).

5. Исследуют возможность влияния цитрат-иона на активность фруктозодифосфатазы.

а. Активирующее влияние цитрата в отсутствие ионов Mg2* (концентрация цитрата натрия — 1—10 мМ).

(1)

(2) (3)

б. Действие цитрат-иона на активность фермента в составе Mg-цитратного комплекса. Подобного рода исследования требуют точного знания концентраций как Mg-цитратного комплекса, так и свободного Mg2+, обладающего самостоятельным активирующим действием на фермент. Расчет соответствующих концентраций возможен с помощью системы уравнений:

№tU = №IU + [Mg-цитрат];

[цитратобщ] — [ цитра-Тсвоб] + [Mg-цитрат];

?

1месвобНцИТРатсВоб1 =fr =б-1(Г4М

[Mg-цитрат] d

Возможность самостоятельного активирующего действия Mg-цитратного комплекса дополнительно к максимальному действию Mg2+ проверяется в эксперименте, где в среде постоянно поддерживается концентрация свободного Mg2+ 3—7 мМ. Необходимые концентрации Mg-цитратного комплекса создаются внесением в среду соответствующих количеств MgCl2 и цитрата натрия. Постановка эксперимента предполагает следующую последовательность действий: учитывая оптимальную концентрацию свободного Mg2+ и желаемую концентрацию Mg-цитратного комплекса, с помощью уравнения (1) рассчитывают необходимую концентрацию Mg2+06ui> вносимого в виде MgCl2. Затем с помощью уравнения (3) рассчитывают концентрацию цитратаСБоб, после чего с помощью уравнения (2) рассчитывают концентрацию цит-рата0бЩ, вносимого в виде цитрата натрия. Пример расчета: пусть концентрация Mg2+CBo6 составляет 7 "мМ, желаемая концентрация Mg-цитрата — 1 мМ. Тогда вносимая концентрация MgCl2 (Mg2+06ut) составляет 8 мМ. При этом концентрациях цитратаСВОб, рассчитанная из уравнения (3), составляет 0,09 мМ. Следовательно, концентрация вносимого цитрата натрия (цитратСВОб) составляет 1,09 мМ.

С помощью аналогичных расчетов подбирают условия для создания в среде концентраций Mg-цитрата в диапазоне 0,1—3 мМ.

Возможность активирующего действия цитрата магния на активность фермента в условиях частичного проявления активирующего влияния Mg2+ проверяют в эксперименте, где постоянно поддерживается концентрация Mg2+ при которой активность фермента проявляется не более чем на 40%. На фоне этой концентрации Mg2+CBo6 путем внесения в среду соответствующих количеств цитрата натрия и Mg2+, а также MgCl2 создаются условия для образования Mg-цитратного комплекса в диапазоне концентраций 0,1—1 мМ.

Обсуждается возможность взаимозаменяемости Mg2-*- и Mg-цитратного комплекса как активирующих эффекторов фруктозо-1,6-дифосфа-тазы.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ньюсхолм Э., Старт К. Регуляция метаболизма. М., 1977.

2. Курганов Б. И. Аллостерические ферменты. М., 1978.

3. News holme Е. A. et al. The role of substrate cycles in metabolic regulation// //Biochem. Soc. Transact. 1983. Vol. 11, N 1. P. 52.

4. Po gel I В M. Regulation of fructose 1,6-diphosphatase (EDPase) and gluconeoge-nesis in rabbit liver and chick embrio cells//Mechanism of action and regulation of enzymes/Ed. T. Keleti. Budapest, 1975. Vol. 32. P. 237.

5 Datta A. J. et al The activation of rabbit liver, muscle and kidney fructose-bi-sphosphatases by histidine and citrate//Arch. Biochem. Biophys. 1974. Vol. 165, N 2. P. 641.

6. Та shim a I. et al. Control rabbit liver fruct6se 1,6-diphosphatase activity by magnesium ions//J. Biochem. ]975. Vol. 78, N 6. P. 1161.

7. Nells on K. et al. The effect of fructose 2,6-bisphosphate and AMP on the activity of phosphorylated and unphosphorylated fructose 1,6-bisphosphatase from rat li-ver//FEBS Lett. 1984. Vol. 167, N 2. P. 203.

II. РЕГУЛЯЦИЯ АКТИВНОСТИ MEM БРА HO СВЯЗАННЫХ ФЕРМЕНТОВ

1. ИССЛЕДОВАНИЕ РЕГУЛЯТОРНЫХ СВОЙСТВ Са АТФазы САРКОПЛАЗМАТИЧЕСКОГО РЕТИКУЛУМА

Мембранные ферменты привлекают в настоящее время пристальное внимание, так как многие клеточные процессы протекают при их непосредственном участии.

Особое место среди них занимают ионные насосы (транспортные АТФазы) — белки, способные за счет энергии гидролиза АТФ переносить одно- и двухвалентные катионы (или анионы) через клеточные и внутриклеточные мембранные структуры против градиента концентрации. Так, Са-АТФаза саркоплазматического ретикулума (CP) регулирует процессы сокращения-расслабления в мышцах разных типов, аккумулируя Са2+ из цитоплазмы внутрь СР.

Мембранные ферменты отличаются от растворимых ферментов одним важным свойством: все они прочно связаны с липидным бислоем соответствующих мембран. Поэтому помимо субстратов, активаторов или ингибиторов их регуляторами являются сами мембранные липиды. Белок-липидные взаимодействия играют важную роль в регуляции активности мембранных ферментов, причем действие многих биологически активных соединений реализуется через изменение структурного состояния липидного бислоя.

Удобным объектом для изучения свойств мембранных ферментов является Са-АТФаза (КФ 3.6.1.38) CP скелетных мышц кролика, поскольку содержание этого белка в легкой фракции мембран ретик

страница 180
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258

Скачать книгу "Практикум по биохимии" (5.12Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
установка табличка навишация стоимость
Стол M-City EW F2181AC
Чайные сервизы Leander
кресло бюрократ ch-868axsn black купить

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(03.12.2016)