химический каталог




Практикум по биохимии

Автор С.Е.Северин, Г.А.Соловьева

Вначале она растет подобно предыдущей кривой, но в дальнейшем, пройдя через слабо выраженный максимум, начинает снижаться. Причиной подобного поведения кривой является то, что при титровании пробы, исходно содержащей ЛДГ и аурамин О, добавками НАД происходит разведение системы. Его результатом является некоторая диссоциация комплекса ЛДГ — аурамин О.

В начальной стадии титрования процесс образования тройного комплекса субъединиц белка с аурамином О и НАД опережает диссоциацию аурамина О из комплекса из-за разведения при добавках НАД. В дальнейшем диссоциация аурамина О из комплекса с белком становится явной, что и приводит к описанному снижению концентрации этого типа субъединиц в области больших добавок НАД.

10 DIM E(4.2) '

20 REM E(l.l) =EA1 E(1.2)=EB1

30 INPUT «A.B.E.KA.KB»:A.B.E.K1.K2 100 L1=A\C1 = K1 105 For 1 = 1 TO 2 110 GOSUB 1000

120 E(1.I)=X1—X2\E(2.I)=X2=X3\E(3.I)=X3=X4\E(4.I)=X4

130 L1=B G1 = K2

140 NEXT I

150 Ol = 0\02=O

160 FOR J=l TO 4

170 01 =01 +E(J.2)f?J\02=02+E(J.l)*J/(4^E) 180 NEXT J

220 PRINT «EAB = »:01*02. «EB=»:01—01^02

1000 Xl = (E+Ll+0.25*Cl)/2

1005 X1=X1—SQR(Xl-2—E&Ll)

1010 Y1 = L1^C1

1020 X2 = 3^Yl*Xl/(2+3^Yl)

1030 X3=2^Yl^X2/(3+2^Yl)

1040 X4=YrЈ1050 RETURN

1060 END

Программа для расчета концентрации субъединиц, связавших одновременно два лиганда и связавших один лиганд. Программа составлена Громовым А. И. (кафедра химической энзимологии химического факультета МГУ).

Таким образом, рассчитанные кривые зависимости двух типов субъединиц от концентрации НАД имеют различный характер. С ними сравнивают экспериментально полученную кривую зависимости флуоресценции связанного аурамина О от концентрации добавленного НАД. В случае ее совпадения с ходом кривой, описывающей концентрацию субъединиц, одновременно занятых аурамином О и НАД, можно заключить, что конформационные изменения белка под действием НАД, отражающиеся на свойствах аураминсвязывающих областей молекулы, локализованы внутри одной субъединицы. При несовпадении экспериментальной кривой с зависимостью, полученной для этого типа субъединиц, ее сравнивают с поведением рассчитанной кривой для субъединиц, находящихся в комплексе только с НАД. Корреляци5 двух кривых в этом случае указывает на чувствительность аураминсвязывающих зон одной субъединицы к связыванию НАД в активном центре другой. Если между экспериментально полученной кривой и суммой обеих рассчитанных соответствие наилучшее, делают заключение о том, что состояние белкового окружения связанного аурамина О чувствительно как к связыванию кофермента в активном центре той же субъединицы, так и к состоянию активного центра субъединицы, свободной от аурамина О. Таким образом, два последних варианта указывают на передачу сигнала между активным центром одной субъединицы молекулы ЛДГ и катионсвязывающим участком другой.

ЛИТЕРАТУРА

1. Паркер С. Фотолюминесценция растворов. М., 1972.

2. Кантор Ч., Шиммел П. Взаимодействие макромолекул с лигандами в условиях равновесия//Биофизическая химия. М., 1985. Т. 3. С. 6.

3. Лакович Дж. Основы флуоресцентной спектроскопии. М., 1986.

4. Ivanov М. V., Kube D., Nagradova N. К. The use of auramine О to study ligand binding and subunit cooperatively of lactate dehydrogenase//Biochira. Bio-phys. Acta. 1984. Vol. 789. P. 216.

5. Ho lb rook J. J. Protein fluorescence of lactate dehydrogenase//Biochem. J. 1972. Vol. 128, N 3. P. 921.

5. ИССЛЕДОВАНИЕ ВНУТРИКЛЕТОЧНОЙ ЛОКАЛИЗАЦИИ ИЗОЗИМОВ АСПАРТАТАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ ПЕЧЕНИ

Аспартатаминотрансфераза (L-аспартат: 2-оксоглутарат-амино-трансфераза, КФ 2.6.1.1) катализирует обратимую в физиологических условиях реакцию трансаминирования между L-аспарагиновой и а-ке-тоглутаровой кислотами с образованием щавелевоуксусной и L-глута-миновой кислот:

а-аспартат+а-кетоглутарат^оксалоацетат-г-^-глутамат.

Фермент широко распространен в тканях млекопитающих и представлен двумя изозимами, пространственно разобщенными в клетке. Один изозим локализован в цитозоле, другой связан с митохондриаль-ной фракцией. Изозимы существенно различаются по аминокислотному составу, физико-химическим свойствам, зависимости активности от рН среды и, что особенно важно с физиологической точки зрения, по кинетическим свойствам. Различное сродство к субстратам реакции ставит изозимы фермента в разные условия в отношении доступности субстратов прямой и обратной реакций. Этим определяется бифункцио-нальность поведения аспартатаминотрансферазы в печени: реакция, катализируемая митохондриальным изозимом, может быть сдвинута от состояния равновесия в сторону образования а-кетоглутарата, и поэтому может быть связана с функционированием^цикла Кребса и цикла мочевины. Наоборот, цитоплазматический изозим способствует образованию щавелевоуксусной кислоты, т. е. связан с функционированием глюконеогенеза.

Целью работы является изучение рН-зависимости активности и кинетических свойств аспартатаминотрансферазы, локализованной в цитоплазме и митохондриях печени крыс

страница 176
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258

Скачать книгу "Практикум по биохимии" (5.12Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
rjvgm.nthzsq cnjk zf zj?rt
внутривенная очистка лазерос крови
декоративная решетка для клапана дымоудаления 1000х450
калинза линзы

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)