химический каталог




Практикум по биохимии

Автор С.Е.Северин, Г.А.Соловьева

бирку.

Кроме опытных ставят две контрольные пробы, содержащие одни реактивы без исследуемого раствора. Все пробирки помещают на 3 мин в кипящую водяную баню. Осадок удаляют, фильтруя содержимое пробирок в специальные стаканчики размером ЗхЮ см. Фильтры заранее промывают горячей дистиллированной водой. Пробирки ополаскивают дважды 2 мл горячей дистиллированной воды. Промывные воды фильтруют в те же стаканчики, через те же фильтры.

Осаждение белков гидратом окиси кадмия в щелочной среде. В четыре пробирки наливают по 2 мл CdS04. В ДР из них микропипеткой вносят по 0,1 мл крови и микропипетку про .ывают два раза той же жидкостью В другие пробирки вносят по 0,1 мл дистиллированной воды (контроль). Через 5 мин во все пробы приливают по 1 мл разведенного в 4 раза 1,1 н. раствора NaOH и нагревают 3 мин на кипяТаблица 2

Гипосульфит

0,0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0.9

1,5 1,6 U 1,8 1.9

0.00

0,385 0,355 0,331 0,310 0,290 0,290 0,251 0,232 0,213 0,195 0,177 0,159 0,141 0,124 0,106 0,088 0,070 0,052 0,034 0,017

0,01

0,382 0,352 0,329 0,308 0,288 0,288 0,249 0,230 0,211 0,193 0,175 0,157 0,139 0,122 0,104 0,086 0,068 0,050 0,032 0.015

0,02

0,379 0,350 0,327 0,306 0,286 0,286 0,247 0,228 0,209 0,191 0,173 0,155 0,138 0,120 0,102 0,084 0,066 0,048 0,031 0,014

0,0,:

0,376 0,348 0,325 0,304 0,284 0,284 0,245 0,226 0,208 0,190 0,172 0,154 0,136 0,119 0,101 0,083 0,065 0,047 0,029 0,012

0,373 0,345 0,323 0,302 0,282 0,282 0,243 0,224 0,206 0,188 0,170 0,152 0,134 0,117 0,099 0,081 0,063 0,043 0,027 0,010

,05 0,06 0 ,07 0,08 0,09

,370 0 367 0 364 0 361 0,358,343 0 341 0 338 0 336 0,333

,321 0 318 0 316 0 314 0,312

,300 0 298 0 296 0 294 0,292

,280 0 278 0 276 0 274 0,272

,280 0 278 0 276 0 274 0,272

,241 0 240 0 238 0 236 0,234

,222 0 221 0 219 0 217 0,215

,204 0 202 0 200 0 199 0,197

,186 0 184 0 182 0 181 0,179

,168 0 164 0 164 0 163 0,161

,150 0 148 0 146 0 145 0,143

,132 0 131 0 129 0 127 0,125

,115 0 113 0 Ш 0 110 0,108

,097 0 095 0 093 0 092 0,090

,079 0 077 0 075 0 074 0,072

,061 0 059 0 057 0 056 0,054

,042 0 041 0 039 0 038 0,036

,025 0 024 0 022 0 020 0,019

,008 0 007 0 005 0 003 0,002

6 Необходимо следить за тем, чтобы с внешней стороны пипетки не осталось крови.

Примечание. Содержание сахара выражено в миллиграммах.

*Щёй бане. Ь дальнейшем поступают согласно меюду ла1 едирна—пен-сена.

Определение глюкозы. К фильтрату в каждый стаканчик приливают, точно отмерив, по 2 мл титрованного раствора KsFe(CN)6 (0,005 н.), перемешивают и стаканчики ставят на 15 мин в кипящую водяную баню. Затем пробы охлаждают, приливают по 3 мл тройного раствора (в раствор входит NaCl, ZnS04 и KI) и по 2 мл 3%-ного раствора СНзСООН. Раствор желтеет за счет выделившегося йода. В пробы добавляют по 2 капли крахмала и выделившийся йод титруют из микробюретки гипосульфитом до исчезновения синего окрашивания.

Содержание сахара вычисляют по таблице, составленной для ?,005 н раствора гипосульфита (табл. 2).

Цифры первого вертикального столбца соответствуют целым и десятым долям миллилитров гипосульфита, пошедшего на титрование, а цифры верхней горизонтальной строчки — сотым долям. Число, оказавшееся на месте пересечения вертикальной и горизонтальной линий, проведенных из точек, характеризующих количество пошедшего на титрование гипосульфита, соответствует количеству редуцирующих веществ в миллиграммах глюкозы для данной пробы. Разность между значениями, найденными для опытной и контрольной проб (контроль показывает восстанавливающее действие самих реактивов), указывает на содержание сахара в 0,1 мл крови. Содержание глюкозы в пробе может быть рассчитано по формуле:

0,385а

где х — количество глюкозы в пробе, мг; 0,385 — количество глюкозы, окисляемой 2 мл 0,005 н. раствора феррицианида; а — количество О,005 н. раствора гипосульфита, пошедшего на титрование глюкозы в опытной пробе.

3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЛЮКОЗЫ И ГЛИКОГЕНА С АНТРОНОМ

Производные углеводов типа фурфуролов, образующиеся при на-тревании глюкозы с концентрированной серной кислотой, дают с ан-троном окрашенные соединения. По интенсивности окраски судят о количестве глюкозы.

О

II

О

н н

+ НСII

о

R

II

H-C-R

+ Н20.

Развившаяся окраска пропорциональна количеству взятой глюкозы в пределах от 10 до 100 мкг в пробе.

Реактивы:

1. Антрон — 0,2%-ный раствор, приготовленный на 95%-ном растворе H2S04. Раствор готовят перед определением и ставят в лед.

2. ГлкЖОза — стандартный раствор (I мл содержит 4U мкг глюкозы), приготовлен на растворе бензойной кислоты (с. 19).

3. КОН — 30%-ный раствор.

Определение глюкозы. В широкие пробирки, стоящие во льду, помещают по 2,5 мл исследуемого раствора, содержащего 10—100 мкг глюкозы, и при встряхивании приливают по 5 мл свежеприготовленного раствора антрона. Пробы тщательно перемешивают и ставят в водяную баню при 90° С. Через 10 мин пробы охлаждают в бане с ледяной водой и развившуюся зеленую со слабым синеватым оттенком окраску фотометрируют при

страница 11
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258

Скачать книгу "Практикум по биохимии" (5.12Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы бухгалтера стоимость и продолжительность
Выгодное предложение в КНС Нева на MSI Z170A-G45 Gaming с доставкой по Санкт-Петербургу
купить этажерку б у на авито
мебель для прихожей

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(03.12.2016)