химический каталог




Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии

Автор О.Б.Рудаков, И.А.Востров, С.В.Федоров, А.А.Филиппов и др.

ориметрического детектора возникает за счет поглощаемой энергии возбуждающего света. Однако лишь часть ее превращается в энергию флуоресценции. Эффективность этого процесса можно охарактеризовать квантовым выходом люминесценции - отношением числа испущенных квантов люминесценции к числу поглощенных квантов возбуждающего света Nr.

"bk=N/N„ (4.4)

Часть энергии возбуждения всегда расходуется на развитие 6с-зызлучательных переходов, поэтому Вк<1. Чем выше величина квантового выхода люминесценции, тем эффективнее флуоресцентные свойства вещества. У нелюминсстшрующих молекул квантовый выход либо равен, либо близок к нулю. Вещества, способные к флуоресценции (люминофоры), обладают определенными ошбенностями химического строения. К ним относятся полициклические ароматические углеводороды и многие азот- и кислородсодержащие гетероциклические соединения. По мере увеличения степени сопряжения в люминофоре наблюдается длинноволновый сдвиг как спектра возбуждения, так и спектра флуоресценции. Одновременно с этим имеет место увеличение квантового выхода. В случае изомерных ароматических углеводородов с одинаковым числом ядер почти всегда спектры флуоресценции линейных нолициклических систем смещены в сторону длинных волн по сравнению со спектрами аналогичных нелинейных систем. Так, длина волны в максимуме спектра флуоресценции антрацена равна 400 нм, а фенантрена - 350 нм; теграцена -480 нм, а бензантрацена - 380 нм.

Жесткая шоскостная конфигурация молекулы благоприятствует высокому квантовому выходу. Например, ксантеновый краситель родамин 6Ж, благодаря высокосопряженной планарной структуре, имеет квантовый выход, близкий к 1. При этом максимум флуоресценции у родамина 6Ж лежит в области 550-570 нм.

259

При использовании флуоресценции для детекции сорбатов следует помнить, что флуоресцентные характеристики молекул зависят ие только от их химического строения, но и от условий хроматографии (температура, рН, вязкость, природа растворителя). Примеси, содержащиеся в подвижной фазе, в первую очередь, растворенный кислород, способны вызвать гашение флуоресценции. Такое же действие оказывают кислородсодержащие растворители.

ПФ не должна поглощать свет ни на длине поглощения, ни на длине волны излучения. Рассеянный свет от источника возбуждающего излучения, который возникает из-за наличия в злюате крупных молекул или других рассеивающих излучение частиц, также способен исказить результаты измерения флуоресценции.

Флуоресценцией обладает ограниченное число веществ, поэтому флуориметрический детектор имеет не только на 2 порядка более высокую, чем шектрофотометрический детектор, чувствительность, но и уникальную специфичность. В тех же случаях, когда анализируемые сорбаты не флуоресцируют, разработаны методики ж химической модификации для получения флус^хсцирутощих производных 112,305-308].

При этом различные органические вещества после одинаковой химической обработки приобретают почти одинаковую флуоресценцию, что вполне удобно при количественном хроматографическом анализе методом внутренней нормализации, основанном на линейной и одинаковой для всех разделяемых флуоресцирующих компонентов зависимости интенсивности свечения от их концентрации. Например, флуорескамин и фталевый ангидрид - не флуоресцирующие реагенты, которые взаимодействуют с первичными аминогруппами в щелочной среде с образованием флуоресцирующих производных аминов, аминокислот. Производные фгалевого альдегида отличаются большей интенсивностью, чем производные флуорескамияа, кроме того, фталевый альдегид растворим в воде, что привлекательно для проведения модификации в водных средах. В табл. 4.15 - 4.16 приведены типовые сорбаты, анализируемые с использованием флуориметрического детектора.

260

261

СОЕДИНЕНИЕ

АМИНОСАХАРА

МОДИФИЦИРУЮЩИЙ АГЕНТ

Флуоресхамин

БИОГЕННЫЕ

АЛИФАТИЧЕСКИЕ ФЛУОРЕСКАМИН

Беталаины НЕТ

Глифояаты Нет

Нет

Катехоламины Фталевый альдегид

КАТЕХОЛМсргалтаны

7-ФТОР-2,1,3-БЕНЗОКЕАДИАЗОЛ

Пептидные гормоны,

КАРБАМАТЫ ФТАЛЕВЫЙ АЛЬДЕГИД

ПЕПТИДЫ

ПСРРИРИНЫ

Производные

Флуорескамин Дансилхлорид:

НЕТ

Моно-, ДИ-.

ТРИСАХ^ЗИДЫ

Нет

А,возб,,

275

275

270 350

355 200-220 380 339

275-280

360

305-395, 400410

270-280 255

ХФЛУОР., НМ

Продолжение таблицы 4.15,

Растворитель

370

370

330

440

418 310-330 510

445

370

487

430470, 600-630

350-360 450

НИТРАТНЫЕ БУФЕРНЫЕ РАСТВОРЫ, ГРАДИЕНТ ЦИТРАХНЫЕ БУФЕРНЫЕ РАСТВОРЫ, ГРАДИЕНТ МЕТАНОЛ-ВОДА,

МЕТАИОЛ-фосфатный буфер

НИТРАТНЫЕ БУФЕРНЫЕ РАСТВОРЫ, ГРАДИЕНТ 1 Нитратные буферные растворы, ГРАДИЕНТ АЦЕТОНИТРИЛ -ФОСФАТНЫЙ БУФЕР, ГРАДИЕНТ АЦЕТОНИТРИЛ -МЕТАНОЛ-ВОДА, ГРАДИЕНТ Ацетонитрил -фосфатный буфер, ГРАДИЕНТ

ганол-0.01М СУЛЬФАТ НАТРИЯ МЕТАНОЛ-ФОСФАТНЫЙ БУФЕР (рН-3-5) МЕТАНОЛ-БУФЕРНЫЙ РАСТВОР, ГРАДИЕНТ

0.1% ТРИЭТИЛАМИЯ, РАСТВОР УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ, PFTG>.5

). взб., нм

ТАБЛИЦА 4.16. ЛЕКАРСТВЕННЫЕ ФЛУОРИМЁТРИЧЕСКОГО ДЕТЕКТОРА

480, 470 323

225

286

345 200 28!

280

238

275, 285

380

340

250

28

страница 87
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171

Скачать книгу "Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии" (8.06Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
купить сыадебный букет до 2000
Компания Ренессанс лестница выдвижная на чердак - всегда надежно, оперативно и качественно!
стул самба gtp
Самое выгодное предложение в KNSneva.ru: MSI GS72 6QE-437 - офис продаж со стоянкой: Санкт Петербург, ул. Рузовская, д.11, тел. (812) 490-61-55.

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(10.12.2016)