химический каталог




Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии

Автор О.Б.Рудаков, И.А.Востров, С.В.Федоров, А.А.Филиппов и др.

вского потоков достигается рекордная разрешающая способность, превышающая разрешаю-пгую способность классического FFF на 2 порядка.

I 4.14. Электрофорез

Электрофорез - электромиграционный метод разделения, смежный с жидкостной хроматографией. Процесс разделения компонентов смеси происходит в жидком растворе электролита, т.е. жидкость является непременным и важным компонентом электрофоретичес-кой системы. Растворитель (буферный раствор) представляет собой неподвижную фазу, тогда как растворенное вещество (заряженные частицы) мигрируют под действием приложенного электрического поля. Имеются гибридные эдектрохроматографические методы, в которых разделение проистекает и за счет хроматографического процесса, и под влиянием внешнего электрического поля. Например, незаряженные молекулы можно разделять с помощью мицел-трной эдектрокииетической хроматографии [204-206]. В этом случае к буферу добавляется детергент, и нейтральные молекулы распределяются между буфером и мицеллами в соответствии с их гид-рофобностью. Разделение в этом методе основано на подвижности мицелл, заряженных в большинстве случаев отрицательно. Поскольку в основе разделения лежит процесс распределения в жидкофаз-ной среде, можно с полным основанием отнести этот метод к жидкостной хроматографии. В целом методы, в которых имеется неподвижная фаза для ЖХ. а течение элюента и перенос пробы происходит только за счет электроосмотического потока, относят к элек-трохроматогрифии. В электрохроматографии зонный электрофорез чаще всего сочетается с ионообменной хроматографией.

Электрофорез основан на свойстве ионизированных частиц к электрофоретической подвижности в постоянном электрическом поле. Теория миграции ионов в условиях электрофореза рассмотрена в [58,204-205]. Скорость иона определяется в первую очередь его зарядом, размером, напряженностью поля и вязкостью среда, На106 пряженность поля Етем больше, чем больше плотность тока j, меньше площадь сечения электрофоретической ячейки q и электропроводность;^ Бели напряженность поля можно выразить формулой

E=jAjx, О-3')

то скорость идеальной сферической частицы определяется соотношением

v=zE/6wtj, (138)

где z - заряд частицы, Е - напряженность электрического поля, г -радиус частицы, г/ - вязкость среды.

Электрофоретичсска я подвижность имеет размерность см2/( Вс) и определяется соотношением

и=н/К (1,39)

Вместе с тем приведенные выше уравнения справедливы при бесконечном разбавлении, отсутствии солей и идеальной сферической структуры частицы, В реальных условиях с повышением ионной силы снижается подвижность ионов из-за накапливания ионов противоположного знака, что приводит к снижению эффективного заряда. Безусловно, имеются отклонения в электрофоретической подвижности, связанные с не сфероидальным строением частиц. Величина и обратно пропорциональна щ неподвижной фазы. Вязкость уменьшается с увеличением температуры, а подвижность возрастает в 2.5-3 раза с повышением температуры на каждый градус. Понизить подвижность частицы можно, поместив жидкую среду в твердый носитель с волокнистой структурой или порошкообразный носитель в гель. В этих случаях путь частицы удлиняется, уменьшается напряженность поля.

Классический вид электрофореза - метод подвижной границы по Тиэелиусу, дает точную информацию об электрофоретической подвижности биополимеров (белков, пептидов), но не пригоден из-за низкого разрешения для выделения чистых компонентов анализируемой смеси. Так, если подвижность компонентов уменьшается в ряду А, В, С. Д то в результате электрофореза появляется зона, обогащенная компонентом А, за ней следуют зоны смесей А+В, А+В+С. А+В+С+Д Й+С+Д С+Д и, наконец, зона самого медленного компонента D.

При разделении методом зонного электрофореза перемещение компонентов смеси продолжается до полного их разделения. В этом

10?

методе используют неподвижный носитель, по поверхности или через объем которого осуществляется миграция ионов. Носители могут иметь вид полос (например, из бумаги, колонок, дисков, тонких слоев и др.). При проведении электромиграционных процессов важно, чтобы у концентрационных зон были четкие границы. Диффузию можно ограничивать при помощи градиента плотности, вращения, камер с извилистыми каналами, капиллярного эффекта, ламинарного потока, возрастающей вязкости, если среда жидкая. В пористой среде антиконвекционную стабилизацию зон обеспечивают применением различных типов носителей с волокнистой структурой (разнообразные виды бумаги), гомогенных пленок на основе модифицированной целлюлозы, незакрепленных слоев с молекулярно-ситовыми свойствами (целлюлоза, крахмал, гранулированные гели). Кроме того, процессы проводят в различных гелях (гель-электрофорез) на основе крахмата, агарозы, полиамидов. Электрофорез реализуют под действием полей низкого (< 1000 В) и высокого напряжения (1000-10000 В). Высоковольтный электрофорез проводят, как правило, на бумаге. Этот метод дает хорошие результаты при анализе аминокислот и других небольших молекул и непригоден для анализа м

страница 37
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171

Скачать книгу "Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии" (8.06Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
выправление двери без покраски стоимость
почтовый шкаф на 100 ячеек
оборудование для систем мультирума
шумоглушитель 250х500х600

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(19.11.2017)