химический каталог




Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии

Автор О.Б.Рудаков, И.А.Востров, С.В.Федоров, А.А.Филиппов и др.

бъем эксклюзионной колонки можно выразить суммой трех слагаемых:

V^V+y.+y,, (1.23)

где V, - мертвый объем (объем растворителя между частицами сорбента, иначе говоря, объем подвижной фазы; V. - объем пор, занятый растворителем (объем неподвижной фазы); V, - объем матрицы

сорбента без учета пор. Полный объем растворителя в колонке V

представляет собой сумму объемов подвижной и неподвижной фаз:

V=VM+V. (1.24)

Удерживание молекул в эксклюзионной колонке определяется вероятностью их диффузии в поры и зависит главным образом от соотношения размеров молекул и пор, что схематически показано на рис. 1.6. Коэффициент распределения Ке как и в других вариантах жидкостной хроматографии, представляет собой отношение концентраций вещества в неподвижной и подвижной фазах:

#, = е/С. (1.25)

Так как подвижная и неподвижная фазы имеют одинаковый состав, то Kd вещества, для которого обе фазы одинаково доступны, равен единице. Эта ситуация реализуется для молекул с самыми малыми размерами (в том числе и молекул растворителя), которые проникают во все поры (см. рис. 1.20.), и поэтому движутся через колонку наиболее медленно. Их удерживаемый объем равен полному объему растворителя V. Все молекулы, размер которых больше размера пор сорбента, не могут попасть в них (полная экеклюзия) и проходят по каналам между частицами. Они элюируются из колонки с одним и тем же удерживаемым объемом, равным объему подвижной фазы VM. Коэффициент распределения для этих молекул равен нулю.

Связь между удерживаемым объемом и молекулярной массой (или размером молекул) образца описывается частной калибровочной кривой (рис. 1.21.), т.е. каждый конкретный сорбент характеризуется своей калибровочной кривой, по которой оценивают область разделяемых на нем молекулярных масс. Точка А соответствует пределу эксклюзии. или мертвому объему колонки Vm. Все молекулы, масса которых больше, чем в точке А, будут элюиро-ваться одним пиком с удерживаемым объемом V\ Точка В отражает предел проникания, и все молекулы, масса которых меньше,

77

Рис 1.20. Принцип разделения и детектирования пробы в эксклюзионной хроматографии. А - ввод образца; В - разделение по размерам; С -выход крупных макромолекул; D - выход мелких макромолекул

чем в точке В, также будут выходить из колонки одним пиком с удерживаемым объемом V. Между точками А и В располагается

диапазон селективного разделения, Соответавующий ему объем

VFVrVM (127)

принято называют рабочим объемом колонки. Отрезок CD предегав-ляетсс^юй линейный участокчастной калибровочной кривой, построенной в координатах V^-IgM Этот участок описывается уравнением

V„ = C,-CygM, (1.28)

где С, - отрезок, отсекаемый на оси ординат продолжением отрезка CD, Cj - тангенс угла наклона этого отрезка к оси ординат. Величину Сг называют разделительной емкостью колонки; ее выражают числом миллилитров растворителя, приходящегося на один порядок изменения молекулярной массы. Чем больше разделительная емкость, тем селективнее разделение в данном диапазоне масс. В нелинейных областях калибровочной кривой (участки АС и BD) в связи с уменьшением С2 эффективность фракционирования заметно снижается. Кроме того, нелинейная связь между IgM и VK

существенно усложняет обработку данных и снижает точность результатов. Поэтому стремятся выбирать колонку (или набор колонок) так, чтобы разделение анализируемого полимера протекало в пределах линейного участка калибровочной кривой.

Вели какое-либо вещество элюируется с удерживаемым объемом больше V, то это указывает на проявление других механизмов разделения (чаще всего адсорбционного). Адсорбционные эффекты обычно проявляются на жестких сорбентах, но иногда наблюдаются и на полужестких гелях, видимо, из-за повышенного сродства к матрице геля. Примером может служить адсорбция ароматических соединений на сгироддивинилбензольных гелях.

По-видимому, изменением параметров взаимодействия в системе полимер - сорбент - растворитель можно переходил от адсорбционного механизма к эксклквионному и наоборот. В общем случае в эксклюзионной хроматографии стремятся полностью подавить адсорбционные и другие побочные эффекты, так как они, особенно при исследовании молекулярно-массового распределения (ММР) полимеров, могут существенно исказить результаты анализа. Одним из мешающих факторов является гидродинамический режим хроматографи-рования, в котором роль неподвижной фазы играют стенки колонки (канала), и разделение смеси макромолекул или частиц происходит вследствие различия скоростей протекания подвижной фазы вдоль оси канала и у , „ „

Рис. 1.21. Эксклюзионпая калиброего стенок, а также за счет рас- „_ *^

.„ v вочная кривая. Отрезок CD - липределения разделяемых частиц нейный

участок частной калибропо сечению канала в соответ- вочной кр|1вой. v„ - мертвый

ствии с их размером. объем, V. - рабочий объем колонки

78

79

Принципиальными отличиями эксклюзионной хроматографии от других вариантов являются априори известная продолжительность анализа в конкретной и

страница 26
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171

Скачать книгу "Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии" (8.06Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
теплоизоляция для кровли цена
Самое выгодное предложение от магазина компьютерной техники КНС - Asus GL553VD 90NB0DW3-M01550 с доставкой по Москве и другим регионам России.
неоновый буквы в окне реклама или нет
зеркало в полный рост купить

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(30.05.2017)