химический каталог




Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии

Автор О.Б.Рудаков, И.А.Востров, С.В.Федоров, А.А.Филиппов и др.

да инжекционных эффектов, например, искривление или расщепление пиков. Чтобы выявить это, следует уменьшить объём вводимого в колонку образца до 10-20 мкл, настроить детектор таким образом, чтобы высота пиков осталась прежней и проверить JV и R интересующих пиков. Необходимость изменения процедуры анализа возникает в том случае, если с уменьшением объёма вводимого образца (меньший инжекционный объём или более слабый растворитель для образца) заметно возрастают N или R, влияющие на точность или воспроизводимость анализа. Вклад инжекционного объёма в размывание пиков становится более серьёзным в случае колонок с меньшим объёмом или для пиков с малыми значениями к. Для того чтобы поддерживать необходимую эффективность, максимальный введённый объём образца не может превышать мёртвый объём колонки, не вызвав при этом размывания пиков и ухудшения разделения. Чтобы не потерять эффективность, необходимо вводить образец меньшего объёма в колонки с меньшим мертвым объёмом. Кроме того, более эффективные колонки менее устойчивы к большим объёмам пробы и легче перегружаются. В целом если инжекционный объём составляет не более 25% объема интересующего пика, то потеря разрешения не должна превышать 5%. Для большинства стандартных колонок подходит объём 25 - 50 мкл пробы, растворённой в подвижной фазе или более слабом растворителе.

Таким образом, чтобы произвести оптимизацию ВЭЖХ системы, необходимо соблюдать следующие общие правила: объём ячейки детектора должен составлять 1/10 объёма пика, инжекционный объём - 1/10 объёма пика. При этом следует стремиться к минимизации длины и диаметра коммуникаций.

Су шествует три основных способа исключения проблем, связанных с ЭКР. Во-первых, следовать вышеприведённым советам по

490 оптимизации ВЭЖХ системы. Во-вторых, необходимо работать в той области хроматограммы, где ЭКР минимальны. Наконец, создать такой метод разделения, при котором ЭКР не имели бы большого значения.

Для спижа [ия влияния ЭКР можно оптимизировать фактор удерживания. Увеличение объема кюветы детектора гораздо более ощутимо для пиков легко удерживаемых компонентов (компонентов с низким к). Это связано с тем, что поздние пики имеют больший объём и, следовательно, меньше подвержены влиянию экстраколоночных эффектов. Данное обстоятельство следует использовать как преимущество, если создать методику разделения, при котором критические лики имели бы к больше 4. В первую очередь, это касается микроколонок, а также колонок с мелким размером частиц сорбента.

С другой стороны, можно подобрать такие условия разделения, при которых экстраколоночные эффекты не будут иметь значения. Имеется в виду такой запас разрешения, при котором значительная потеря разрешения и эффективности, вызванная экстраколоночными эффектами, не снизит точность и воспрогпводимостъ анализа. Часто такой метод называют "надёжным". Например, если для разделения необходимо добиться разрешения Я = 1.25, то не составит большого труда создать метод с разрешением Я = 1.8. Тем самым будет создан достаточный запас разрешения на случай ЭКР или изнашивания колонки.

85. Проблемы изменения селективности колонок

При переходе на новую колонку могут возникнуть нежелательные эффекты ухудшения селективности. Изменения селективности колонки могут быть вызваны изменениями взаимодействия компонентов пробы с химически привитой фазой или силикагелевой матрицей сорбента. Удерживание зависит от длины химически привитых алкильных групп (С|8> С8 и т д.) и степени покрытия ими матрицы . Также возможны взаимодействия между компонентами пробы и активными силанольными центрами или примесями металлов на поверхности силикагелевой матрицы. Примеси металлов увеличивают кислотность силикагеля, в результате чего остаточ491 ные силанольные группы деиротонируются даже при низких значениях рН и сильно взаимодействуют с основными веществами. Незначительные изменения матрицы могут вызвать кардинальные изменения селективности, а также формы пиков, в особенности у основных соединений.

Большие различия значений фактора разделения а (>10%) для двух гидрофобных соединений, например, антрацена и нафталина, указывают на различия привитой фазы. Большие различия селективности для пщрофобного и полярного веществ основной природы (например, толуола и диметиланилима) указывают на различие свойств матрицы сорбента.

Возникновение проблем с селеетивностью в случае полярных слабоосновных и слабокислых веществ, как правило, вызвано некорректным вводом образца (образец растворен не в подвижной фазе, рН и ионная сипа раствора не обеспечивают полного протежирования или дспрогонирования исследуемых компонентов и тл). Вшжоторых случаях изменение селективности связано с влиянием остаточных активных еияанолышх групп сорбента. Для его устранения следует установить рН подвижной фазы около 3 или добавить в элюент 10-50 мМ триэтидамина (ТЭА). Это позволит "закрыть" остаточные силанольные группы на поверхности силикагелевой матрицы. Все эти действия значительно улучшат воспроизводимость анализа при смене

страница 156
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171

Скачать книгу "Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии" (8.06Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
где можно закончить курсы пауэр поин в ярославле
наши подарки ру
ру тв концерт киркорова где
заказ автобуса на свадьбу дешовые

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(07.12.2016)