химический каталог




Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии

Автор О.Б.Рудаков, И.А.Востров, С.В.Федоров, А.А.Филиппов и др.

перативно определить, подходит ли более короткая колонка для данного анализа.

Обсудим вкратце экстраколоночные эффекты, роль которых так велика в микроколоночной ВЭЖХ. Суммарная ширина пика зависит от объема колонки, объема пробы и экстраколоночного объема. Под последним понимают сумму инжекщюнного объёма, объёма "in-line" фильтра, объёмов капилляров и соединений между инжектором и колонкой, а также колонкой и ячейкой детектора. Согласно железному правилу хроматографии, экстраколоночный объём в хроматографической системе должен быть сведён к минимуму для достижения оптимальной эффективности. Существует два очевидных свидетельства существования чрезмерного экстраколоночного размывания (ЭКР) в ВЭЖХ системе для данной колонки: 1) число теоретических тарелок на практике существенно меньше (20°/. и более), чем заявлено производителем; 2) число теоретических тарелок начальных пиков значительно меньше (30% и более), чем у поздних.

487

Для того чтобы снизить влияние дисперсии, всегда надо свести к минимуму внутренний диаметр и длину капилляра между инжектором и колонкой, а также колонкой и детектором. В некоторых случаях применяют спиральные капилляры необходимой длины. Спиральный капилляр усиливает радиальную диффузию, разрушая параболический профиль потока, что, в свою очередь, заметно уменьшает диффузию в капилляре. Результатом улучшенного радиального массопсреноса образца является меньшее размывание пиков по сравнению с прямым капилляром.

Разумным балансом между практическим удобством и минимальным внутренним диаметром является использование капилляров минимальной длины с внутренним диамечром 0.25 мм между инжектором и колонкой, а также колонкой и детектором. Несмотря на то, что доступны капилляры и меньшею диаметра (0.17 и 0.13 мм), их следует использовать лишь в крайнем случае, так как существует повышенный риск забивания механическими примесями, присутствующими в пробе и подвижной фазе. Использование " in-line" фильтров и предколоно к между инжектором и колонкой также может быть источником ЭКР пиков. При использовании таких фильтров убедитесь в отсутствии у них большого мертвого объёма. Сорбент предко-лонки должен быть подобран таким образом, чтобы число теоретических тарелок комбинации предколонка - аналитическая колонка не было меньше, чем у одной аналитической колонки.

По правилам хроматографии объём кюветы детектора не должен превышать 1/10 объёма интересующего пика. Это означает, что при объеме пика 50 мкл должна использоваться кювета объёмом не более 5 мкл. Высокоэффективные колонки крайне чувствительны к малейшим изменениям объёма кюветы, острые пики, полученные на колонках с малым внутренним диаметром, легко теряют свои свойства, если кювета подобрана неверно. Также следует прини-мать во внимание геометрию кюветы, а именно её длину и радиус Несмотря на то, что эффективность микроколонок увеличивается при использовании кювет малого объёма, следует помнить, что меньший объём кюветы в целом означает меньшую чувствительность, так как выходной сигнал спектрофотометрического детектора прямо пропорционален длине оптического пути (ячейки ма488 лого объёма, как правило, короче). Это же правило минимизации объема кювет справедливо и для Других оптических детекторов (кроме рефрактометров).

Ещё одним фактором, влияющим на размывание пиков, является термостат детектора, стабилизирующий температуру образца на входе в ячейку. Его влияние аналогично капилляру, поэтому большинство производителей используют для термостатов минимальной длины капилляры с внутренним диаметром 0.17-0.13 мм.

Наиболее важен относительный вклад самой колонки в размывание пика. Если величина объема колонки значительно превышает экстраколоночный объем, то небольшие изменения последнего несильно повлияют на объем концентрационной зоны аналита. С другой стороны, чем мен ьше объем колонки, тем важнее становится ЭКР. Кроме того, как следует из табл. 8.11., помимо геометрических размеров колонки, большое значение имеет также диаметр частиц сорбента, которым набита колонка.

Таблица 8.10. Потеря эффективности, вызванная ячейками с большим объёмом

Размеры

колонки, мм Объём

ячейки, мкл Приведенная эффективность, N/м Потеря эффективности, %

150x4.6 1

8 98096 90888 7

150x2.0 1

8 78077 52939 32

150x1.0 1

8 56551 16277 67

зависимости от размеТаблица 8.11. Объем хроматографического пика в ров колонки и частиц сорбента

Размер

колонки, мм Д иаметр частиц, мкм

10 5 | 3

Объем пика, мкл

250x4.6 150x4.6 100x4.6 291 225 183 206 159 129 159 123 100

489

В тех случаях, когда образец растворён в подвижной фазе (или более слабом растворителе, чем подвижная фаза) и инжекционный объём его составляет 10-50 мкл, вклад образца в размывание пиков несущественен, если используются стандартные колонки 150 или 250 х 4.6 мм. Если же в колонку вводятся образны гораздо большего объёма, чем 50 мкл или образцы свыше 25 мкл, растворённые в сильных растворителях, возможно снижение числа теоретических тарелок за счёт ря

страница 155
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171

Скачать книгу "Спутник хроматографиста. Методы жидкостной хроматографии" (8.06Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
ремонт холодильника звенигород
счеты купить
плафон такси на магнитах
ручки мебельные экспострой

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(08.12.2016)