анспортным устройством /-разделительная колонка: 2-термостат; 3-нагревательные элементы; 4-пламенно-иони-зационный детектор; 5-собирающий электрод; «-движущаяся проволока.

г. Пламенно-ионизационный детектор с транспортным устройством (проволока или цепочка), на которое попадает элюат из колонки (рис. 23.22). Затем проволоку пропускают через печь, где растворитель испаряется. Оставшийся на проволоке образец подается в детектор для сжигания и измерения.

Обзорная литература: 235, 317, 411, 948, 1029, 1184, 1237, 1342 Периодическая литература: 4347,

36

Глава 23

Хроматография

37

где а — расстояние от пятна до линии старта и эквивалентно времени удерживания (tR) или удерживаемому объему (VR) (разд. 23.1), 6 — диаметр пятна.

Пластинка для ТСХ

_Фронт растворителя

наго вещества.

Ь

Стеклянная ''емкость

23.15.

ТОНКОСЛОЙНАЯ ХРОМАТОГРАФИЯ

Подвижная фаза. \

_ Линия старта

В тонкослойной хроматографии (ТСХ) порции образца (2—Юмкл) наносят в виде 0,01—1%-ного раствора на низ стеклянной пластинки, покрытой тонким (обычно 100—300 мкм) слоем неподвижной фазы. Пластинку помещают в камеру, заполненную на глубину нескольких миллиметров соответствующей подвижной фазой, которая за счет капиллярных сил поднимается через слой неподвижной фазы. Компоненты образца движутся через слой с различной скоростью в соответствии с их коэффициентами адсорбции. Этот процесс прекращают, удаляя пластинку из камеры, после чего подвижную фазу испаряют. Положения разделившихся компонентов образца определяют путем использования видимого или ультрафиолетового света или распыления хромогенного агента.

Положение пятна растворенного вещества описывается путем измерения величины Rf, которая определяется (рис. 23.23) как отношение

Расстояние, пройденное от точки старта

растворенным веществом с 25)

Расстояние, пройденное от точки старта подвижной фазой

Поэтому значения Rf всех адсорбированных соединений всегда меньше 1,00. Для удобства иногда пользуются значениями hRf{hRf= lOORi). Величины ^f регулярно публикуются в Journal of Chromatography.

Число теоретических тарелок (JV) определяется по формуле (см. рис. 23.23)

^ = 16 (а/6) , (23.26)

Рис. 23.23. Тонкослойная хроматограмма (ТСХ) и способы расчета величины (Rt) и числа теоретических тарелок (JV).

B3TT = L/W, ВЭТТ = 62/16а

Высота, эквивалентная теоретической тарелке (ВЭТТ), связана с числом теоретических тарелок (N) следующей зависимостью:

где L = а, поэтому

(23.27) (23.28)

23.16.

Обзорная литература: 498. 663, 870, 972, 1092, 1196, 1236, 1251, 1303. 1304 1386, 1449.

ТЕХНИКА ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

23.16.1. Приготовление пластинок для ТСХ

Пластинки для ТСХ представляют собой тонкие слои адсорбента (толщина 0,1—10 мм), нанесенного на подложку: стеклянную пластинку или алюминиевую фольгу. Промышленность выпускает несколько типов стандартных пластинок для ТСХ размером 20X20 10X20 и 5X20 см.

Диаметр частиц у промышленных адсорбентов, таких, как си-ликагель или оксид алюминия, для ТСХ составляет 1—40 мкм. Для закрепления сорбента на стекле или фольге добавляют гипс (5—20%) или крахмал (2—5%), с помощью которых облегчается Образование равномерного покрытия. Кроме того, можно вводить

38

Глава 23

Хроматография

39

и другие добавки, например индикаторы флуоресценции, в частности силикат цинка, облегчающие определение флуоресцирующих веществ под светом ультрафиолетовой лампы.

Пластинки очищают промывкой водой, для чего их погружают на 24 ч в дистиллированную воду, содержащую 1% водного поверхностно активного вещества, затем окончательно промывают дистиллированной водой и высушивают.

На пластинку адсорбент наносят в виде водной пасты. Самым хорошим и воспроизводимым способом нанесения покрытия на пластинку является использование выпускаемого промышленностью специального накатывающего приспособления (валка). Для испарения воды с поверхности пластинку со свеженанесен-ным покрытием оставляют в покое на 15—30 мин. Затем ее помещают на 60 мин в сушильный шкаф при 105—110°С. Хранить пластинки следует в эксикаторе или специальном шкафу в присутствии осушителей.

23.16.2. Способы нанесения проб образца

Образцы исследуются в виде 0,1—1%-ных растворов в неполярных летучих растворителях. Растворитель должен быть неполярным

Пластинка для ТСХ

_ Предел

хрчтмщавшротм

Кнт

яде

Пятка, образца.

Рис. 23.24. Нанесение проб на пластинку для ТСХ.

для того, чтобы растекание образца в точке нанесения было минимальным. На рис. 23.24 показано, как образец наносится на пластинку.

Раствор образца наносят на пластинку с помощью микрошприца (количество одной пробы 2—10 мкл) в виде отдельных точек. Диаметр таких точек должен быть порядка 2—4 мм, расстояние между их центрами—10—15 мм. Расстояние между точкой старта и фронтом растворителя обычно составляет 10 см. Адсорбент, находящийся за предельной линией хроматограммы, следует удалить с помощью острого инструмента, с тем чтобы растворитель не мог заходить за эту линию. При проведении к