химический каталог




Химия биологически активных природных соединений

Автор Н.А.Преображенский, Р.П.Евстигнеева

я на один атом углерода. С помощью ГЖХ проведено фракционирование триглицеридов ряда растительных масел и животных жиров.

Для устранения ацильной миграции и разложения в процессе хроматографии моно- и диглицериды разделяют в виде различных производных: ацетатов, триметилсилильных эфиров и т. д. [6].

ФРАКЦИОНИРОВАНИЕ ФОСФОЛИПИДОВ

Один из методов разделения фосфолипидов на классы основан на фракционированном осаждении из различных растворителей. Так, выделение «кефалиновой» и «лецитиновой» фракций проводится следующим образом:

188

Фракция, нерастворимая в ацетоне

эфир

Раствор (глицерофосфолипиды)

Осадок (сфингомиелины)

I

Раствор (фосфатидовая кислота)

Осадок

спирт

I

1

Раствор («лецитин»)

Осадок («кефалин»)

Фракции «лецитин» и «кефалин» не являются индивидуальными соединениями, а представляют собой фосфолипидные концентраты с преобладанием в них фосфатидилхолинов и фосфатидилэтаноламинов.

Разделение фракции «кефалин» на фосфатидилэтаноламины, фосфа-тидилсерины и инозитфосфатиды было осуществлено на основании различной растворимости этих соединений в смеси спирт — хлороформ. При добавлении спирта к раствору фракции в хлороформе сначала осаждаются наименее растворимые инозитфосфатиды, далее серинфос-фатиды, а фосфатидилэтаноламины остаются в растворе. Для разделения фракции «лецитин» используют способность лецитина к образованию комплекса с хлористым кадмием.

Фракционированное осаждение фосфолипидов вследствие ряда недостатков (неполнота осаждения фосфолипидов, многократное повторение процесса, получение недостаточно чистых фосфолипидов) постепенно вытесняется методами хроматографии.

Разделение фосфолипидов на классы обычно осуществляют с помощью адсорбционной хроматографии на колонках с кремневой кислотой, силикагелем или тонкослойной хроматографией на силикагеле. В ряде случаев проводят предварительное разделение кислых и нейтральных фосфолипидов на колонках с модифицированными целлюлозами (ДЭАЭ- и ТЭАЭ-целлюлозы) [7, р. 272]. Для вымывания отдельных классов фосфолипидов при хроматографировании на колонке с кремневой кислотой преимущественно применяют смесь хлороформ—метанол с возрастающим количеством метилового спирта (4:1, 3:2, 1:4). При этом элюируются фосфолипиды в следующей последовательности: фосфатидилэтаноламины, фосфоинозитиды, фосфатидилхолины, сфингомиелины.

Выделенные липидные фракции очищают далее с помощью ТСХ на силикагеле в различных системах растворителей в зависимости от состава фосфолипидной смеси [7, р. 530]. Наиболее распространены следующие системы: хлороформ — метиловый спирт — уксусная кислота — вода (25 : 15 : 4 : 2, по объему), хлороформ — метиловый спирт — вода (65 : 25 : 4), хлороформ — метиловый спирт — 28%-ный аммиак (65: : 25 : 5) и т. д.

При проведении анализа с помощью ТСХ следует иметь в виду, что каждое пятно на хроматограмме представляет собой «семейство» родственных фосфолипидов, которые отличаются по длине цепи и степени

189

ненасыщенности входящих в их состав жирных кислот и могут быть в различных формах (диацильной, плазмалогенной или в форме алкил-ацилфосфатидов — алкильные фосфолипиды).

Для разделения фосфолипидов по степени ненасыщенности, а также для частичного разделения фосфолипидов с простой и сложной эфирными связями применяют ТСХ на силикагеле, импрегнированном AgN03. Выделенные фосфолипиды далее пропускают через колонку с ионообменником (Н+-форма) для удаления ионов серебра. Каждый подкласс (диацил-, алкилацил- и алкенилацил-формы) может быть подвергнут повторному разделению по степени ненасыщенности на силикагеле, импрегнированном AgN03.

Для более резкого проявления различий в хроматографической подвижности диацильных и алкильных фосфолипидов и плазмалогенов (см. стр. 265) используют их менее полярные производные. Так, фосфа-тидилэтаноламины с простой и сложной эфирными связями и фосфа-тидальэтаноламины (см. стр. 295) были разделены с помощью многократной одномерной хроматографии на силикагеле в виде метилированных динитрофенильных производных

Аналогично диацил-, алкилацил- и алкенилацилфосфолипиды разделяли в тонком слое силикагеля в виде диметиловых эфиров соответствующих фосфатидовых кислот, получаемых последовательной обработкой фосфолипидов фосфолипазой D и диазометаном.

Для разделения фосфолипидов по степени ненасыщенности применяют также хроматографию на колонках с алкилированными декстра-нами (сефадексами), используя органические растворители. В частности, таким методом проведено разделение фосфатидилхолинов в виде аддуктов с ацетатом ртути по степени ненасыщенности их жирнокис-лотных остатков.

Удобным методом разделения природных фосфолипидов по молекулярной массе и степени ненасыщенности является обращенно-фазовая распределительная хроматография в тонком слое гидрофобного силикагеля (импрегнирование ундеканом, тетрадеканом, силиконом). Метод эффективен и для разделения диметиловых эфиров фосфатидовых кислот.

Газо-жидкостная хроматография природных фосфолипидов осложнена их распадом в процессе хроматографии. Для структурного анализа фосфолипидов, как правило, проводят их ферментативный гидролиз до соответствующих диглицеридов, которые затем подвергают ГЖХ в виде ацетатов или силильных эфиров.

При выделении плазмалогенов приходится считаться с их высокой лабильностью; в частности, в условиях выделения возможно расщепление 1-алкенильноэфирной группы с образованием альдегидов, а также деацилирование в лизоплазмалогены, которые легко превращаются в циклические ацетали. Наибольшее число известных способов выделения и очистки плазмалогенов основано на методах селективного гидро-

CH2OR

R'COO—С—Н

N02

190

лиза, при котором диацилфосфолипиды распадаются быстрее, чем плазмалогены. К таким методам относятся мягкий щелочной и ферментативный гидролиз (фосфолипазы).

СТРУКТУРНЫЕ КОМПОНЕНТЫ ЛИПИДОВ

ВЫСШИЕ ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ

Основными гидрофобными компонентами липидов являются высшие жирные кислоты, присутствующие в виде сложных эфиров или амидов. В настоящее время изучен жирнокислотный состав липидов различных классов и показано наличие разнообразных жирных кислот (более двухсот), отличающихся длиной цепи, числом и положением двойных связей, их конфигурацией, а также присутствием некоторых функциональных групп (окси-, кето-, эпокси- и т. д.).

Насыщенные жирные кислоты. Насыщенные кислоты природных липидов, как правило, имеют прямую неразветвленную цепь и содержат четное число атомов углерода. Кислоты с нечетным числом атомов углерода в незначительных количествах идентифицированы в ряде природных источников: молоко, кровь человека, жир волос человека и т. д. [8].

Основные насыщенные жирные кислоты СН3(СН2)пСООН, входящие в состав природных липидов, представлены в табл. 12.

Таблица 12. Насыщенные жирные кислоты, входящие в состав природных липидов

Кислота

Природный источник

w-Бутановая (масляная) н-Гексановая (капроновая)

н-Октановая (каприловая)

к-Декановая (каприновая) к-Додекановая (лауриновая)

н-Тетрадекановая (миристиновая) к-Гексадекановая (пальмитиновая)

к-Октадекановая (стеариновая)

к-Эйкозановая (арахиновая) н-Докозановая (бегеновая)

к-Тетракозановая (лигноцернновая)

к- Гексакозановая

и-Октакозановая Триаконтановая (мелнссовая)

8 10

12

14

16

18

20

22

24

26 28

Сливочное масло

Пальмовое и кокосовое масла, жир молока

Кокосовое и пальмовое масла, жир молока, масло некоторых семян Сливочное н кокосовое масла н др. Жнр молока, кокосовое масло, масло семян лавра, пальмовое масло Второстепенный компонент основных животных и растительных жиров; масло мускатного ореха и др. Основной компонент триглицеридов масел и животных жиров, а также фосфо-и гликолипидов различного происхождения

Обычно присутствует вместе с пальмитиновой кислотой; основной компонент некоторых растительных масел и многих животных жиров, фосфо- и гликолипидов различного происхождения Арахисовое масло, рыбий жир н др. Арахисовое, горчичное масла и др., мозг

Арахисовое масло, основные природные жиры (в небольших количествах) Пчелиный воск, воск льна, шерсти, мозг

Основные воска

Пчелиный воск, различные растительные и минеральные воска

191

Природные высшие жирные кислоты обычно имеют прямую нераз-ветвленную цепь. Кислоты, содержащие разветвления в цепи, являются второстепенными компонентами липидов животного происхождения и достаточно широко представлены в бактериальных липидах. Например, из воска туберкулезных бацилл выделены разветвленные насыщенные кислоты: 10-метилоктадекановая (туберкулостеариновая), 3,13,19-три-метилтрикозановая и другие кислоты:

СН3(СН2)ХН(СН2)8СООН СЩСН2)3СН(СН2)»Ш(СН2)ХНСН2СООН

сн.

CHj СН3' СНз

10 метнлоктадекан вая 3.13.19-триметплтрнкозановая кнслота кислота

В ряде бактерий обнаружены кислоты общей формулы

СН3СН,СН(СН2)„СООН п = 4 — 26 I

СН3

Значительный интерес представляют миколевые кислоты — типичные составные части микобактерий. Миколевые кислоты штаммов М.' tuberculosis (человека и быка) имеют соответственно формулы:

QsHsiCHijCH—СН(ОН)—СН— СН(ОН)—СНСООН I I I

CeHi3 с16н33 с24н«

С25Н51СН(ОН)—CH-CH2—СН—СН(ОН)—СНСООН

I I I

Ci6H33 С16Н33 С24Н49

. Достаточно широко представлены в различных бактериях и, в меньшей степени, в растениях кислоты — производные циклопропана. Например, в Е. Coli обнаружены кислоты общей формулы

СН3(СН2)„СН—СН(СН2)тСООН

\/

сн2

Ненасыщенные кислоты. В высших жирных кислотах обнаружены ненасыщенные связи различных типов (различные «типы ненасыщенности») :

Изолированная двойная связь (цис- и транс-) RCH=CH—

2-Метилзамещенная двойная связь, сопряжен- НООС—С=СН-ная с карбоксильной группой

СН3

Двойные связи, разделенные метиленовой RCH=CH—СН2—CH=CHR' группой (метиленразделенные)

Конъюгированные двойные связи RCH=CH—CH=CHR'

Алленовые двойные связи RCH=C=CHR'

Ацетиленовые связи RChhCR'

В зависимости от числа присутствующих двойных связей полиненасыщенные кислоты подразделяют на моноеновые, диеновые, триеновые, тетраеновые н т. д., объединяемые под названием полиеновых жирных кислот.

Основными наиболее распространенными типами ненасыщенности, встречающимися в природных жирных кислотах, являются ^ыс-изоли-рованные двойные связи в случае моноеновых кислот и ^ыс-метилен-

192

разделенные двойные связи в случае полиеновых кислот. Все ненасыщенные метиленразделенные жирные кислоты в зависимости от положения двойной связи по отношению к некарбоксильному концу делят на три типа: типы олеиновой, линолевой и линоленовой кислот (табл. 13).

Таблица 13. Природные ненасыщенные жирные кислоты

Общее

Кислота число атомов X У Природный нсточинк

углерода

Тип олеиновой кислоты: CH3(CH2)7(CH=CHCH2)x(CHi),,COOH

Октадецен-9-овая (олеиновая) 18 1 6 Основные жиры и масла

Докозен-13-ова я (эруковая) 22 1 10 Масло семян горчицы

Тетракозен-15-овая (нервоновая) 24 1 12 Цереброзиды спинного мозга

Октадекадиен-6,9-овая 18 2 3 Жир сельди

Эйкозадиен-8,11-овая 20 2 5 Печень быка

Эйкозатриен-5,8,11-овая . 20 3 2 Фосфолипиды мозга, печени

Докозадиен-10,13-овая 22 2 7 Жир сельди

Докозатриен-7,10,13-овая 22 3 4 Фосфолипиды мозга

Тип линолевой кислоты:

Октадекадиен-9,12-овая (лино- 18 2 6

левая)

Октадекатриен-6,9,12-овая (у-ли- • 18 3 3

ноленовая)

Эйкозадиен-11,14-овая 20 2 8

Эйкозатриен-8,11,14-овая 20 3 5

Эйкозатеграен-5,8,11,14-овая 20 4 2

(арахидоновая)

Докозатетраен-7,10,13,16-овая 22 4 4

Докозапентаен-4,7,10,13,16-овая 22 5- 1

Тетракозатетраен-9,12,15,18-овая 24 4 6

СНз (сн2) 4 (СН=снсн2) х (сн2) „соон

Большинство растительных масел, фосфолипиды животного организма

Растительные масла

Фосфолипиды печени быка Фосфолипиды печени быка, гли-кофосфолипиды мозга Фосфолипиды печени, мозга, поджелудочной железы млекопитающих

Фосфолипиды печени быка Липиды мозга и _ надпочечной железы, -Липиды мозга

Тип линоленовой кислоты:

Октадекатриен-9,12,15-овая (ли-ноленовая)

Октадекатетраен-6,9,12,15-овая Эйкозатетраен-8,11,14,17-овая Эйкозапеитаен-5,8,11,14,17-овая Д окозагексаен-4,7,10,13,16, 19-овая

Тетракозагексаен-4,8,12,15,18, 21-овая (низиновая)

18 3 6

18 4 3

20 4 5

20 5 2

22 6 1

24 6 3

СНзСН2(СН=СНСН2)х(СН2) „соон

Большинство растительных масел, фосфолипиды животного организма Жир сельди Фосфолипиды печени Жир печени акулы и быка Фосфолипиды печени быка, мозга

Печень трески, жир сардин

Наиболее распространенной является олеиновая кислота; содержание ее в оливковом масле составляет 85% ( от общего содержания кислот), в пальмоядровом масле — 74%, в других растительных маслах — 10—50%. Олеиновую кислоту выделяют из жира многих тепло- и холоднокровных животных, а также из липидов различных тканей и орга-

13—2394

193

нов человека и животных. Линолевая (октадекадиен-9,12-овая) кислота является наиболее важной из диеновых кислот, найденных в растительных маслах. Многие масла (соевое, хлопковое, сафлоровое, маковое, подсолнечное, виноградное и др.) содержат более 50% линолевой кислоты, в животных жирах она присутствует в незначительных количествах. Линоленовая (октадекатриен-9,12,15-овая) кислота содержится в ряде растительных масел (льняное, конопляное и др.), животные жиры практически лишены линоленовой кислоты. Арахидоновая кислота — одна из наиболее интересных полиеновых кислот, так как обладает высокой биологической активностью. Основным источником арахидоновой кислоты являются фосфолипиды печени, мозга, почек, поджелудочной железы, мускулов, легких, лимфатических желез, жировых депо млекопитающих. Содержание ее в тканях животного организма 0,2— 22%.

Наряду с полиеновыми в природе встречаются и ацетиленовые кислоты. Значительный интерес представляют высшие ненасыщенные кислоты, содержащие одновременно двойные и тройные связи; многие из них обладают физиологической активностью, в частности, ксимениновая и изановая кислоты:

СН3(СН2)5СН=СН—CesC(CH2)7COOH СН2=СН(СН2)4С=С—С=С(СН2)7СООН

ксимениновая кислота изаиовая кислота

Из некоторых природных источников выделены эпоксикислоты, например 12,13-чыс-эпоксиолеиновая (масло Cephalocroton cordotanus)

СН8(СН2)4СН—СНСН2СН=СН(СН2)7СООН

\ /

о

а также циклические кислоты, из которых наиболее интересны с точки

Таблица 14. Основные природные окси- и кетокислоты

Кислота Структурная формула Природный источник

12-Оксиоктадецен-9-овая (ришшолевая) СН3(СН2)5СН(ОН)СН2СН=СН(СН2)7СООН Касторовое масло (90%), второстепенный компонент некоторых других масел

9-Оксиоктадецен-12-овая СН3(СН2)4СН=СН(СН2)2СН(ОН)(СН2)7СООН Масло семян Strophan-thus Sarmentosus

18-Оксиэлеостеарино-вая НОСН2(СН2)3(СН=СН)з(СН2)7СООН Масло Kamala

9,10-Диоксистеарино-вая СН3(СН2)7СН(ОН)—СН(ОН)(СН2),СООН Касторовое масло

2-Окситетракозановая (цереброновая) СН3(СН2)21СН(ОН)СООН Липиды мозга

2-Оксигексакозановая СН3(СН2)23СН(ОН)СООН Липиды

страница 27
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69

Скачать книгу "Химия биологически активных природных соединений" (6.60Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
аренда плазменных панелей в воронеже
Рекомендуем фирму Ренесанс - заказать лестницу в деревянный дом - цена ниже, качество выше!
офисный стул изо хром
KNSneva.ru - предлагает купить в кредит планшет - метро Пушкинская, Санкт Петербург, ул. Рузовская, д.11.

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)