химический каталог




Начала органической химии. Книга вторая

Автор А.Н.Несмеянов, Н.А.Несмеянов

слением серы до группы —S03H удается разбить молекулу на части по связи —S—S—. Того же можно достигнуть восстановлением моста —S—S— до двух меркаптогрупп —SH и HS—, например, действием HSCH2COOH, окисляющейся в (—S—СН2—СООН)2, или при помощи меркаптоэтанола HSCH2CH2OH.

2. Действием на белок 2,4-динитрофторбензола — активного электро-фильного реагента («подвижный фтор») — удается динитрофенилировать свободные аминогруппы белка. Это могут быть аминогруппы двух типов: вторые аминогруппы диаминокислот, подобных лизину, или концевые аминогруппы. Например:

H2NCHC—NHCHC-NHCHCOOII+2F—R О R' О (СН2)4 /0а

NH2

02N— Х=< I II I II I

N02 R О Rr О (CH2)4

/ NOA

При осторожном гидролизе отщепляется написанная на схеме слева 2,4-диннтрофенилированная аминокислота

02N—/_^—NH—СН—С—ОН

Х=< I II

\NO2 R о

Отделяя эту днннтрофениламинокпслоту и идентифицируя ее, например, методом бумажной хроматографии, определяют одну из концевых аминокислот молекулы белка, так называемую N-концевую (метод Сенд-щера, 1949 г.). Метод имеет тот недостаток, что в условиях кислотного гидролиза динитрофенильные производные глицина, цистина, пролина И триптофана разрушаются.

Другой метод (Эдман. 1949 г.) состоит в обработке белка фенилизотио-цпанатом, который со свободными аминогруппами образует производные тпомочевины. При обработке такого производного разбавленной соляной кислотой в ннтрометане легко отщепляется тот остаток аминокислоты, у которого феннлтиомочевинная группировка находится в а-положении, ибо. отщепляясь, он образует устойчивый пятичленнып гетероцикл — фенилтпогпдантоин:

(CH2)4NH2 I

HANCHC-NHCHC—NI-ICHC—NHCHCOOH-f-2CEH5—X=C=S >

II! I II II I

R О R' О О R"

S (CH2)4NHCNHCeH5

II I> CEH5NHCNHCHC—NHCHC-NHCHC—NHCHCOOH

I II MI II I

R 0 R' О 0 R*

S

II

(CH2)4NHCNHCeH8 I> C8H5-N—C=S + H2NCHC—NHCHC—NHCHCOOH

HCI

0=C NH R' О OR"

\ / CH

I

R

фенилтиогиданТоин

Применяя этот метод, можно шаг за шагом отстригать по одному аминокислотному остатку с N-конца. Так, например, Френкель-Конрату удалось определить последовательность первых восьми аминокислот в адрено-кортикотропном гормоне.

3. Для отщепления аминокислотных остатков с С-конца (т. е. аминокислотных остатков со свободным карбоксилом) Акабори предложил использовать действие гидразина (при 100° С в течение нескольких часов). Реакция может быть изображена так:

Н 2 N С11С — NIIС и С—N и С и С О 011 -f 2 N и а N112 ?

I II I II I

R О R' О R"

—-> H2NCHC—NHNHe+H2NCHC—NHNHa + HsNCH—С —ОН

I II I II I II

R О R О R" О

Из схемы видно, что вся цепь распадается на гидразиды аминокислот, кроме первой (с С-конца) аминокислоты, которая выделяется в свободном виде. После обработки полученной смеси подходящим альдегидом, связывающим гидразиды в малорастворимые гидразоны, свободную аминокислоту выделяют хроматографически.

4. Проще всего для отщепления С-концевых аминокислот пользоваться ферментативным гидролизом. Так, фермент карбоксипептидаза (из поджелудочной железы) последовательно отрывает аминокислоты, содержащие карбоксильную группу. Недостаток этого метода состоит в том, что пролин и оксипролин карбоксипептидазой не отщепляются.

Конечно, цепь последовательных расщеплений гораздо проще применить к полинептидам с небольшим числом аминокислотных остатков, чем к белкам сложного строения. В случае сложных белков пользуются тем, что гидролиз в разных условиях расщепляет их по разным связям и, следовательно, дает разный набор более низкомолекулярных полипептидов. При гидролизе разбавленными кислотами разрываются прежде всего связи двухосновных аминокислот, под действием концентрированных кислот рвутся в первую очередь связи оксиаминокислот, при щелочном гидролизе разрываются связи треонина. Фермент пищеварения — трипсин расщепляет пептидные связи лизина и аргинина с аминогруппами других аминокислот, химотрипсин рвет связи ароматических аминокислот, карбоксипептидаза, как уже было сказано, отщепляет С-концевые аминокислоты со свободным карбоксилом, а аминопептидаза — М-кон-цевые аминокислоты со свободной a-NH2-группой. Следующая схема иллюстрирует сказанное:

t Трипсин ,

i ;

Val-^Cys-Cly-Giu-ArgiGIy-PhejLeu-TyrjTre-Pro-Lys^^SerjAla

: : ! !

Аминопептидлча Химотрипсин Кпроокслпсптидлза

В результате гидролиза в разных условиях получается набор полннеп-тидных осколков, которые разделяют хроматографическнми методами, разработанными Мартином и Синджем. Это методы бумажной хроматографии, распределительной хроматографии, а также электрофореза. Последовательность связей аминокислот в каждом из полипептпдных осколков может быть установлена приведенными выше методами, например методом Эдмана. Сопоставляя эту последовательность в каждом осколке

и принимая во внимание, что в некоторых осколках происходит наложение (они содержат последовательность амин

страница 224
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266

Скачать книгу "Начала органической химии. Книга вторая" (16.56Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
курсы по flash
кинотеатральные кресла для дома
купить fissler premium
купить круглый стол недорого

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(06.12.2016)