химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 3

Автор Д.Мецлер

ксперименты по определению доступности боковых цепей триптофана для растворителя, в которых в качестве тушителя используется акриламид [59, 60].

1. Поляризация флуоресценции

Свет, испускаемый возбужденными молекулами немедленно после его поглощения, всегда частично поляризован независимо от того, был ли плоскополяризован возбуждающий свет. Со временем, после того как молекулы примут беспорядочную ориентацию, поляризация люминесцентного излучения исчезает. Зная степень деполяризации флуоресценции, можно получить ценную информацию о скорости вращения макромолекул, с которыми связан флуоресцирующий хромофор, а также о подвижности хромофорных групп внутри макромолекулы, клеточной мембраны и т. д. [52, 53, 55, 61]. Скорость вращения, получаемая из данных по измерению степени поляризации, сильно зависит от вязкости

'> Непосредственно измеренное время жнзни возбужденного состояния для рибо-флавин-5'-фосфата <етах=12 200 при 450 им) при 25 °С равно ~ 5 ис [57].

Среды [см. уравнение (6-32)]. Введение флуоресцентных «зондов» (например, 1-анилинонафталин-8-сульфоната) в мембраны, сократительные волокна и т. д. дает возможность исследовать изменения подвижности, которыми могут сопровождаться изменения физиологических условий. Таким способом были исследованы возможные молекулярные изменения в мембранах при прохождении нервного импульса и в митохондриях в процессе переноса электронов [61, 62].

2. Внутримолекулярный перенос энергии

Нередко электронное возбуждение одного хромофора вызывает флуоресценцию другого хромофора, расположенного поблизости. Так, например, возбуждение молекул красителя, образующих монослой, приводит к флуоресценции слоя другого красителя, находящегося от первого на расстоянии 5 нм. Возбуждение остатков тирозина в белках может вызвать флуоресценцию триптофана, а возбуждение триптофана— флуоресценцию красителя, связанного с поверхностью молекулы белка, или флуоресценцию связанного кофермента [57]. Такого рода резонансный перенос энергии характерен для тех случаев, когда спектр флуоресценции одной молекулы перекрывается со спектром поглощения другой. При этом реального испускания и поглощения света не происходит, а имеет место безызлучательный перенос энергии. Резонансный перенос энергии имеет большое биологическое значение для фотосинтеза. Поскольку молекула с е = 3-104 при воздействии прямого солнечного света поглощает около 12 квантов света в секунду, мономолекулярный слой хлорофилла будет поглощать всего 1% общего числа квантов, падающих на поверхность "листа [63]. По этой причине молекулы хлорофилла располагаются в виде многочисленных тонких слоев внутри хлоропластов. Однако непосредственно в реакционных центрах, где идут фотохимические процессы, находится лишь небольшое число специализированных молекул хлорофилла. Остальные молекулы поглощают свет и передают энергию в реакционный центр небольшими порциями.

Как подсчитал Фёрстер [63а], константа скорости переноса энергии пропорциональна константе скорости флуоресценции k\% геометрическому фактору К2, площади перекрывания спектров / и обратно пропорциональна четвертой степени показателя преломления и шестой степени расстояния г между хромофорами:

ЬСХ^КЧп-'г*. (13.18)

Фёрстер не только предсказал характер зависимости константы скорости переноса энергии от /-, но и предложил формулу для расчета расстояния RQ между хромофорами, при котором синглет-синглетный перенос энергии происходит с 50%-ной эффективностью. Обычно Ro имеет порядок 2,0 нм. Используя эти соотношения, Страйер предложил метод измерения расстояния между хромофорами. Ои провел калибровку метода, использовав семейство молекул, содержащих жесткую тройную полипролиновую спираль различной длины, к которой с одного конца присоединена дансильная группа (гл. 2, разд. 3,4), а с другой — нафтильная [64 ,65]. Если происходит перенос энергии, то, возбуждая нафтильные группы, имеющие полосы поглощения в высокоэнергетической области, можно наблюдать флуоресценцию с максимумом при

больших длинах волн, характерную для дансильных групп. Поскольку спектр флуоресценции нафтильной группы перекрывается со спектром поглощения дансильной группы, эффективность такого переноса энергии должна быть достаточно высокой. Полученная зависимость эффективности переноса от расстояния представлена на рис. 13-17. Обратите внимание, насколько хорошо выполняется пропорциональность эффективности переноса г~6; при этом R0 = 3,4 нм. Проведя такую «спектроскопическую» калибровку, Страйер обратился далее к биохимическим макромолекулам. Присоединяя флуоресцентные зонды к родопсину, являющемуся рецептором видимого света, By и Страйер смогли оценить расстояния между специфическими участками молекулы, что позволило им сделать некоторые заключения относительно общей формы молекулы!

При введении тербия(III) в каль-цийсвязывающий центр термолизина (гл. 7, разд. Г, 4) наблюдалась флуоресценция, обусловленная переносом энергии от иона кобальта(II), находящегося в центре связывания цинка. С помощью уравнения Фёрстера

страница 14
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 3" (6.17Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
lamkur светильники купить
Выгодно кликнуть на ссылку - скидка в KNS по промокоду "Галактика" - пк - кредит онлайн по всей России и не выходя из дома!
маникюр педикюр и наращивание ногтей курсы для начинающих
катализатор форд

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(07.12.2016)