![]() |
|
|
Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 3ьно 1600 нуклеотидов, но в цитоплазме она укорачивается приблизительно до 1300 нуклеотидов. Как ядерная, так и цитоплазматическая мРНК содержат небольшие участки полиадениловой кислоты (разд. Б, 5). ПуCQ t, ЛГО/76 • с/7 РИС. 15-34. Кривые ренатурации ДНК млекопитающих. А. Доказательство наличия в геноме теленка повторяющихся и неповторяющихся последовательностей. Верхняя кривая отражает реассоциацию фрагментов ДНК теленка, имеющих длину около 400 нуклеотидов. Инкубацию проводили при 60 °С в 0,12 М фосфатном буфере, а анализ проводился при тех же условиях оксиапатитным методом (гл. 2, разд. Г,10). Нижняя кривая отражает реассоциацию небольшого количества меченых фрагментов, содержащих 4000 нуклеотидов, с большим количеством фрагментов содержащих 400 нуклеозидов. ДНК последовательно фракционировали на три части: 1) быстро реассоциирую-щую фракцию (CV~3-104), содержащую около 106 копий в геноме (сателлитная ДНК); 2) промежуточную фракцию (Cot&0,01), содержащую около 66000 копий (37%); 3) медленно реассоциирующую фракцию ДНК (LVps'IOOO), не содержащую повторов (см. рис. 2-29 в статье Britten R. J., Smith J., Carnegie Inst. Wash. Yearb., 68, 378—393, 3970). Б. Реассоциация фрагментированной денатурированной ДНК мыши в 48%-ном растворе формамида и 5 х SSC (SSC означает раствор, содержащий 0,15 М NaCl и 0,015 М цитрата Na) при 37 °С. Реакцию реассоциации проводили при двух концентрациях: 1) 50 мкг/мл в стеклянных кюветах и с пришлифованными пробками с длиной оптического пути 1 см (Л) и 2) 1 мг/мл в кюветах с толщиной слоя 1 мм (О). Гнпохромный эффект измеряли при 270 нм. Полученные данные приведены в виде зависимости количества ДНК, реассоциированной в течение данного времени, от произведения исходной концентрации ДНК (в молях фосфора на 1 л) на время реассоциации (в секундах). Установлено, что в образце содержится 10% быстро ренатури-рующей сателлитной ДНК, 15% промежуточной частично измененной ДНК и 75% ДНК с уникальной последовательностью (McConaughy В. L., McCarthy В. J. Biochem. Genet., 4, 425—446, J970). тем ферментативного гидролиза можно выделить эти участки и определить их длину. Оказалось, что в ядерной мРНК эти участки включают приблизительно 25 остатков адениловой кислоты. Очевидно, эти участки поли (А) 25 транскрибируются с ДНК вместе с остальными участками мРНК, поскольку сама ДНК содержит около 15 000 последовательностей поли (dT) 25. Этого числа участков поли^Т) достаточно для того, чтобы каждый ген содержал хотя бы один такой участок. Сходные участки поли(дТ) были обнаружены в ДНК всех многоклеточных. Так, например, в ДНК дрозофилы оказалось около 6000 таких участков, что находится в соответствии с наличием у нее 5000 дисков поли-тенных хромосом. В геноме млекопитающих содержится около 100 000 участков поли(дТ). Что касается цитоплазматической мРНК, то, несмотря на меньший размер, она содержит больше поли (А). Так, например, в мРНК Dictyo\ Повторы Единичная копия А 25 00/,
I Перенос в цитоплазму (15-14) торяющиеся последовательности, участки единичных копий, поли (А) 25 и «спейсерная область» имеются в каждом гене. После транскрипции от мРНК отщепляется кусок РНК. соответствующий спейсерному участку, оставляя на З'-конце поли (А) 25 неизвестное число нуклеотидов (Хр), и затем уже перед выходом в цитоплазму к ней присоединяется около 100 остатков адениловой кислоты [278]. Считают также, что могут иметь место другие «тандемные повторы», соответствующие «повторяющимся генам», которые для обеспечения клетки адекватными транскриптами должны существовать в виде больше чем одной копии. е. Гены рибосомной РНК Если большинство генов присутствует в хромосоме в единственном числе, то гены рибосомной РНК и тРНК представлены множеством копий. В случае Xenopus гены РНК 28S- и 18S-PN6OCOM повторяются в одной хромосоме приблизительно 450 раз. На концах длинных плеч большинства хромосом обнаруживается около 24000 копий генов 5S-PHK [281]. Гены 28S- и 18S-PHK транскрибируются вместе с расположенным между ними спейсерным участком. Нетранскрибируемые спейсерные участки располагаются, как это видно на приведенных на рис. 15-11 электронных микрофотографиях, между повторяющимися парами генов. Известно, что для гена, кодирующего 5S-PHK, характерно высокое содержание GC-nap; следовательно, эти участки должны быть устойчивы к тепловой денатурации. Действительно, на денатура-ционной карте ДНК обнаруживаются легко денатурирующие участки, разделенные более короткими последовательностями из 120 оснований с высоким содержанием GC-nap, которые кодируют, вероятно, 5S-PHK-Легко денатурирующие (богатые AT) спейсерные участки включают приблизительно 630 оснований. При помощи специфических рестриктирующих ферментов многие из этих АТ-богатых участков были разрезаны на повторяющиеся единицы, внутри которых также содержались повторы. Основной 15-нуклеотидный фрагмент с последовательностью' A4CUCA3CU3G повторялся примерно 30 раз [282]. В случае дрозофилы карта участка 5S-PHK в хромосоме 2, полученная п |
[каталог] [статьи] [доска объявлений] [прайс-листы] [форум] [обратная связь] |
|
Введение в химию окружающей среды. Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей
среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги
заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в
разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности.
Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и
атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на
химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах.
Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии
университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга
читателей.
Химия и технология редких и рассеянных элементов. Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов
химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии
лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во
второй
части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана,
лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В
третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия,
тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание
уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В
технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика
рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов
производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие
составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по
1972 год включительно.
|
|