химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 3

Автор Д.Мецлер

плазмид хорошо изучены с генетической точки зрения. Во многих случаях репликация зависит как от генов вируса, так и от генов клетки-хозяина. Так, например, мутации генов dnaB, D, Е, F и G приводят к потере способности поддерживать рост фага X точно так же, как и в случае, когда инактивированы /s-гены. Вместе с тем фаг X сохраняет способность к репликации в бактериях с мутантными генами Л и С. Многие вирусы, в том числе Т-четные фаги, содержат гены, кодирующие синтез своих собственных специфических ДНК-полимераз и других белков, необходимых для репликации.

а. Репликативные формы

Было установлено, что на первом этапе репликации вирусов Ф X и М13 присходит превращение одноцепочечной замкнутой кольцевой ДНК инфицирующей вирусной частицы в кольцевую двухцепочечную репликативную форму (RF). Двухцепочечные кольцевые молекулы далее несколько раз подвергаются репликации, в результате чего образуется большое число кольцевых молекул RF, играющих роль матриц для синтеза большого числа одноцепочечных вирусных (4-)-ДНК, из которых образуются зрелые вирусы. Оба этапа — превращение одноцепо-чечной ДНК в репликативную форму и удвоение последней — в настоящее время интенсивно исследуются [201], Для осуществления первого этапа у вирусов ФХ и М13 геном бактерии-хозяина должен обязательно содержать активный ген ДНК-полимеразы III (dnaE)Тем не менее оказалось, что если при проведении реакции в пробирке ввести в нее предварительно очищенную ДНК-полимеразу III, то она не проявляет активности. Дальнейшие попытки получить чистый фермент привели к выделению нового продукта гена dnaE, который получил название ДНК-полимеразы III*. Этот фермент является, судя по всему, более высокомолекулярным полимером, чем ДНК-полимераза III [202]. Для осуществления репликации необходим, однако, еще один белок с мол. весом 77000, известный под названием кополимеразы III*. Наиболее активен тетрамер кополимеразы III* и полимеразы III [202]. Для функционирования системы необходимо также наличие спермидина и АТР (во время инициации процесса полимеризации АТР расщепляется до ADP и Pi), а также всех четырех дезоксирибонуклеозидтрифосфатов.

б. РНК-затравки

Исследователей репликации вирусов М13 и ФХ ожидал еще один сюрприз. Оказалось, что для образования RF-ДНК необходима РНК-полимераза. Это послужило одним из многих доводов в пользу предположения, согласно которому для того, чтобы начать синтез ДНК необходим небольшой фрагмент (затравка) РНК [уравнение (15-3)]. Аналогичные наблюдения были сделаны при изучении репликации ДНК плазмиды колицин Е-1. Этот процесс чувствителен IK рифампицину — специфическому ингибитору РНК-полимеразы (дополнение 15-А). Для репликации ДНК наряду с дезоксирибонуклеозидтрифосфатами необходимы также четыре рибонуклеозидтрифосфата [203].

В результате последующих исследований было установлено, что в кольцевой ДНК плазмид присутствуют фрагменты РНК, которые могут содержаться также и в ДНК вирусов и Е. coli. В случае фага ФХ синтез этой РНК обеспечивает специальная резистентная к рифампицину РНК-полимераза с мол. весом приблизительно 64 000, синтез которой закодирован в гене dnaG Е. coli. Возможно, что именно этот фермент необходим для нормального первичного синтеза ДНК у Е. coli [204]. В удалении РНК-затравки определенную роль может играть специальная рибонуклеаза РНКаза Н, специфически расщепляющая цепь PFJK из комплекса РНК—ДНК. В результате действия РНКазы Н в цепи будет образовываться промежуток, ликвидировать который может ДНК-полимераза [205]. Однако вопрос о том, какой фермент на самом деле удаляет РНК-затравку, остается открытым. В опытах in vitro РНКаза Н удаляет РНК не полностью. Не исключено, что РНК-затравка удаляется за счет 5'-экзонуклеазной активности ДНК-полимеразы I (рис. 15-30) [205а].

*> Репликация фага Ф X требует также продуктов генов dna В, С, D и G, «расплетающего белка» (разд. Д,5,в) и двух других «факторов».

zra 1№ъа is

в. «Расплетающие» белки

При генетическом анализе процесса репликации ДНК фага Т4 оказалось, что для образования вирусной ДНК в клетках Е. coli необходимо по меньшей мере пять вирусных генов. Один из них, а именно ген 43, кодирует синтез ДНК-полимеразы фага Т4, тогда как ген 32 кодирует белок, известный под названием ДНК-расплетающего белка [206]. Этот белок, обладая большим сродством к одноцепочечной ДНК, чем к двухцепочечной, связывается с концевым одноцепочечным участком двойной спирали ДНК, расплетая ее и делая доступными пуриновые и пиримидиновые основания матричной цепи. В результате генетических исследований было установлено, что этот белок необходим как для репликации, так и для генетической рекомбинации. Был выделен аналогичный белок, синтез которого индуцируется фагом Т7; другой белок этого же типа удалось выделить из неинфицированной Е. coli [207, 208]. У эукариот также имеются белки, связывающиеся с ДНК [208а]. Истинная функция этих «расплетающих» белков на молекулярном уровне все еще не установлена. Таким образом, дальнейшие исследования процесса репликации ДНК до

страница 126
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 3" (6.17Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
стойка под плазму в аренду
Фирма Ренессанс: лестница-люк на чердак цена - надежно и доступно!
стул изо купить
аренда склада для хранения вещей

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(09.12.2016)