![]() |
|
|
Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 2илом [22]:ЙГ"*+ [А] + [В] + [А][В] • Суммарная концентрация фермента обычно равна vtfkt [см. уравнение (6-6)]. ИЭ уравнения (6-356) следует, что q>o—l/*f. причем для схемы (6-34) k% может быть ПРИравнена в некоторых случаях константе к§. Л J ^ j_ А [А] Б [В] В [В] PHCj 6-5 Графики двойных обратных координат, используемые для анализа кинетики двухсубстратных ферментативных реакций. А Серия зависимостей \(Щ от 1/[А] при различных фиксированных концентрациях второго субстрата (В). Б Вторичный график зависимости длины отрезка, отсекаемого на оси ординат прямыми в координатах (1/ff; 1/[А]}, от 1/[В] В Вторичный график зависимости наклона первичных зависимостей, представленных на рис А, от 1/[В]. Все зависимости рассчитаны с помощью уравнения (6-35а) при следующих значениях параметров Км\=\0~3 М, КМВ«2/Сма, /CAB=/CeqA/CMS=/CMA/200, [А]^[В] = 1 М В качестве первичных графиков можно использовать также графики Эдн — Хофсти, т е графики зависимости V:/[A] -от VJR построенные при постоянных концентрациях субстрата В Читатель без особого труда может преобразовать уравнение {6 35а) к линейной форме типа (6 20) руют, например, концентрацию субстрата А, поддерживая концентрацию В постоянной. Затем фиксируют концентрацию субстрата А и варьируют концентрацию субстрата В. Каждая серия подобных экспериментов дает семейство прямых (рис. 6-5,Л), для которых находят наклоны и отсекаемые на оси ординат отрезки. Далее строят зависимость наклонов и отсекаемых отрезков от обратной концентрации того субстрата, концентрация которого в каждой из серий экспериментов поддерживалась постоянной. Из этих вторичных графиков можно определить значение Vt и одной из констант Михаэлиса (рис. 6-5,? и В). Два набора вторичных графиков позволяют найти все константы уравнения (6-356) (однако при этом произведение К&цкКмъ рассматривается как одна константа КАВ). Кинетические параметры можно определить и с помощью численных методов, которые дают возможность обрабатывать сразу все данные и получить оптимальные значения параметров. Преимущество этого подхода состоит в том, что он позволяет надежно оценить стандартные отклонения для найденных значений параметров [1]. Некоторые кинетические параметры имеют ясный физический смысл. Параметр Vf—это скорость, достигаемая при условии, когда концентрация субстрата А и концентрация субстрата В бесконечно высоки. Каждая константа Км. соответствует константе Михаэлиса для простой системы, в которой концентрация второго субстрата достаточно высока, чтобы насытить фермент. Для рассмотренной выше бимолекулярной реакции справедливы два следующих соотношения Холдейна1': Aeq ~ УгКаХКмв ~~ \ ) Кмд^ав ' 1 ; Из этих двух соотношений обычно используется только первое. 1 \ ч J> Входящие в эти соотношения коцстанты задаются следующими соотношениями (см, например, Segel I Н Enzyme kinetics, J Wiley and Sons, New York, 1975, p. 5641» "10 MB - kt (*A+Me+ V5+ hh) * ' k2kt -f- k2kb -f- k2k6 -f kjka *dB~ k9(kb+k6) V _ rPi k7kSkb VI ~ I*1" kih+ kgku+ ks)k6 . K hhK6 K _ ft2 (^4fe7+ Ms) AMP ~ ka (k2kA + k2kb + k2kt+ ktkt)' k^kf + feyfeg -f fegfe5 + k9ke v _rEU ЬМй Заметим также, что константа Клл ранее обозначалась автором как — Прим. перев. А. Механизмы типа «пинг-понг» Особенно распространенным механизмом для ферментативных реакций, протекающих с участием кофермента, является так называемый механизм типа пинг-понг; отличительной чертой его является то, что фермент находится то в форме Е, то в форме Е': Р В Q H I *в K7 I H K ?ц f ?12 Е'Р —J EJ -Л Е'В EQ ! Е. (6-37) Механизм типа пинг-понг для реакции между А и В, приводящей к образованию Р и Q Взаимодействие фермента с субстратом А приводит к образованию формы Е' через комплекс ЕА. Е' — это модифицированная форма фермента, в которой кофермент часто оказывается химически модифицированным (примером может служить реакция переаминирования; гл. 8, разд. Д, 1). Одновременно субстрат А превращается в продукт Р, все еще связанный с ферментом. Отщепление продукта Р приводит к высвобождению формы Е', которая затем может взаимодействовать со вторым субстратом, В, и проходить вторую половину цикла с превращением формы Е' в форму Е. Уравнения скорости для механизма типа пинг-понг напоминают по форме уравнения скорости для бимолекулярной реакции с упорядоченным присоединением субстратов (6-35а) и (6-356), однако каждое из них содержит на один член меньше'): Vt [А] [В] б_3. Щ -*мв ГА] + *ма [В] + [А] [В] • Соответственно из кинетических данных получают в этом случае на один кинетический параметр меньше, чем для реакций с упорядоченным присоединением субстратов. Кинетическая схема (6-37) для ферментативной реакции, протекающей по механизму типа пинг-понг, содержит 12 кинетических констант. Это соответствует минимальному числу стадий, которые необходимо рассмотреть, чтобы описать кинетические свойства фермента, функционирующего согласно механизму типа пин |
[каталог] [статьи] [доска объявлений] [прайс-листы] [форум] [обратная связь] |
|
Введение в химию окружающей среды. Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей
среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги
заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в
разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности.
Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и
атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на
химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах.
Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии
университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга
читателей.
Химия и технология редких и рассеянных элементов. Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов
химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии
лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во
второй
части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана,
лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В
третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия,
тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание
уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В
технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика
рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов
производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие
составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по
1972 год включительно.
|
|