химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 2

Автор Д.Мецлер

илом [22]:ЙГ"*+ [А] + [В] + [А][В] •

Суммарная концентрация фермента обычно равна vtfkt [см. уравнение (6-6)]. ИЭ уравнения (6-356) следует, что q>o—l/*f. причем для схемы (6-34) k% может быть ПРИравнена в некоторых случаях константе к§.

Л J ^ j_

А [А] Б [В] В [В]

PHCj 6-5 Графики двойных обратных координат, используемые для анализа кинетики двухсубстратных ферментативных реакций. А Серия зависимостей \(Щ от 1/[А] при различных фиксированных концентрациях второго субстрата (В). Б Вторичный график зависимости длины отрезка, отсекаемого на оси ординат прямыми в координатах (1/ff; 1/[А]}, от 1/[В] В Вторичный график зависимости наклона первичных зависимостей, представленных на рис А, от 1/[В]. Все зависимости рассчитаны с помощью уравнения (6-35а) при следующих значениях параметров Км\=\0~3 М, КМВ«2/Сма, /CAB=/CeqA/CMS=/CMA/200, [А]^[В] = 1 М В качестве первичных графиков можно использовать также графики Эдн — Хофсти, т е графики зависимости V:/[A] -от VJR построенные при постоянных концентрациях субстрата В Читатель без особого труда может преобразовать уравнение {6 35а) к линейной форме типа (6 20)

руют, например, концентрацию субстрата А, поддерживая концентрацию В постоянной. Затем фиксируют концентрацию субстрата А и варьируют концентрацию субстрата В. Каждая серия подобных экспериментов дает семейство прямых (рис. 6-5,Л), для которых находят наклоны и отсекаемые на оси ординат отрезки. Далее строят зависимость наклонов и отсекаемых отрезков от обратной концентрации того субстрата, концентрация которого в каждой из серий экспериментов поддерживалась постоянной.

Из этих вторичных графиков можно определить значение Vt и одной из констант Михаэлиса (рис. 6-5,? и В). Два набора вторичных графиков позволяют найти все константы уравнения (6-356) (однако при этом произведение К&цкКмъ рассматривается как одна константа КАВ). Кинетические параметры можно определить и с помощью численных методов, которые дают возможность обрабатывать сразу все данные и получить оптимальные значения параметров. Преимущество этого подхода состоит в том, что он позволяет надежно оценить стандартные отклонения для найденных значений параметров [1].

Некоторые кинетические параметры имеют ясный физический смысл. Параметр Vf—это скорость, достигаемая при условии, когда концентрация субстрата А и концентрация субстрата В бесконечно высоки. Каждая константа Км. соответствует константе Михаэлиса для простой системы, в которой концентрация второго субстрата достаточно высока, чтобы насытить фермент.

Для рассмотренной выше бимолекулярной реакции справедливы два следующих соотношения Холдейна1':

Aeq ~ УгКаХКмв ~~ \ ) Кмд^ав ' 1 ;

Из этих двух соотношений обычно используется только первое.

1 \ ч

J> Входящие в эти соотношения коцстанты задаются следующими соотношениями (см, например, Segel I Н Enzyme kinetics, J Wiley and Sons, New York, 1975, p. 5641»

"10

MB - kt (*A+Me+ V5+ hh) *

' k2kt -f- k2kb -f- k2k6 -f kjka

*dB~ k9(kb+k6)

V _ rPi k7kSkb

VI ~ I*1" kih+ kgku+ ks)k6 .

K hhK6

K _ ft2 (^4fe7+ Ms)

AMP ~ ka (k2kA + k2kb + k2kt+ ktkt)'

k^kf + feyfeg -f fegfe5 + k9ke

v _rEU ЬМй

Заметим также, что константа Клл ранее обозначалась автором как — Прим. перев.

А. Механизмы типа «пинг-понг»

Особенно распространенным механизмом для ферментативных реакций, протекающих с участием кофермента, является так называемый механизм типа пинг-понг; отличительной чертой его является то, что фермент находится то в форме Е, то в форме Е':

Р В Q

H I *в K7 I H K ?ц f ?12

Е'Р —J EJ -Л Е'В EQ ! Е. (6-37)

Механизм типа пинг-понг для реакции между А и В, приводящей к образованию Р и Q

Взаимодействие фермента с субстратом А приводит к образованию формы Е' через комплекс ЕА. Е' — это модифицированная форма фермента, в которой кофермент часто оказывается химически модифицированным (примером может служить реакция переаминирования; гл. 8, разд. Д, 1). Одновременно субстрат А превращается в продукт Р, все еще связанный с ферментом. Отщепление продукта Р приводит к высвобождению формы Е', которая затем может взаимодействовать со вторым субстратом, В, и проходить вторую половину цикла с превращением формы Е' в форму Е.

Уравнения скорости для механизма типа пинг-понг напоминают по форме уравнения скорости для бимолекулярной реакции с упорядоченным присоединением субстратов (6-35а) и (6-356), однако каждое из них содержит на один член меньше'):

Vt [А] [В] б_3.

Щ -*мв ГА] + *ма [В] + [А] [В] •

Соответственно из кинетических данных получают в этом случае на один кинетический параметр меньше, чем для реакций с упорядоченным присоединением субстратов. Кинетическая схема (6-37) для ферментативной реакции, протекающей по механизму типа пинг-понг, содержит 12 кинетических констант. Это соответствует минимальному числу стадий, которые необходимо рассмотреть, чтобы описать кинетические свойства фермента, функционирующего согласно механизму типа пин

страница 9
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 2" (6.26Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
цветочная арка для свадьбы купить
Компания Ренессанс лестница в доме на второй этаж заказать - надежно и доступно!
стул кресло престиж
удобное хранение одежды

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(11.12.2016)