едленно с тирозильными группами с образованием 3-нитротирозильных групп:

NCU

OzN—С—N02 + -^Q^>-0- >

NOz

NO,

NOa / "

02N-C-N02 + -<ОУ~0~ (7"65) H

Нитраформ

Побочный продукт этой реакции, нитроформ, имеет интенсивно желтую окраску (е35о=14 400 М-1 «СМ-1) [148]. Тетранитрометан окисляет также SH-группы и реагирует с другими анионными группами. Альдолаза превращает тетранитрометан в нитроформ гораздо быстрее в присутствии субстрата, чем в его отсутствие. Отсюда следует, что этот реагент, который можно рассматривать как источник электрофильного нитронийиона NOj, конкурирует с имидазольной группой в реакции взаимодействия с образующимся в качестве промежуточного продукта енамином (рис. 7-10).

б. Изоферменты альдолазы

В большинстве тканей млекопитающих имеется три изофермента альдолазы: А, В и С. Изоферменты А и С содержатся преимущественно в тканях эмбрионов, а в дифференцированных тканях взрослых преобладает изофермент В.

В некоторых опухолях вместо изофермента В появляется эмбриональная форма А. Это особенно характерно для плохо дифференцированных (высокодедифференцированных) и быстро растущих опухолей, например для некоторых гепатом.

е. Два класса альдолаз _ г

Подобно фруктозо-1,6-дифосфат—альдолазе из животных тканей, большое число других альдолаз также инактивируется боргидридом натрия в присутствии субстрата. Этот тип альдолаз («класс I») не требует металлов и не ингибируется ЭДТА. В то же время альдолазы бактерий и грибов ингибируются ЭДТА и содержат в активных центрах металл (обычно Zn2+). Альдолазы этого типа («класс II») не инактиви-руются боргидридом натрия в присутствии субстрата. Читателю предлагается подумать о механизме действия этих ферментов и о роли металла в ферментативном процессе.

Некоторые сине-зеленые водоросли, а также жгутиковые Euglena и Chlamydomonas содержат альдолазы обоих классов.

г. Транс альдолаза

Важный фермент, участвующий в пентозофосфатньгх путях (гл. 9, разд. Д,3), катализирует альдольное расщепление одного субстрата, такого, как фруктозо-1,6-дифосфат, но при этом вместо высвобождения?

свободного диоксиацетонфосфата происходит перенос этой группы, состоящей из трех атомов углерода, на другую альдозу [149]. По-видимому, механизм действия трансальдолазы [уравнение (9-15)] в основном напоминает механизм действия фруктозо-1,6-дифосфат—альдолазы.

д. Другие альдолазы

Имеется большое число альдолаз, катализирующих в различных метаболических превращениях расщепление и образование связи С—С. Значительная часть этих ферментов действует на субстраты, содержащие 2-кето-З-дезоксигруппу [150]. В результате расщепления этих субстратов в качестве одного из продуктов образуется пируват:

СОО"

c=o coo- н ^о

I R

СН,

<1Н2 _ С=0 4- С\ (7-66)

не—он

I

R Пируват

При окислении углеводов по пути Энтнера — Дудорова (гл. 9, разд. Д,4) 2-кето-3-дезокси-6'фосфоглюконат расщепляется с образованием пирувата и глицеральдегид-3-фосфата. Состоящая из восьми атомов углерода сахарная кислота «KDO» клеточных стенок бактерий (рис. 5-10) расщепляется другой альдолазой. В результате катаболических превращений оксипролина образуется 4-окси-2-кетоглутарат, который расщепляется до пирувата и глиоксилата. Альдолаза, участвующая в катаболизме дезоксинуклеотидов, расщепляет 2-дезоксирибозо-5-фосфат до ацетальдегида и глицеральдегид-3-фосфата.

е. Синтетазы поликарбоновых кислот^

Ряд ферментов, в том числе и ключевой фермент, катализирующий образование лимонной кислоты на первой стадии цикла трнкарбоновых кислот, обусловливает альдольную конденсацию ацетил-СоА с ке-тонами:

о

1!

Н3С—С — SCoA

+

о=с—сооI

R

О

I! ,

Н,С — СЧ-SCoA

но—с—сооi

R

СоА—SH

—^ ,

н.о

н>с—соо-" I

15 Согласно классификации, рекомендуемой Международным биохимическим союзом (гл. 6, разд. Ж), эти ферменты относятся к классу лиаз и не должны называться синтетазами. Последнее название закреплено за лигазами. В соответствии с рекомендациями Международного биохимического союза в тех случаях, когда необходимо подчеркнуть синтетический аспект реакций, катализируемых лиазамн, может быть использован термин синтаза. Однако использование двух близких по написанию слов, син-таза и сиитетаза, приводит к путанице и многим биохимикам представляется совершенно ненужным. В настоящей книге используется только термин синтетаза.

НО—С- СОО" (7-67) R

Ацетил-СоА /~~~S СоА

HSКетон \ si-Сторона-та, В случае атаки

R которая находится енолят-анионом

за листом бумаги с si-стороны

или

НО СН,—СООX

~ООС R В случае атаки енолят-анионом с ге-стороны

КетоН

ЛроЬук

т

СООО=СХ

Тлиоксилат

ООС СН,—СОО-НО Н

ь-малат

УглевоЬы и щ.Ь. (через гпиоксилатньш путь)

СООО=С

\

СН,—СООЩавелевоупсусная кислота

Цитрат (si)- -Оос гн _гоп_

—? х

НО СН,—СОО-Цитрат

ДвууглероЬный фрагмент из ацетил-СоА занимаещ npo-S-положенив

СООО=С

\

СН,—СН,—СОСГ

а-Кетоглутарат

НО СН-СОО"

ООС' СН2СН,СООН Гомоцитрат

Лизин