химический каталог




Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 2

Автор Д.Мецлер

.]/[восстан.] для цитохрома Ьк. будет равно 1,75. Если теперь варьировать значение RPr то наблюдаемый потенциал переносчика будет меняться в соответствии с уравнением (10-13). Эти изменения наблюдались экспериментально [73]. При десятикратном изменении Rp наблюдаемый потенциал цитохрома Ьк изменится на 0,030 В, как и можно было предсказать для п=2. Наблюдаемый потенциал цитохрома с при каждом десятикратном изменении R р изменяется на 0,059 В, как можно было легко предсказать, учитывая, что л'=2 и что перенос электронов до цитохрома с сопряжен с синтезом двух молекул АТР. Тем самым мы имеем дополнительное экспериментальное подтверждение довольно интересного явления. Даже при функционировании одноэлектронных переносчиков, таких, как Цитохромы, для синтеза одной молекулы АТР требуется прохождение по цепи двух электронов. Кроме того, из подобных экспериментов можно заключить, что участки фосфорилирования расположены примерно так, как показано на рис. 10-11.

Еще один тип экспериментов основан на уравновешивании цепи переноса электронов с внешней окислительно-восстановительной парой, потенциал которой известен, с использованием разобщенных митохондрий. Значение Е0' для данного переносчика можно затем определить по отношению [окисл.]/[восстан.] согласно уравнению (10-12). В то время как изменения в значении уравновешивающего потенциала Е отразятся на отношении [окисл.]/[восстав:.], значение Я07 останется постоянным. Для Fe — S-белков и атомов меди (в белках) в цепи переноса электронов значения можно получить, уравновешивая митохондрии, а затем быстро замораживая их в жидком азоте. Отношения* [окисл.]/[восстан.] далее рассчитываются нз спектров ЭПР, снятых при 77 К. Результаты таких измерений, опубликованные Вильсоном-и Др. [72—75]|, приведены в табл. 10-6.

По значениям Е0* митохондриальные переносчики разбиваются на-четыре изопотеициальиые группы с потенциалами ~—0,30, ~0, ~0,22* и ~0,39 В (табл. 10-6). Когда жестко сопряженные митохондрии переходят в состояние 4 (низкое содержание ADP, высокое содержание АТР, присутствие Ог, но низкая скорость дыхания), наблюдаемые потенциалы изменяются. У самой низкой изопотенцнальной группы, включающей NAD+/NADH, потенциал снижается до —0,38 В, что соответ-ствует состоянию восстановления переносчиков слева от первого участка фосфорилирования на рис. 10-И. Группы 2 и 3 остаются вблизи и» потенциалов средней точки ~—0,05 и +0,26 В. В этих условиях разность потенциалов между последовательными группами переносчиков* составляет ~0,32 В, чего вполне достаточно для образования одной* молекулы АТР на каждую перенесенную пару электронов, при отношении tfp«104 М-1 [уравнение (10-13)].

Два цитохрома ведут себя особым образом и представлены в< табл. 10-6 дважды. Потенциал цитохрома &т в средней точке меняется от —0,030 В в отсутствие АТР до +0,245 В при высоких концентрациях АТР. С другой стороны, значение Е° для цитохрома аз=* =+0,385 В снижается в присутствии АТР до 0,155 В. Этот сдвиг потенциала дает основание думать, что с синтезом АТР сопряжено окисление высокоэнергетической восстановленной формы цитохрома а&! В присутствии высоких концентраций АТР образование этого проме-* жуточного соединения путем восстановления оказывается более труд-' ным (разд. Д, 9,а). Противоположное по направлению изменение для цитохрома Ьт свидетельствует о том, что высокоэнергетической В* этом случае является окисленная форма [уравнение (10-11)]. Правомерность таких выводов зависит от точности и достоверности, с какой* спектроскопические методы позволяют измерять отношение* [окнсл.]!/[восстан.]. На основании этих результатов делали даже вывод о том, что цнтохромы Ьт и аз непосредственно участвуют в процессе окислительного фосфорилирования [72—75]. Однако с этим далеко не все согласны [77].

8. Реконструкция фосфорилирующих частиц

Предпринималось много попыток расчленить и вновь реконструировать субмитохондриальные фосфорнлирующие частицы. Первым из достижений было удаление нескольких «факторов сопряжения», из которых наиболее известен фактор сопряжения Fi (разд. Д,1). Удаление-фактора Fi из субмитохондриальных частиц всегда ведет к потере им» способности синтезировать АТР, но перенос электронов остается незатронутым. Фосфорилирующую способность можно снова восстановить,, добавляя Fi к мембранным препаратам. Следовательно, Fi теснейшим* образом связан с синтезом АТР. Этот важный белок был выделен из митохондрий и из хлоропластов в виде гомогенных частиц с мол. весом '•-'285000. В его состав входят, по-видимому, полипептидные цепи пяти различных типов с молекулярными весами ^60 000, 56 000, 36000, 17000 и 13 000 [78, 79]'.

Солюбилизацию внутренней митохондриальной мембраны можно осуществлять с помощью детергентов. Так, Рэган и Рэкер [80] гомогенизировали митохондрии в растворе сахарозы и добавляли стероидный детергент холат натрия (рис. 12-16), а также другие реагенты. После осторожного перемешивания смеси и центрифугирования надоса-дочную жидкость фракционирова

страница 180
< К СПИСКУ КНИГ > 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52 53 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 64 65 66 67 68 69 70 71 72 73 74 75 76 77 78 79 80 81 82 83 84 85 86 87 88 89 90 91 92 93 94 95 96 97 98 99 100 101 102 103 104 105 106 107 108 109 110 111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160 161 162 163 164 165 166 167 168 169 170 171 172 173 174 175 176 177 178 179 180 181 182 183 184 185 186 187 188 189 190 191 192 193 194 195 196 197 198 199 200 201 202 203 204 205 206 207 208 209 210 211 212 213 214 215 216 217 218 219 220 221 222 223 224 225 226 227 228 229 230 231 232 233 234 235 236 237 238 239 240 241 242 243 244 245 246 247 248 249 250 251 252 253 254 255 256 257 258 259 260 261 262 263 264 265 266 267

Скачать книгу "Биохимия. Химические реакции в живой клетке. Том 2" (6.26Mb)


[каталог]  [статьи]  [доска объявлений]  [прайс-листы]  [форум]  [обратная связь]

 

 

Реклама
обучение аудитора уфа
самая надёжная автосигнализация
Сковороды BAF интернет магазин
стул venus

Рекомендуемые книги

Введение в химию окружающей среды.

Книга известных английских ученых раскрывает основные принципы химии окружающей среды и их действие в локальных и глобальных масштабах. Важный аспект книги заключается в раскрытии механизма действия природных геохимических процессов в разных масштабах времени и влияния на них человеческой деятельности. Показываются химический состав, происхождение и эволюция земной коры, океанов и атмосферы. Детально рассматриваются процессы выветривания и их влияние на химический состав осадочных образований, почв и поверхностных вод на континентах. Для студентов и преподавателей факультетов биологии, географии и химии университетов и преподавателей средних школ, а также для широкого круга читателей.

Химия и технология редких и рассеянных элементов.

Книга представляет собой учебное пособие по специальным курсам для студентов химико-технологических вузов. В первой части изложены основы химии и технологии лития, рубидия, цезия, бериллия, галлия, индия, таллия. Во второй части книги изложены основы химии и технологии скандия, натрия, лантана, лантаноидов, германия, титана, циркония, гафния. В третьей части книги изложены основы химии и технологии ванадия, ниобия, тантала, селена, теллура, молибдена, вольфрама, рения. Наибольшее внимание уделено свойствам соединений элементов, имеющих значение в технологии. В технологии каждого элемента описаны важнейшие области применения, характеристика рудного сырья и его обогащение, получение соединений из концентратов и отходов производства, современные методы разделения и очистки элементов. Пособие составлено по материалам, опубликованным из советской и зарубежной печати по 1972 год включительно.

 

 



Рейтинг@Mail.ru Rambler's Top100

Copyright © 2001-2012
(06.12.2016)